Modulação do Processo Inflamatório por Homeopatia Arnica montana 6CH: O Papel da Variação Individual

Abstract

Os efeitos da Arnica montana 6cH na modulação individual da cinética da inflamação aguda em ratos foram avaliados. Ratos Wistar machos adultos foram inoculados com 1% de carragena no pedal e tratados com Arnica montana 6cH, dexametasona (4,0 mg/kg; controle positivo) ou 5% de solução hidroalcoólica (controle negativo), por os, a cada 15 minutos, entre 30 e 180 minutos após a inoculação do irritante. Procedimentos histopatológicos e imunohistoquímicos foram feitos para obter um painel de células inflamatórias positivas para CD3 (linfócitos T), CD45RA (linfócitos B), CD18 (beta 2 integrina), CD163 (proteína ED2), CD54 (ICAM-1) e MAC 387 (monócitos e macrófagos). O tratamento estatístico dos dados incluiu a classificação a posteriori dos animais de cada grupo () em dois subgrupos apresentando edema espontâneo precoce ou tardio. Os animais que apresentaram edema precoce foram menos responsáveis para Arnica montana 6cH em relação às alterações hemodinâmicas. Ao invés disso, ratos que apresentaram edema tardio apresentaram edema menos intenso (), menor percentual de desgranulação dos mastócitos () e aumento do diâmetro dos vasos linfáticos (). Os dados sugerem um ajuste qualitativo individual dos eventos vasculares inflamatórios por Arnica montana 6cH.

1. Introdução

Uma das controvérsias mais discutidas sobre a eficácia dos medicamentos homeopáticos é a necessidade de identificar uma perfeita analogia sintomática entre patogenia do paciente e patogenia do medicamento, ou seja, a necessidade de prescrição individual de acordo com o princípio da similia. Esta particularidade é um dos desafios mais difíceis da investigação científica neste campo, devido à dificuldade técnica da sua demonstração experimental. Na verdade, poucos estudos experimentais são encontrados na literatura. Assim, a demonstração experimental desta particularidade e a compreensão de seus mecanismos podem ser ferramentas úteis para resolver as controvérsias crônicas sobre a eficácia da homeopatia, muitas vezes vistas em ensaios clínicos. Recentemente, um elegante estudo in vitro demonstrou a importância dos mecanismos celulares regulatórios e adaptativos na magnitude dos remédios homeopáticos que induzem efeitos citotóxicos sobre as células cancerígenas .

De 1997 a 2008, desenvolvemos um estudo passo a passo sobre os efeitos biológicos da homeopatia homeopática Arnica montana, especialmente a Arnica montana 6cH, utilizando modelos animais . Em resumo, os resultados obtidos nestes estudos mostram que a Arnica montana 6cH é capaz de modular o processo inflamatório agudo em ratos, já que pode aumentar a absorção de edema linfático e o fluxo sanguíneo local, bem como promover a matriz de migração de células polimorfonucleares. Todas estas experiências estão cronologicamente descritas em .

A Arnica montana é uma planta pertencente à família Compositae que cresce nas colinas da Europa Central e Oriental. Vários compostos ativos são identificados em suas folhas, flores e raízes, tais como álcoois, taninos, flavonóides e lactonas sesquirterpênicas, especialmente a helenalina. A principal ação da helenalina é a inibição do fator de transcrição NFκβ, de forma semelhante aos corticóides. A ingestão acidental da planta pode causar vasodilatação, estase sanguínea, hemorragia, edema e dor. Estes efeitos são os principais tópicos descritos na Arnica montana materia medica . Devido a isso, a dor por trauma e absorção de edema são as principais indicações para o uso clínico e experimental de preparações homeopáticas da Arnica montana . Recentemente, outros usos da Arnica montana altamente diluída foram propostos, como o uso agronômico da Arnica nas potências 3, 6 e 12cH para melhorar o crescimento das plantas .

O objetivo do presente estudo foi verificar duas hipóteses: (a) a modulação putativa dos eventos vasculares e celulares na inflamação aguda pela Arnica, focalizando a taxa de neutrófilos, monócitos, linfócitos T e B presentes no sítio inflamatório, e a intensidade da expressão das moléculas de adesão no tecido conjuntivo inflamado, utilizando técnicas imunohistoquímicas e histomorfométricas; (b) a interferência putativa nos resultados das variações naturais individuais da cinética inflamatória.

