Într-o noapte, la Mirage Studios, în noiembrie 1983, Kevin Eastman și Peter Laird lucrau din greu la cel mai recent capitol al benzii lor desenate Fugitoid, când Eastman, lovit de o inspirație necunoscută, a desenat o „țestoasă ninja” mascată și mânuitoare de nunchuck. I-a arătat-o lui Laird, iar cei doi au râs împreună de prostia pură a premisei.
„Pete a desenat una mai mișto”, își amintește Eastman. „Apoi, bineînțeles, a trebuit să întregesc schița lui, așa că am desenat patru dintre ei stând într-o poziție dramatică. Asta a fost în creion, dar Pete a cernut-o cu cerneală și a adăugat „teenage mutant” la partea cu „broasca țestoasă ninja”. Ca să fiu sincer, am făcut pe noi în seara aia. ‘Acesta este cel mai prostesc lucru din toate timpurile.'”
Cu cât se gândeau mai mult la asta, cu toate acestea, cu atât vedeau mai mult potențial în acest concept neobișnuit. Având în vedere că munca lor la prima poveste Fugitoid se apropia de sfârșit, cei doi au decis să facă din Țestoasele Ninja Mutante Adolescente următorul lor proiect de benzi desenate. Inspirându-se din unele dintre benzile lor desenate contemporane preferate, inclusiv din aventura epică a samurailor Ronin a lui Frank Miller și din celebrul său serial Daredevil de la Marvel Comics – împreună cu dragostea lor comună pentru Jack Kirby – s-au apucat de lucru pentru a dezvolta universul Țestoaselor.
Povestea de origine a Țestoaselor Ninja Teenage Mutant a adus un omagiu primului număr din Daredevil din 1963, în care tânărul Matt Murdock este orbit de un izotop radioactiv în timp ce împinge un bătrân orb din calea unui camion care venea din sens opus. Eastman și Laird au extrapolat că, după ce bidonul care conținea acel izotop l-a lovit pe Murdock, acesta s-a ciocnit cu un trecător care transporta un acvariu în care se aflau animalele sale de companie – patru pui de broască țestoasă. Broaștele țestoase și canistra, care purtau inițialele T.C.R.I., au căzut pe un grătar în canalizarea de dedesubt, unde au fost descoperite de un șobolan curios, Splinter. Splinter fusese animalul de companie al războinicului ninja exilat Hamato Yoshi, care a fost ucis împreună cu iubita sa, Tang Shen, de către trădătorul Oroku Saki, care îl învinovățea pe Yoshi pentru moartea fratelui său, Oroku Nagi.
„Numele lui Splinter a fost un vârf de pălărie pentru personajul secundar al lui Daredevil, Stick”, își amintește Laird, vorbind despre maestrul ninja creat de Miller, care i-a oferit tânărului Matt Murdock abilitățile de care avea nevoie pentru a lupta împotriva crimei ca Daredevil. „Cred că am ales un șobolan pentru că, atunci când am început să elaborăm povestea pentru primul număr din TMNT, știam că o mare parte din ea se va petrece în canalele de scurgere a apelor pluviale, în canalizările și pe străduțele din spatele orașului și ne-am gândit că un locuitor obișnuit al acestor locuri este umilul șobolan.” Din moment ce Mâna îl amenința pe Daredevil în timpul mandatului lui Miller, era firesc ca Țestoasele să se afle în conflict cu The Foot, un clan de ninja al cărui lider, Shredder, era nimeni altul decât Oroku Saki. Shredder și-a inspirat designul de la o răzătoare metalică de brânză care i s-a părut lui Eastman ca fiind o potențială armă în mâinile persoanei nepotrivite.
Utilizând exemplarul lui Laird din Istoria Artei de Janson ca sursă de inspirație, cei doi au ales nume pentru Țestoase de la patru dintre artiștii lor renascentiști favoriți: Leonardo, Michelangelo, Donatello și Raphael. Întrucât cele patru Țestoase erau practic identice ca înfățișare, în special pentru că cartea urma să fie publicată în alb și negru, Eastman și Laird le-au diferențiat prin alegerea armelor: Leonardo avea să mânuiască o pereche de lame katana, Michelangelo folosea nunchakus, Donatello stăpânea bastonul bo, iar Raphael prefera saisul asemănător cuțitului. Iar Maestrul Splinter, șobolanul mutant, a fost cel care și-a asumat meritul de a le fi dat numele Țestoaselor chiar în primul număr. Cu toate acestea, Maestrul Splinter nu era un maestru în ortografie, deoarece și-a poreclit elevul care mânuia nunceagul „Michaelangelo” – o greșeală de ortografie care a rămas cu personajul pentru anii următori.
.