Inflammatorisk processmodulering med homeopatisk Arnica montana 6CH: Den individuella variationens roll

Abstract

Effekterna av Arnica montana 6cH på den individuella moduleringen av akut inflammationskinetik hos råttor utvärderades. Vuxna manliga Wistar-råttor inokulerades med 1 % karrageenan i trampdynan och behandlades med Arnica montana 6cH, dexametason (4,0 mg/kg; positiv kontroll) eller 5 % hydroalkoholisk lösning (negativ kontroll), per os, var 15:e minut, mellan 30 och 180 minuter efter den irriterande inokuleringen. Histopatologiska och immunohistokemiska förfaranden utfördes för att få en panel av inflammatoriska positiva celler för CD3 (T-lymfocyter), CD45RA (B-lymfocyter), CD18 (beta 2-integrin), CD163 (ED2-protein), CD54 (ICAM-1) och MAC 387 (monocyter och makrofager). Den statistiska behandlingen av data omfattade en efterhandsklassificering av djur från varje grupp () i två undergrupper som uppvisade spontana tidiga eller sena ödem. Djur som uppvisade tidiga ödem var mindre ansvariga för Arnica montana 6cH i förhållande till hemodynamiska förändringar. I stället uppvisade råttor som uppvisade sent ödem mindre intensivt ödem (), lägre andel mastcellsdegranulering () och ökning av lymfkärlens diameter (). Uppgifterna tyder på en individuellt kvalitativ justering av inflammatoriska kärlhändelser av Arnica montana 6cH.

1. Introduktion

En av de mest diskuterade kontroverserna om effekten av homeopatiska läkemedel är nödvändigheten att identifiera en perfekt symtomatisk analogi mellan patient och läkemedelspatogenesy, det vill säga nödvändigheten av individuell förskrivning enligt similia-principen. Denna särskilda egenskap är en av de svåraste utmaningarna för den vetenskapliga forskningen på detta område på grund av den tekniska svårigheten att påvisa den experimentellt. Det finns få experimentella studier om detta i litteraturen. En experimentell demonstration av denna särart och en förståelse av dess mekanismer kan därför vara användbara verktyg för att lösa de kroniska kontroverser om homeopatins effektivitet som ofta förekommer i kliniska prövningar . Nyligen visade en elegant in vitro-studie betydelsen av de reglerande och adaptiva cellmekanismerna i storleksordningen av homeopatiska medel som inducerar cytotoxiska effekter på cancerceller .

Från 1997 till 2008 har vi utvecklat en stegvis forskningsstudie om de biologiska effekterna av homeopatisk Arnica montana, särskilt Arnica montana 6cH, med hjälp av djurmodeller . I korthet visar resultaten från dessa studier att Arnica montana 6cH kan modulera den akuta inflammatoriska processen hos råttor, eftersom den kan öka absorptionen av lymfödem och det lokala blodflödet samt främja den polymorfonukleära cellmigrationen. Alla dessa experiment beskrivs kronologiskt i .

Arnica montana är en växt som tillhör familjen Compositae och som växer på kullarna i Öst- och Centraleuropa. Flera aktiva föreningar har identifierats i dess blad, blommor och rötter, såsom alkoholer, tannin, flavonoider och sesquirterpeniska laktoner, särskilt helenalin . Helenalins huvudsakliga verkan är att den hämmar transkriptionsfaktorn NFκβ, på samma sätt som kortikoidsteroider . Ett oavsiktligt intag av växten kan orsaka vasodilatation, blodstas, blödning, ödem och smärta. Dessa effekter är de viktigaste ämnena som beskrivs i Arnica montana materia medica . På grund av detta är traumasmärta och ödemabsorption de viktigaste indikationerna för klinisk och experimentell användning av homeopatiska preparat av Arnica montana . Nyligen har andra användningsområden för Arnica montana i hög utspädning föreslagits, t.ex. agronomisk användning av Arnica i styrkorna 3, 6 och 12cH för att förbättra växternas tillväxt .

Syftet med den aktuella studien var att kontrollera två hypoteser: (a) den förmodade moduleringen av kärl- och cellhändelser vid akut inflammation med hjälp av Arnica, med fokus på antalet neutrofiler, monocyter, T- och B-lymfocyter som finns på den inflammatoriska platsen och intensiteten i uttrycket av adhesionsmolekyler i inflammerad bindväv, med hjälp av immunohistokemiska och histomorfometriska tekniker; (b) den förmodade interferensen på utgångarna av de naturliga individuella variationerna i inflammationskinetiken.