2. Material e Métodos

2.1. Animais

Ratos Wistar adultos machos, com peso entre 250 e 300 g, foram utilizados. Os ratos foram mantidos em gaiolas convencionais de polipropileno de laboratório (5 a 7 animais por gaiola), com temperatura controlada (25 ± 3°C) e ciclo de luz (luzes acesas das 06:00 às 18:00 horas). Água e alimentos foram oferecidos ad libitum. Antes do início do experimento, os animais foram pesados aleatoriamente, separados e identificados em três grupos de 20 ratos cada.

2,2. Indução de Inflamação Aguda

O processo inflamatório agudo foi induzido pela inoculação subcutânea de 1% kappa carragena (SIGMA) diluída em solução salina estéril no pedal, cuja espessura foi previamente medida com um micrômetro (MYTUTOYO).

Após 30 e 180 minutos, novas medidas foram feitas, a fim de avaliar a evolução do edema pré e pós-tratamento em função do tempo. Assim, os primeiros 30 minutos mediram a formação do edema espontâneo e os 150 minutos restantes mediram os efeitos da droga, já que os tratamentos foram feitos após os 30 minutos de medição. Aos 180 minutos, os animais foram eutanizados por tração cervical sob anestesia profunda, e as pás foram colhidas e fixadas em formaldeído tamponado a 10% durante 24 horas – no máximo – antes de serem processados por técnicas histológicas convencionais, incluindo incorporação de parafina, hematoxilina-eosina e coloração azul toluidina. Os mesmos blocos de parafina foram usados para realizar os procedimentos imunohistoquímicos. Para cada bloco de pés, foi feita uma única lâmina.

2,3. Grupos e Tratamentos

Cada grupo de ratos foi tratado com uma substância específica, de acordo com a Tabela 1. Ratos tratados com Arnica montana 6cH (experimental) e solução hidroalcoólica a 5% (controle negativo) obtida do mesmo fornecedor foram identificados por códigos, de forma que todos os tratamentos e medidas foram feitos em cego. Esses códigos foram criados por um técnico de laboratório que não participou do estudo e mantidos em uma folha selada até a análise estatística, quando foram revelados.

Os ratos tratados com dexametasona (controle positivo) foram feitos abertamente, devido às características físicas da formulação utilizada; era bastante diferente dos homeopáticos e, portanto, facilmente reconhecível. O tratamento e a análise microscópica das amostras foram realizados por duas pessoas independentes, sempre em cego. A dose total de dexametasona utilizada para produzir efeitos anti-inflamatórios foi de 4 mg/kg, de acordo com os padrões definidos anteriormente. Este protocolo fracionado foi projetado para reproduzir uma condição clínica homeopática usual do tratamento da inflamação aguda e também foi utilizado nos estudos anteriores realizados pelo nosso grupo. A dexametasona foi escolhida como grupo controle positivo porque seu mecanismo de ação imita o mecanismo da helenalina, principal princípio ativo da Arnica montana .

A Arnica montana 6cH comercial foi preparada em solução hidroalcoólica a 5% por uma farmácia certificada pela Agência Nacional de Vigilância Sanitária (ANVISA), Farmácia Sensitiva, São Paulo. As técnicas utilizadas no preparo foram de acordo com a Farmacopéia Homeopática Brasileira, 2ª Edição, 1997.

2.4. Análise dos dados

Após o primeiro plotting da intensidade do edema obtido durante o período de pré-tratamento (de zero a 30 minutos), os dados foram classificados em ordem crescente usando um software Excel 2003, de forma que seria possível dividir, para cada grupo, os 10 ratos (50%) que apresentaram intensidade de edema espontaneamente menor e os 10 ratos (50%) que apresentaram intensidade de edema maior. Assim, dois subgrupos de 10 animais foram formados para cada grupo experimental, caracterizando duas subpopulações diferentes de ratos de acordo com o padrão cinético inflamatório (Tabela 2). Todo o desenho experimental é explicado em um fluxograma (Figura 7).

Desde que a curva clássica do edema induzido por carragena é superior a 6 horas após a inoculação, a escolha de ambos os tempos (30 e 180 minutos) foi baseada no seu planalto conhecido. Além disso, estudos anteriores sobre os efeitos da Arnica 6cH sobre o edema induzido por carragena não mostram mais efeitos após este período. A cinética de avaliação do processo inflamatório após a injeção de carragena é um modelo experimental clássico desenvolvido durante a década de 70. Assim, é um critério confiável a ser utilizado neste caso.

