Versio, jossa on ylimääräisiä vasta-aineitaEdit
Agglutinaatiokokeessa henkilön seerumi (jossa on vasta-aineita) lisätään koeputkeen, joka sisältää tiettyä antigeenia. Jos vasta-aineet agglutinoituvat antigeenin kanssa muodostaen immuunikomplekseja, testi tulkitaan positiiviseksi. Jos vasta-aineita, jotka voivat sitoutua antigeeniin, on kuitenkin liikaa, vasta-aineet peittävät antigeenikohdat, ja vain harvat tai ei lainkaan taudinaiheuttajalle suunnatut vasta-aineet pystyvät sitomaan useamman kuin yhden antigeenipartikkelin. Koska vasta-aineet eivät muodosta siltaa antigeenien välille, agglutinaatiota ei tapahdu. Koska agglutinaatiota ei tapahdu, testi tulkitaan negatiiviseksi. Tässä tapauksessa tulos on väärä negatiivinen. Suhteellisen korkeiden vasta-ainepitoisuuksien aluetta, jolla reaktiota ei tapahdu, kutsutaan proalueeksi.
Versio, jossa on liikaa antigeenejäEdit
Efekti voi ilmetä myös antigeenin liikakertoimen vuoksi, kun sekä sieppaus- että detektiovasta-aineet kyllästyvät korkeaan analyyttipitoisuuteen. Tällöin sieppausvasta-aineesta, antigeenistä ja detektiovasta-aineesta ei voi muodostua sandwichiä. Tällöin vapaa antigeeni kilpailee kaapatun antigeenin kanssa havaitsemisvasta-aineen sitoutumisesta. Antigeenin ja vasta-aineen lisääminen peräkkäin sekä tiukka pesu voivat estää tämän vaikutuksen, samoin kuin vasta-aineen ja antigeenin suhteellisen konsentraation lisääminen, mikä lieventää vaikutusta.
Esimerkkeinä voidaan mainita HIV-potilaiden korkeat syfilisvasta-ainepitoisuudet tai korkeat kryptokokkiantigeenin pitoisuudet, jotka johtavat vääriin negatiivisiin testeihin laimentamattomissa näytteissä. Tätä ilmiötä esiintyy myös bruselloosin serologisissa testeissä. Serologinen testi näkyy pääasiassa saostusreaktiossa. Vasta-ainetta, joka ei reagoi, kutsutaan estäväksi vasta-aineeksi, ja se estää saostavaa vasta-ainetta sitoutumasta antigeeneihin. Näin ollen asianmukaista saostusreaktiota ei tapahdu. Kun seerumia kuitenkin laimennetaan, myös estävä vasta-aine laimennetaan ja sen pitoisuus pienenee niin paljon, että asianmukainen saostusreaktio voi tapahtua.