2. Material och metoder

2.1. Djur

Manliga vuxna Wistar-råttor, som vägde mellan 250 och 300 g, användes. Råttorna hölls i konventionella laboratorieburar av polypropen (5 till 7 djur per bur) med kontrollerad temperatur (25 ± 3 °C) och ljuscykel (ljuset på från 06:00 till 06:00). Vatten och mat erbjöds ad libitum. Innan försöket inleddes vägdes djuren slumpmässigt, separerades och identifierades i tre grupper om 20 råttor vardera.

2.2. Induktion av akut inflammation

Den akuta inflammatoriska processen inducerades genom subkutan inokulering av 1 % kappa carrageenan (SIGMA) utspätt i steril koksaltlösning i trampdynan, vars tjocklek tidigare mättes med en mikrometer (MYTUTOYO).

Efter 30 och 180 minuter gjordes nya mätningar för att utvärdera utvecklingen av ödemet före och efter behandlingen som funktion av tiden. De första 30 minuterna mätte således den spontana ödembildningen och de återstående 150 minuterna mätte läkemedelseffekterna, eftersom behandlingarna utfördes efter 30-minutersmätningen. Vid 180 minuter avlivades djuren genom cervikal dragning under djupbedövning, och fotpallar skördades och fixerades i buffrad 10 % formaldehyd under högst 24 timmar innan de behandlades med konventionella histologiska tekniker, inklusive inbäddning i paraffin, hematoxylin-eosin och färgning med toluidinblått. Samma paraffinblock användes för att utföra de immunohistokemiska förfarandena. För varje fotplatta gjordes ett enda objektglas.

2.3. Grupper och behandlingar

Varje grupp av råttor behandlades med en specifik substans enligt tabell 1. Råttor som behandlades med Arnica montana 6cH (experimentellt) och icke-successad 5 % hydroalkoholisk lösning (negativ kontroll) som erhållits från samma leverantör identifierades med koder, på så sätt att alla behandlingar och mätningar gjordes i blindo. Dessa koder skapades av en laboratorietekniker som inte deltog i studien och förvarades i ett förseglat ark fram till den statistiska analysen, då de avslöjades.

De dexametasonbehandlade råttorna (positiv kontroll) gjordes öppna på grund av de fysiska egenskaperna hos den använda formuleringen; den skilde sig ganska mycket från de homeopatiska och var därför lätt att känna igen. Behandlingen och den mikroskopiska analysen av proverna utfördes av två oberoende personer, alltid i blindo. Den totala dosen dexametason som användes för att åstadkomma antiinflammatoriska effekter var 4 mg/kg, i enlighet med de standarder som definierats tidigare . Detta fraktionerade protokoll utformades för att reproducera ett vanligt homeopatiskt kliniskt tillstånd för behandling av akut inflammation och användes även i de tidigare studier som utförts av vår grupp . Dexametason valdes som en positiv kontrollgrupp eftersom dess verkningsmekanism efterliknar mekanismen för helenalin, den huvudsakliga aktiva principen i Arnica montana .

Den kommersiella Arnica montana 6cH framställdes i 5 % hydroalkoholisk lösning av ett apotek som är certifierat av den brasilianska nationella myndigheten för sanitär vaksamhet (ANVISA), Farmácia Sensitiva, São Paulo. De tekniker som användes vid framställningen var i enlighet med Brazilian Homeopathic Pharmacopea, 2nd Edition, 1997.

2.4. Dataanalys

Efter den första plottningen av ödemintensiteten som erhölls under förbehandlingsperioden (från noll till 30 minuter) klassificerades data i halvmåneform med hjälp av programvaran Excel 2003, på ett sätt som gör det möjligt att för varje grupp dela upp de 10 råttor (50 %) som spontant uppvisade lägre ödemintensitet och de 10 råttor (50 %) som uppvisade högre ödemintensitet. På så sätt bildades två undergrupper om 10 djur för varje försöksgrupp, vilket karaktäriserade två olika subpopulationer av råttor enligt det inflammatoriska kinetiska mönstret (tabell 2). Hela försöksupplägget förklaras i ett flödesschema (figur 7).