Após os dados de plotagem (Figuras 1(a) e 1(b)), ambos os padrões cinéticos tornaram-se fáceis de identificar: (a) animais que apresentaram edema menos intenso durante os primeiros 30 minutos do pré-tratamento tiveram o pico entre 30 e 180 minutos (denominado edema tardio) e (b) aqueles que apresentaram edema mais intenso nos primeiros 30 minutos diminuíram após este período (denominado edema precoce).

(a)

(b)

(c)

(d)

(a)
(b)
(c)
(d)

Figura 1

Oedema (mm) em diferentes grupos e subgrupos. (a) Evolução do edema em função do tempo no subgrupo edema precoce; (b) evolução do edema em função do tempo no subgrupo edema tardio; (c) intensidade do edema no final do experimento no subgrupo edema precoce; (d) intensidade do edema no final do experimento no subgrupo edema tardio; ANOVA, Tuckey-Krammer, em relação ao controle. Os valores representam média ± desvio padrão.

Todos os resultados foram comparados entre os seis subgrupos. Esta seleção a posteriori foi feita a fim de verificar o papel da idiossincrasia individual no efeito Arnica de acordo com o princípio de similia, já que a velocidade de remissão do edema é um dos sintomas mais conhecidos de Arnica montana descritos na matéria medica .

2,5. Análise Imunohistoquímica

Todas as lâminas foram lavadas com 1 : 1 solução de éter alcoólico durante cinco minutos e depois secas com uma folha de papel macio e tratadas com 1 : 10 poli-L-lisina (SIGMA). Em seguida, fatias de 5 microns de tecido com parafina foram transferidas para sua superfície usando um banho histológico a 40°C. Em seguida, as fatias foram desparafinadas através de dois banhos em xilol absoluto durante 2 minutos e dois banhos em álcool absoluto durante 3 minutos. As lâminas foram então lavadas em água corrente da torneira.

Para os procedimentos de imunohistoquímica, um primeiro passo para a recuperação do antígeno foi feito usando tratamento térmico das amostras. As lâminas foram colocadas dentro de um banho de tampão citrato (SIGMA), pH = 6,0, contendo 0,5% entre 20 (DAKO), e aquecidas em uma panela elétrica a 80°C (PANASONIC) durante 20 minutos. Em seguida, as lâminas foram lavadas em PBS, pH = 7,2 (SIGMA), por 6 minutos e secas com papel absorvente macio, e a amostra de tecido foi delimitada com caneta apropriada (Pap-pen, AbCam).

A atividade peroxidase endógena foi bloqueada pela incubação dos tecidos em uma solução de 3% H2O2 diluída em metanol (ISOFAR), por 15 minutos à temperatura ambiente. Em seguida, foram lavados em PBS (SIGMA) por 6 minutos e tratados com 2,5% de soro normal de cavalo (VECTOR) durante 20 minutos a 25°C, para bloqueio de sítios de ligação de proteínas não específicos. Imediatamente após esta etapa, os tecidos foram tratados com o anticorpo primário (ver diluições e especificações na Tabela 3) e deixados em pé durante a noite a 4°C em uma câmara úmida. Todas as diluições de anticorpos primários foram feitas em 1% de albumina de soro bovino (BSA).

No dia seguinte, os cortes foram lavados em PBS (sigma) durante 6 minutos e tratados com o anticorpo secundário conjugado com polímero peroxidase (IMPRESS UNIVERSAL, VECTOR), a 25°C durante 30 minutos. Após uma nova lavagem em PBS (6 minutos), foram expostos ao DAB (DAKO) por 3 segundos, lavados novamente em água corrente, corados com hematoxilina Harris (01 minuto), e montados.

2,6. Histomorfometria

Para a avaliação da percentagem de degranulação dos mastócitos, foram contadas duzentas células por lâmina corada pelo método Toluidine blue, usando campos contíguos, diferenciando os degranulados dos não-degranulados. Para avaliar o diâmetro dos vasos linfáticos, cinco campos escolhidos por acaso foram avaliados usando uma objetiva de 200 x. Foram feitas fotomicrografias de cada campo (CANNON) e a porcentagem de área de vasos linfáticos por campo foi determinada por um sistema digital de análise de imagem (Ferramenta de Imagem 3.0). O diâmetro dos vasos linfáticos pode ser considerado como um bom parâmetro para avaliar a absorção do edema linfático, de acordo com observações anteriores . Como o protocolo era sobre eventos agudos, a hipótese de linfangiogênese não foi considerada.

