Krokverkan

Version med överskott av antikropparRedigera

Illustration av effekterna av överskott av antigen och blockerande antikroppar på immunoassays.

I ett agglutinationstest tillsätts en persons serum (som innehåller antikroppar) till ett provrör, som innehåller ett visst antigen. Om antikropparna agglutinerar med antigenet för att bilda immunkomplex tolkas testet som positivt. Men om det finns för många antikroppar som kan binda till antigenet, så beläggs de antigena platserna med antikroppar, och få eller inga antikroppar som är riktade mot patogenen kan binda mer än en antigenpartikel. Eftersom antikropparna inte överbryggar antigenerna uppstår ingen agglutination. Eftersom ingen agglutination sker tolkas testet som negativt. I detta fall är resultatet falskt negativt. Det område med relativt höga antikroppskoncentrationer inom vilket ingen reaktion sker kallas prozonen.

Version med överskott av antigenerRedigera

Effekten kan också uppstå på grund av överskott av antigener, när både fångst- och detektionsantikropparna blir mättade av den höga analytkoncentrationen. I detta fall kan ingen sandwich bildas av den infångande antikroppen, antigenet och detektionsantikroppen. I detta fall konkurrerar det fria antigenet med det fångade antigenet om bindningen av detektionsantikroppen. Sekventiell tillsats av antigen och antikropp, tillsammans med sträng tvättning, kan förhindra denna effekt, liksom en ökning av den relativa koncentrationen av antikropp i förhållande till antigen, vilket kan mildra effekten.

Enkel illustration av effekterna av överskott av antigen och dosresponskurvan.

Exempel inkluderar höga nivåer av syfilisantikroppar hos HIV-patienter eller höga nivåer av kryptokockantigen som leder till falskt negativa tester i outspädda prover. Detta fenomen förekommer även vid serologiska tester för brucellos. Det serologiska testet syns främst i fällningsreaktionen. Den antikropp som inte reagerar kallas blockerande antikropp och hindrar den fällande antikroppen från att binda till antigenerna. Därmed sker inte den korrekta fällningsreaktionen. När serumet späds ut, späds dock även den blockerande antikroppen ut och dess koncentration minskar tillräckligt mycket för att den korrekta fällningsreaktionen ska kunna äga rum.