Då den klassiska kurvan för karragenaninducerat ödem är över upp till 6 timmar efter inokulering, baserades valet av båda tidpunkterna (30 och 180 minuter) på dess kända platå . Dessutom visar tidigare studier om effekterna av Arnica 6cH på karrageenaninducerat ödem inga fler effekter efter denna period . Kinetiken för utvärdering av den inflammatoriska processen efter injektion av karrageenan är en klassisk experimentell modell som utvecklades under 70-talet . Det är därför ett tillförlitligt kriterium som ska användas i detta fall.

Efter att ha plottat data (figurerna 1(a) och 1(b)) blev det lätt att identifiera de båda kinetiska mönstren: (a) djur som uppvisade mindre intensivt ödem under de första 30 minuterna av förbehandlingen hade en topp mellan 30 och 180 minuter (benämnt sent ödem) och (b) de som uppvisade mer intensivt ödem under de första 30 minuterna minskade efter denna period (benämnt tidigt ödem).

(a)

(b)

(c)

(d)

.
(a)
(b)
(c)
(d)

Figur 1

Ödem (mm) i olika grupper och undergrupper. (a) Ödemets utveckling som funktion av tiden i undergruppen tidigt ödem; (b) Ödemets utveckling som funktion av tiden i undergruppen sent ödem; (c) Ödemets intensitet i slutet av försöket i undergruppen tidigt ödem; (d) Ödemets intensitet i slutet av försöket i undergruppen sent ödem. ; ANOVA, Tuckey-Krammer, i förhållande till kontroll. Värdena representerar medelvärde ± standardavvikelse.

Alla resultat jämfördes mellan de sex undergrupperna. Detta urval a posteriori gjordes för att kontrollera den individuella idiosynkrasins roll i Arnica-effekten enligt similia-principen, eftersom hastigheten på ödemremiss är ett av de mest kända Arnica montana-symtomen som beskrivs i materia medica .

2.5. Immunohistokemisk analys

Alla objektglas tvättades med 1 : 1 alkohol-eterlösning under fem minuter och torkades sedan med ett mjukt papper och behandlades med 1 : 10 poly-L-lysin (SIGMA). Därefter överfördes 5 mikrometer paraffininbäddade vävnadsskivor till deras yta med hjälp av ett histologiskt bad vid 40°C. Därefter avparaffinerades skivorna genom två bad i absolut xylol i 2 minuter och två bad i absolut alkohol i 3 minuter. Objektglasen tvättades sedan i vanligt kranvatten.

För de immunohistokemiska förfarandena gjordes ett första steg för att hämta antigen genom värmebehandling av proverna. Objektglasen lades i ett citratbuffertbad (SIGMA), pH = 6,0, innehållande 0,5 % tween 20 (DAKO) och värmdes i en elektrisk kastrull vid 80 °C (PANASONIC) under 20 minuter. Därefter tvättades objektglasen i PBS, pH = 7,2 (SIGMA), i 6 minuter och torkades med ett mjukt absorberande papper, och vävnadsprovet avgränsades med hjälp av en lämplig penna (Pap-pen, AbCam).

Den endogena peroxidasaktiviteten blockerades genom att vävnaderna inkuberades i en 3 %ig H2O2-lösning utspädd i metanol (ISOFAR), i 15 minuter vid rumstemperatur. Därefter tvättades de i PBS (SIGMA) under 6 minuter och behandlades med 2,5 % hästnormalserum (VECTOR) under 20 minuter vid 25 °C för att blockera ospecifika proteinbindningsställen. Omedelbart efter detta steg behandlades vävnaderna med den primära antikroppen (se spädningar och specifikationer i tabell 3) och lämnades stående över natten vid 4 °C i en fuktig kammare. Alla utspädningar av primära antikroppar gjordes i 1 % bovint serumalbumin (BSA).

Nästföljande dag tvättades snitten i PBS (sigma) i 6 minuter och behandlades med polymer-peroxidas-konjugerad sekundär antikropp (IMPRESS UNIVERSAL, VECTOR), vid 25°C under 30 minuter. Efter en ny tvätt i PBS (6 minuter) exponerades de för DAB (DAKO) i 3 sekunder, tvättades en gång till i kranvatten, färgades med Harris hematoxylin (01 minut) och monterades.