Para os marcadores anti-CD45RA, CD3, CD18, CD163 e MAC 387, dez campos microscópicos escolhidos por acaso foram observados por lâmina, usando a objetiva de imersão (magnitude 1000 x). Eles incluíram quase todos os tecidos conjuntivos vasculares subcutâneos do bloco, e o número de células positivas por campo foi registrado. No caso do Anti-MAC 387, apenas células mononucleares positivas foram consideradas. As lâminas manchadas com hematoxilina-eosina foram usadas para contar o número de células PMN por campo. Neste caso, o reconhecimento das células foi feito apenas por critérios morfológicos. A expressão do CD163 é proporcional à maturação da macrófago, por isso, esses resultados foram expressos como a relação entre as células mononucleares positivas CD163/MAC 387 por campo.

Para o Anti-CD54, a intensidade da positividade na superfície das células endoteliais foi avaliada por um sistema de pontuação, variando de 1 a 4. Cinco campos escolhidos por acaso foram avaliados por slide, usando objetiva de imersão (magnitude 1000 x), e os escores foram feitos por dois observadores independentes, de forma cega, para evitar interpretação subjetiva na análise. A pontuação final para cada slide foi igual à soma das pontuações parciais. Os critérios de pontuação estão representados na Tabela 4.

Partitura Descrição Fotomicrografia (objectivo 10 x) 1 Marcação de membrana fraca e descontínua, magnitude 1000 x. 2 Marcação de membrana regular mas descontínua, magnitude 1000 x. 3 Marcação de membrana forte mas descontínua, magnitude 1000 x. 4 Marcação de membrana forte e contínua, magnitude 1000 x.

Tabela 4

Critérios de atribuição de pontuação para diferentes padrões de marcação de células endoteliais.

2.7. Análise estatística

O teste Bartlett foi primeiramente empregado para determinar a distribuição gaussiana da maioria dos pontos de dados. Em seguida, foi realizada a ANOVA/Tuckey-Krammer ou Kruskall-Wallis/Dunn, de acordo com os resultados de Bartlett. A avaliação da desgranulação dos mastócitos, ao invés disso, foi avaliada por teste. Os valores de foram considerados significativos. Todas as análises estatísticas foram realizadas utilizando o software INSTAT 3.

Em relação ao edema, uma análise estatística intragrupo adicional também foi realizada, e a comparação da intensidade do edema entre subgrupos aos 30 minutos (edema espontâneo) revelou diferenças significativas (Tuckey-Krammer, ), validando o desenho experimental proposto.

2,8. Critérios Bioéticos

O protocolo foi aprovado pelo Comitê de Bioética da Universidade Paulista (protocolo 011/07), de acordo com a lei do Estado de São Paulo nº 11.977/05 (Código de Proteção Animal do Estado de São Paulo, Brasil). Este procedimento está de acordo com a Convenção Européia para a Proteção dos Animais Vertebrados utilizados para Fins Experimentais e Outros Fins Científicos e seu apêndice.

3. Resultados

O aspecto histopatológico das patas inflamadas revelou o quadro clássico de uma inflamação aguda precoce típica: edema e infiltrado celular correspondente a 2/3 das células PMN e 1/3 das células mononucleares. Entretanto, considerando o tratamento estatístico intragrupo, a existência de diferentes padrões de desenvolvimento do processo inflamatório em função do tempo pôde ser identificada (Tabelas 5 e 6). Assim, houve a necessidade de sistematizar e classificar esses padrões antes de analisar os efeitos da Arnica montana 6cH.

De acordo com isso, um efeito anticoedematoso significativo de Arnica montana 6cH pôde ser visto (ANOVA, ) somente no subgrupo de ratos que apresentaram o pico de edema entre 30 e 180 minutos após a injeção de carragena no pedal (chamado subgrupo tardio) (Figura 1). Também, a análise histomorfométrica das lâminas coradas por Toluidine Blue revelou que o subgrupo tardio também apresentava uma desgranulação menos intensa dos mastócitos (, ) e maior diâmetro médio dos vasos linfáticos (Kruskal-Wallis, ). Ao invés disso, no subgrupo inicial (pico do edema antes dos 30 minutos), apenas um aumento discreto, mas significativo, da degranulação dos mastócitos (, ), bem como aumento dos escores de expressão do CD54 pelas células endoteliais (Kruskal-Wallis, ) (Tabelas 5 e 6, Figuras 2 e 5).

