Come stimare il campo visivo di un microscopio

Cos’è il campo visivo di un microscopio?

Il campo visivo (abbreviato anche come FOV) di un microscopio è l’estensione dell’area osservabile in unità di distanza. L’ottica fornisce una visione chiara e non distorta in un campo intorno all’asse ottico, e il campo visivo è selezionato da questo. I raggi che producono l’immagine in questa vista sono generalmente privi di aberrazioni e non creano una significativa caduta di intensità dell’immagine.

Definizione di campo visivo del microscopio in termini semplici è l’area che si vede sotto il microscopio per un particolare ingrandimento. Diciamo, per esempio, che state vedendo un campione sotto un microscopio ottico. Il diametro del cerchio che vedete è il campo visivo del microscopio.

Quando si aumenta l’ingrandimento, il campo visivo si riduce. A seconda del sistema di lenti, questo può variare. Un modo grossolano di misurare il campo visivo è usare un righello sotto il microscopio per un particolare ingrandimento.

Perché il campo visivo è importante per i microscopi?

Il campo visivo di un microscopio determina la dimensione dell’area ripresa. Acquista importanza quando si vogliono misurare specifiche come le densità – per esempio, un esperimento per stimare la densità delle cellule in una soluzione. Per ottenere la risposta, si deve acquisire un’immagine di un campo visivo, contare il numero di cellule e dividerlo per l’area immagazzinata. Il risultato sarebbe una stima di cellule/micron.

Nota che l’estensione del campo visivo dipende dall’ingrandimento. Gli obiettivi con ingrandimenti maggiori hanno campi visivi più piccoli. Quindi, la dimensione del campo visivo dovrebbe essere selezionata in funzione della dimensione delle caratteristiche che devono essere studiate. I batteri sono più piccoli (circa 5 micron) della maggior parte delle cellule umane (un astrocita del cervello può avere 90 micron di diametro). Pertanto, per studiare gli astrociti sono necessari campi visivi più grandi.

Quando si registra l’immagine su un supporto digitale il FOV può essere espresso come una distanza (ad esempio, 1 mm) o in conteggi di pixel calibrati (ad es, 1024 pixel a 1 um/pixel) lungo l’asse maggiore.

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Come calcolare il campo visivo del microscopio

Per calcolare il campo visivo del microscopio è necessario conoscere l’ingrandimento dell’oculare, il numero di campo e l’obiettivo. Una volta che avete queste informazioni potete calcolare il campo visivo del microscopio dividendo il numero di campo per il numero di ingrandimento.

Campo visivo = Numero di campo (FN) ÷ Ingrandimento dell’obiettivo

Questo è il modo per trovare il campo visivo se il vostro microscopio usa solo un oculare. Se il vostro microscopio usa sia un oculare che un obiettivo, c’è un passo da fare prima di trovare il FOV. Dovrete moltiplicare l’ingrandimento dell’oculare per l’ingrandimento dell’obiettivo per trovare l’ingrandimento totale prima di dividere il numero di campo.

Per esempio, se il vostro oculare legge 10X/22, e l’ingrandimento del vostro obiettivo è 40. Per prima cosa, moltiplicate 10 e 40 per ottenere 400. Poi dividere 22 per 400 per ottenere un diametro FOV di 0,055 millimetri.

Quando si cambia oculare o obiettivo, assicurarsi di ripetere i calcoli FOV con i nuovi input sul numero di campo e gli ingrandimenti. Per gli oggetti che richiedono maggiori ingrandimenti, convertite le vostre misure da millimetri a micrometri.

Obiettivi di potenza più elevata vi permetteranno di vedere oggetti minuscoli, quindi l’angolo di vista sarà piccolo; gli obiettivi di bassa potenza faranno il contrario e vi permetteranno di vedere oggetti più grandi (più larghi).

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