2.6. Histomorfometri

För utvärdering av mastcellsdegranuleringsprocent räknades tvåhundra celler per objektglas som färgats med Toluidinblåmetoden, med hjälp av sammanhängande fält, varvid de degranulerade cellerna skiljdes från de icke-degranulerade. För att utvärdera lymfkärlens diameter utvärderades fem fält som valdes slumpmässigt med hjälp av ett 200 x objektiv. Fotomikrografer av varje fält gjordes (CANNON), och den procentuella andelen lymfkärl per fält fastställdes med hjälp av ett digitalt bildanalyssystem (Image Tool 3.0). Diametern på lymfkärlen kan betraktas som en bra parameter för att utvärdera absorptionen av lymfödem, enligt tidigare observationer . Eftersom protokollet handlade om akuta händelser beaktades inte hypotesen om lymfangiogenes.

För anti-CD45RA-, CD3-, CD18-, CD163- och MAC 387-markörerna observerades tio mikroskopiska fält som valts ut slumpmässigt per objektglas med hjälp av ett immersionsobjektiv (magnitud 1000 x). De omfattade nästan all subkutan vaskulär bindväv i kudden, och antalet positiva celler per fält registrerades. När det gäller Anti-MAC 387 beaktades endast mononukleära positiva celler. De hematoxylin-eosin-färgade preparaten användes för att räkna antalet PMN-celler per fält. I det här fallet identifierades cellerna endast med hjälp av morfologiska kriterier. Uttrycket av CD163 är proportionellt mot makrofagernas mognad, därför uttrycktes dessa resultat som förhållandet mellan CD163/MAC 387 mononukleärt positiva celler per fält.

För Anti-CD54 utvärderades intensiteten av positivitet på endotelcellernas yta med hjälp av ett poängsystem, som varierade från 1 till 4. Fem fält som valdes ut slumpmässigt utvärderades per objektglas med hjälp av immersionsobjektiv (magnitud 1000 x), och poängsättningen gjordes av två oberoende observatörer, på ett blint sätt, för att undvika subjektiva tolkningar i analysen. Den slutliga poängen för varje bild var lika med summan av de partiella poängen. Kriterierna för poängsättningen redovisas i tabell 4.

Poäng Beskrivning Fotomikrografi (objektiv 10 x) 1 Svag och diskontinuerlig membranmarkering, magnitud 1000 x. 2 Regelbunden men diskontinuerlig membranmarkering, magnitud 1000 x. 3 Stark men diskontinuerlig membranmarkering, magnitud 1000 x. 4 Stark och kontinuerlig membranmarkering, magnitud 1000 x.

Tabell 4

Kriterier för tilldelning av poäng för olika mönster av endotelcellsmarkering.

2.7. Statistisk analys

Bartlett-testet användes först för att fastställa den gaussiska fördelningen för majoriteten av datapunkterna. Därefter utfördes ANOVA/Tuckey-Krammer eller Kruskall-Wallis/Dunn i enlighet med Bartlettresultaten. Utvärderingen av mastcellsdegranulering utvärderades i stället med testet. Värden på ansågs vara signifikanta. All statistisk analys utfördes med hjälp av programvaran INSTAT 3.

I samband med ödem utfördes också en ytterligare statistisk analys inom grupperna, och jämförelsen av ödemintensiteten mellan undergrupperna vid 30 minuter (spontant ödem) visade på signifikanta skillnader (Tuckey-Krammer, ), vilket validerade den föreslagna experimentella utformningen.

2.8. Bioetiska kriterier

Protokollet godkändes av den bioetiska kommittén vid Universidade Paulista (protokoll 011/07), i enlighet med delstaten São Paulos lag nr 11.977/05 (Djurskyddslagstiftning i delstaten São Paulo, Brasilien). Förfarandet är förenligt med Europeiska konventionen om skydd av ryggradsdjur som används för försök och andra vetenskapliga ändamål och dess bilaga.

3. Resultat

Den histopatologiska aspekten av inflammerade trampdynor avslöjade den klassiska ramen för en typisk tidig akut inflammation: ödem och cellinfiltrat som motsvarar 2/3 PMN-celler och 1/3 mononukleära celler. Med hänsyn till den statistiska behandlingen inom grupperna kunde dock olika mönster för utvecklingen av den inflammatoriska processen med tiden identifieras (tabellerna 5 och 6). Det var alltså nödvändigt att systematisera och klassificera dessa mönster innan man analyserade effekterna av Arnica montana 6cH.