(a)

(b)

(a)
(b)

Figura 2

Histograma representando a percentagem de mastócitos degranulados e área linfática (pixels) por campo. (a) Subgrupo que desenvolveu edema anterior; (b) Subgrupo que desenvolveu edema posterior. (a) Subgrupo que desenvolveu edema anterior; (b) Subgrupo que desenvolveu edema posterior. **Kruskal-Wallis, em relação ao grupo dexametasona.

Não foi observada diferença entre grupos e subgrupos quanto à migração celular, considerando as células PMN e todos os marcadores utilizados na análise imunohistoquímica, incluindo a relação CD 163+/MAC 387+ células (Tabelas 5 e 6, Figuras 3, 4, e 5).

(a)

(b)

(a)
(b)

Figura 3

Histograma representando o número de células positivas MAC387 por campo, a relação CD163/MAC387 e o número de células polimorfonucleares por campo. (a) Subgrupo que desenvolveu edema mais cedo; (b) Subgrupo que desenvolveu edema mais tarde. ANOVA, sem significado.

(a)

(b)

(a)
(b)

Figura 4

Histograma representando o número de células positivas CD3 e CD45R por campo. (a) Subgrupo que desenvolveu edema anterior; (b) Subgrupo que desenvolveu edema posterior. ANOVA, sem significado.

(a)

(b)

(a)
(b)

Figura 5

Histograma representando o número de células positivas CD18 (beta 2 integrin) por campo e a mediana (intervalo) das partituras do rótulo CD54 (ICAM). (a) Subgrupo que desenvolveu edema anterior; (b) Subgrupo que desenvolveu edema posterior. ANOVA, sem significância; *Kruskal-Wallis/Dunn, em relação ao controle.

Tomando todos os dados juntos, é possível ilustrar a principal conclusão através de um gráfico de dispersão da intensidade do edema, no qual podem ser observadas as diferentes tendências entre grupos e subgrupos, após o tratamento com Arnica montana 6cH (Figura 6). Observe que os animais tratados com Arnica e que apresentam edema tardio (subgrupo tardio) são deslocados para a linha de base em relação aos outros grupos.

(a)

>
(b)

(a)
(b)

Figura 6

Plotagem de dispersão mostrando diferentes tendências de evolução do tempo de edema entre os dois subgrupos. Os pontos brancos representam controle, os pontos pretos representam Arnica montana 6cH, e os pontos cinzentos representam dexametasona. Em cada gráfico, o eixo – mostra o edema aos 30 minutos antes da injeção de carragena e o eixo – mostra o edema no final da experiência. Tardio = subgrupo de edema tardio; ANTERIOR = subgrupo de edema precoce. Observe que animais que apresentaram pico de edema tardio e foram tratados com Arnica montana 6cH são deslocados para a linha de base em relação aos outros grupos.

Figura 7

Flowchart dos passos experimentais, determinando dois subgrupos de ratos de acordo com a cinética do edema.

entre os medicamentos homeopáticos que têm especial interesse no controle da inflamação, Arnica montana é um dos mais estudados. No entanto, na literatura científica recente sobre homeopatia, existem muitos estudos que procuram demonstrar a eficácia do seu efeito, mas poucos trabalhos são dedicados à compreensão das alterações fisiopatológicas dos tecidos após a exposição dos animais a estes medicamentos. É deste ponto de vista que o presente trabalho foi construído; através de um estudo detalhado do tecido conjuntivo inflamado, considerando os subconjuntos de células que migram para ele, o comportamento dos vasos e a dinâmica dependente do tempo deste processo sob a ação de Arnica montana 6cH. Curiosamente, alguns efeitos observados estão de acordo com resultados observados anteriormente, como a abertura excessiva dos vasos linfáticos e a conseqüente redução do edema .

Os primeiros resultados aqui obtidos apontam para um fato interessante: a análise individual de cada subgrupo mostra a importância da temporalidade no efeito da Arnica montana 6cH; animais que apresentaram pico de edema espontâneo tardio (após 30 minutos da injeção irritante) foram mais sensíveis à Arnica do que os animais que apresentaram pico de edema precoce (antes dos 30 minutos). Neste caso, o edema foi ainda menos intenso que os grupos controle e tratados com dexametasona, e este fato foi concomitante com a redução significativa da desgranulação dos mastócitos e aumento do diâmetro dos vasos linfáticos. Ambos os fenômenos podem contribuir para a redução do edema macroscópico e diferem do padrão de dexametasona, no qual a área dos vasos linfáticos reduz passivamente junto com a redução do edema, como mostrado na Figura 2. Este efeito corrobora os resultados observados anteriormente em .

Carrageenan é um polissacarídeo obtido da alga Chondrus crispus que tem a capacidade de induzir inflamação local, sem efeitos sistêmicos . É classicamente conhecido que as prostaglandinas são geradas durante a formação do edema após a injeção subcutânea de carragena por neutrófilos migrados. A observação do efeito anti-edema de Arnica montana 6cH exclusivamente em animais que apresentaram o padrão tardio de inflamação aguda aponta para a participação de diferentes mediadores químicos no controle das vias, como demonstrado anteriormente em . Neste sentido, histamina e prostaglandina, mediadores cujo pico de ação ocorre em 15-30 minutos, provavelmente modulam este processo no subgrupo de edema tardio, ao invés de mediadores com ação muito precoce, como a bradicinina, cujo pico é cerca de 10 minutos após a liberação .

Modelos experimentais desenhados especialmente para demonstrar a importância da variação individual no efeito da medicina homeopática já foram descritos anteriormente, mas nunca em um protocolo de inflamação. Individualidade significa especificidade em medicina homeopática; em Rocha 2008 , apenas os ratos naturalmente hiperativos foram responsáveis pelo tratamento com Rhus toxicodendron 200cH, quanto ao seu comportamento em um dispositivo de campo aberto. Por outro lado, Soares 2007 observou que apenas os ratos hipoativos foram responsáveis pelo tratamento de Bryonia alba 200cH. Estes estudos complementares mostram resultados compatíveis com a respectiva matéria medica. A comparação sistemática de ambos os estudos e outros é vista em .

Migração celular dos subtipos PMN e leucócitos mononucleares, nenhuma diferença entre grupos e subgrupos foi observada, nem a relação CD163+/MAC387+ revelou qualquer mudança na dinâmica da maturação dos macrófagos no sítio inflamatório. O CD 163 é uma glicoproteína transmembrana tipo I, de 175 kD, também conhecida como proteína ED2. Sua presença tem sido descrita na superfície do macrófago maduro, mas também de forma menos intensa em monócitos imaturos e outras células mononucleares em humanos. A expressão de ED 2 está associada ao metabolismo do ferro e aumenta durante as fases posteriores da inflamação, pois as células positivas têm um papel modulador, liberando a IL autócrina10 . A presença de linfócitos T e B no local inflamatório pode estar relacionada a uma certa ação moduladora, que foi sugerida em estudos anteriores sobre a Arnica montana 6cH, mas não confirmada aqui.

A expressão das moléculas de adesão CD 54 (ICAM-1) foi maior em animais tratados com Arnica montana 6cH que apresentaram padrão inicial de inflamação e foi associada a uma maior porcentagem de mastócitos degranulados no tecido inflamado, mas não a uma maior migração de leucócitos. Embora nenhuma explicação mecanicista pudesse ser feita nesta etapa do estudo, parece que os resultados globais estão divididos em dois padrões principais: os de regulação da dinâmica vascular, evidente no subgrupo de edema tardio, e os de regulação de eventos celulares, evidente no subgrupo de edema precoce, sugerindo um ajuste qualitativo individual dependente de eventos de inflamação vascular e celular pela Arnica montana 6cH, como visto na Figura 6. Estes diferentes padrões de variabilidade, oscilantes de acordo com o estado anterior do sistema biológico testado, foram experimentalmente descritos em outros contextos experimentais com diferentes preparações homeopáticas .

Em conclusão, as duas hipóteses propostas poderiam ser destacadas: (a) não há modulação seletiva da migração dos subconjuntos leucocitários pelo tratamento com Arnica montana 6cH, mas apenas regulamentação vascular, no que diz respeito à absorção linfática, expressão do CD54 e desgranulação da histamina e (b) há uma clara interferência da variação cinética individual nos eventos vasculares após o tratamento com Arnica montana 6cH.

Conflito de interesses

Não há conflito de interesses relacionados a este trabalho.

Agradecimentos

Os autores agradecem ao Programa CAPES-PROSUP e ao Processo FAPESP. nº 2007/59661-5 pelo apoio financeiro; Marcia Gutierrez da Farmacia Sensitiva pelo fornecimento de medicamentos; Fernanda Ferrari, Paulo Ailton Valdovato, e Lika Osugui pelo apoio técnico.