Enligt detta kunde en signifikant antiödemverkan av Arnica montana 6cH ses (ANOVA, ) endast i den undergrupp av råttor som uppvisade en topp av ödem mellan 30 och 180 minuter efter injektion av karrageenan i trampdynan (kallad sen undergrupp) (Figur 1). Den histomorfometriska analysen av objektglas som färgats med Toluidinblått visade också att den sena undergruppen också uppvisade mindre intensiv mastcellsdegranulering (, ) och en större genomsnittlig diameter på lymfkärlen (Kruskal-Wallis, ). I den tidiga undergruppen (ödemtopp före 30 minuter) observerades i stället endast en diskret men signifikant ökning av mastcellsdegranuleringen (, ), liksom en ökning av antalet poäng för CD54-uttryck av endotelceller (Kruskal-Wallis, ) (tabellerna 5 och 6, figurerna 2 och 5).

(a)

(b)

(a)
(b)

.

Figur 2

Histogram som visar procentandelen degranulerade mastceller och lymfatisk yta (pixlar) per fält. (a) Undergrupp som utvecklade tidigare ödem, (b) undergrupp som utvecklade senare ödem. , i förhållande till kontrollen. **Kruskal-Wallis, i förhållande till dexametasongruppen.

Ingen skillnad mellan grupper och undergrupper observerades när det gäller cellmigration, med hänsyn till PMN-celler och alla markörer som användes i den immunohistokemiska analysen, inklusive förhållandet mellan CD 163+/MAC 387+-celler (tabellerna 5 och 6, figurerna 3, 4 och 5).

(a)

(b)

(a)
(b)

(a)

(b)

(a)
(b)

(a)

(b)

(a)
(b)

Om man tar alla data tillsammans är det möjligt att illustrera huvudslutsatsen med ett spridningsdiagram över ödemets intensitet, där de olika trenderna mellan grupper och undergrupper kan ses, efter behandling med Arnica montana 6cH (figur 6). Observera att djur som behandlats med Arnica och som uppvisar sent ödem (sen undergrupp) är förskjutna till baslinjen i förhållande till de andra grupperna.

(a)

(b)

(a)
(b)

.

Figur 6

Spridningsplotter som visar olika trender för ödemets tidsutveckling mellan de båda undergrupperna. De vita punkterna representerar kontroll, de svarta punkterna representerar Arnica montana 6cH och de grå punkterna representerar dexametason. I varje diagram visar -axeln ödemet 30 minuter före injektion av carrageenan och -axeln visar ödemet i slutet av försöket. LATE = sen ödemundergrupp; EARLY = tidig ödemundergrupp. Observera att djur som uppvisade sena toppar av ödem och behandlades med Arnica montana 6cH är förskjutna till baslinjen i förhållande till de andra grupperna.

Figur 7

Flödesschema över försöksstegen, där man fastställer två undergrupper av råttor enligt kinetiken för ödemet.

4. Diskussion

Av de homeopatiska läkemedel som har särskilt intresse för inflammationsbekämpning är Arnica montana ett av de mest studerade. I den senaste vetenskapliga litteraturen om homeopati finns det dock många studier som försöker visa att dess effekt är effektiv, men få arbeten ägnas åt att förstå fysiopatologiska förändringar i vävnader efter att djur utsatts för dessa läkemedel . Det är ur denna synvinkel som detta arbete har byggts upp; genom en detaljerad studie av den inflammerade bindväven, med hänsyn till de delmängder av celler som migrerar till den, kärlens beteende och den tidsberoende dynamiken i denna process under inverkan av Arnica montana 6cH. Intressant nog överensstämmer vissa av de observerade effekterna med tidigare observerade resultat, t.ex. öppnandet av lymfkärlen och den därav följande minskningen av ödemet.

De första resultat som erhållits här pekar på ett intressant faktum: den individuella analysen av varje undergrupp visar på betydelsen av tidsmässighet för effekten av Arnica montana 6cH; djur som uppvisade en spontan sen topp av ödem (efter 30 minuter från injektionen av irriterande ämne) var mer känsliga för Arnica än de djur som uppvisade en tidig topp av ödem (före 30 minuter). I detta fall var ödemet till och med mindre intensivt än i de kontroll- och dexametasonbehandlade grupperna, och detta faktum åtföljdes av en betydande minskning av mastcellsdegranuleringen och en ökning av lymfkärlens diameter. Båda fenomenen kan bidra till minskningen av det makroskopiska ödemet och skiljer sig från dexametasonmönstret, där lymfkärlens yta minskar passivt tillsammans med minskningen av ödemet (se figur 2). Denna effekt bekräftar de resultat som tidigare observerats i .

Carrageenan är en polysackarid som erhålls från tången Chondrus crispus som har förmågan att inducera lokal inflammation, utan systemiska effekter . Det är klassiskt känt att prostaglandiner genereras under ödembildningen efter subkutan injektion av karrageenan av migrerande neutrofiler . Observationen av antiödemverkan av Arnica montana 6cH uteslutande hos djur som uppvisade det sena mönstret av akut inflammation pekar mot att olika kemiska mediatorer deltar i kontrollvägarna, vilket tidigare visats i . I denna mening modulerar förmodligen histamin och prostaglandin, mediatorer vars verkan kulminerar efter 15-30 minuter, denna process i den sena ödemundergruppen, i stället för mediatorer med en mycket tidig verkan, t.ex. bradykininin, vars verkan kulminerar cirka 10 minuter efter utlösningen .

Experimentella modeller som utformats särskilt för att visa betydelsen av individuell variation i effekten av homeopatiska läkemedel beskrevs redan tidigare , men aldrig i ett inflammationsprotokoll. Individualitet innebär specificitet i homeopatisk medicin; i Rocha 2008 , var endast de naturligt hyperaktiva råttorna ansvariga för Rhus toxicodendron 200cH behandling, med avseende på deras beteende i en öppenfältsanordning. Å andra sidan observerade Soares 2007 att endast hypoaktiva råttor var ansvariga för Bryonia alba 200cH. Dessa kompletterande studier visar resultat som är förenliga med respektive materia medica. Den systematiska jämförelsen av båda studierna och andra studier ses i .

Med avseende på PMN och mononukleära leukocyters subtyper cellmigration sågs ingen skillnad mellan grupper och undergrupper, och inte heller förhållandet CD163+/MAC387+ avslöjade någon förändring i dynamiken av makrofagmognad i det inflammatoriska området. CD 163 är ett transmembran glykoprotein typ I, av 175 kD, även känt som ED2-protein. Dess närvaro har beskrivits i den mogna makrofagytan, men också på ett mindre intensivt sätt i omogna monocyter och andra mononukleära celler hos människor. Uttrycket av ED 2 är förknippat med järnmetabolismen och ökar under senare faser av inflammationen, eftersom positiva celler har en modulerande roll och frisätter autokrin IL10 . Närvaron av T- och B-lymfocyter i det inflammatoriska området kan vara relaterad till en viss modulerande verkan , vilket har föreslagits i tidigare studier om Arnica montana 6cH , men inte bekräftats här.

Uttrycket av adhesionsmolekylerna CD 54 (ICAM-1) var större hos djur som behandlades med Arnica montana 6cH och som uppvisade tidiga inflammationsmönster, och det var förknippat med en större andel av degranulerade mastceller i den inflammerade vävnaden, men inte med en större leukocytmigration. Även om ingen mekanistisk förklaring kunde göras i detta steg av studien verkar det som om de globala resultaten är uppdelade i två huvudmönster: de som reglerar den vaskulära dynamiken, vilket är uppenbart i den sena ödemundergruppen, och de som reglerar cellhändelserna, vilket är uppenbart i den tidiga ödemundergruppen, vilket tyder på en individberoende kvalitativ justering av vaskulära och cellulära inflammationshändelser med Arnica montana 6cH, vilket framgår av figur 6. Dessa olika variabilitetsmönster, som oscillerar beroende på det testade biologiska systemets tidigare tillstånd, har beskrivits experimentellt i andra experimentella sammanhang med olika homeopatiska preparat .

Slutningsvis kan de två föreslagna hypoteserna lyftas fram: (a) Det finns ingen selektiv modulering av leukocytundergruppernas migration genom behandling med Arnica montana 6cH, utan endast vaskulära regleringar, när det gäller lymfatisk absorption, CD54-uttryck och histamindegranulering och (b) det finns en tydlig interferens av den individuella kinetiska variationen i vaskulära händelser efter behandling med Arnica montana 6cH.

Interessentkonflikter

Det finns inga intressekonflikter relaterade till detta arbete.

Acknowledgments

Författarna tackar CAPES-PROSUP Program och FAPESP Proc. no. 2007/59661-5 för finansiellt stöd; Marcia Gutierrez från Farmacia Sensitiva för tillhandahållande av läkemedel; Fernanda Ferrari, Paulo Ailton Valdovato och Lika Osugui för tekniskt stöd.