Prevalența ridicată a papilomavirusului uman în cancerul colorectal la hispanici: A Case-Control Study

Abstract

Rolul Human Papillomavirus (HPV) în carcinogeneza colorectală rămâne evaziv. Pe baza incidenței ridicate a tumorilor maligne asociate cu HPV în rândul hispanicilor portoricani, acest studiu și-a propus să evalueze prevalența infecției cu HPV și integrarea virală în țesuturile colorectale pentru a evalua rolul său putativ în cancerul colorectal (CCR). În acest studiu caz-control, prevalența infecției cu HPV în CRC (cazuri n = 45) și în mucoasa normală a colonului de la subiecți fără cancer (controale n = 36) a fost evaluată printr-o strategie nested PCR. Genotiparea HPV-16 a fost efectuată în țesuturile HPV-pozitive, iar starea fizică a genomului HPV-16 a fost determinată prin detectarea E2. HPV a fost detectat la 19 din 45 (42,2 %) de cazuri de CCR (vârsta medie 61,1 ± 10,7 ani, 24 de bărbați) și la 1 din 36 (2,8 %) de martori (vârsta medie 60,9 ± 9,6 ani, 24 de bărbați), cu un OR = 25,58 (IC 95% 3,21 – 203,49). HPV-16 a fost detectat în 63,2% dintre tumorile colorectale HPV-pozitive; integrarea genomului a fost observată în toate cazurile HPV-16 pozitive. Acesta este primul raport care arată prevalența ridicată a infecțiilor cu HPV în tumorile colorectale hispanice din Caraibe. În ciuda dovezilor de integrare a HPV în genomul gazdei, se justifică o analiză mecanicistă suplimentară care să examineze expresia oncoproteinei HPV și rolul putativ al acestor oncoproteine în carcinogeneza colorectală.

1. Introducere

Infecțiile cu papilomavirus uman (HPV) sunt cele mai frecvente infecții cu transmitere sexuală în Statele Unite (SUA) (http://www.cdc.gov/std/hpv/STDFact-HPV.htm). HPV-urile sunt virusuri epiteliotropice, cu ADN dublu catenar, care infectează epiteliile scuamoase ale celulelor mucoaselor din piele. Înmulțirea virală are loc în nucleele celulelor și este strâns legată de starea de diferențiere a celulelor. Există mai bine de 100 de genotipuri de HPV. Tipurile 6, 11, 40 și 42 sunt frecvent asociate cu leziuni benigne și sunt clasificate ca tipuri cu risc scăzut. HPV-16, HPV-18, HPV-31 și HPV-45 sunt considerate ca având un potențial oncogen ridicat și sunt denumite tipuri cu risc ridicat . HPV a fost identificat ca agent cauzal în cancerele de col uterin , vaginal , anal , oral și penian . Studiile au arătat, de asemenea, corelații puternice între HPV și dezvoltarea mai multor tipuri de cancere, cum ar fi esofagul, faringele și laringele. Cu toate acestea, rolul putativ al infecției cu HPV în carcinogeneza colo-rectală nu a fost elucidat în mod corespunzător și rămâne încă controversat.

Patogeneza CCR a devenit mai bine înțeleasă la nivel molecular; cu toate acestea, etiologia CCR este încă incomplet înțeleasă. În ultimul deceniu, mai multe studii au sugerat că HPV ar putea avea un rol în carcinogeneza colorectală . Detectarea HPV în țesutul colonic a condus la o gamă largă de lucrări care propun o asociere cauzală între HPV și CCR. Prezența HPV în țesutul colonului rămâne un subiect de discuție extrem de controversat din cauza neconcordanțelor în ceea ce privește reproductibilitatea rezultatelor. Deoarece integrarea genomului HPV este necesară pentru ca virusul să își exercite potențialul carcinogen, evaluarea stării fizice a genomului viral după confirmarea infecției cu HPV este esențială pentru a stabili o asociere cauzală. Inactivarea genei E2 prin integrarea genomică favorizează exprimarea oncoproteinelor E6 și E7, care antagonizează funcția p53 și, respectiv, pRB . Degradarea rezultată a p53 și pRB mediată de aceste oncoproteine facilitează proliferarea ADN-ului viral în cadrul gazdei și duce la neoplazie prin mecanisme bine descrise în întreaga literatură de specialitate .

CRC este responsabil pentru aproximativ 694 000 de decese la nivel mondial . În SUA, CCR este al treilea cel mai frecvent diagnosticat cancer și a treia cauză principală de deces prin cancer . În Puerto Rico (PR), CCR este al 2-lea cel mai diagnosticat și principala cauză de deces prin cancer în rândul bărbaților și femeilor . O prevalență ridicată a cancerelor legate de HPV și o prevalență ridicată a HPV în probele anogenitale au fost raportate în rândul bărbaților și femeilor din Puerto Rico . Seroprevalența HPV-16 a fost raportată la 11,3 % într-un eșantion de adulți din populație din Republica Populară Chineză, care este similară cu cea raportată în SUA (11,5 %) . Astfel, având în vedere ratele ridicate ale mortalității prin CCR și incidența ridicată a morbidităților legate de HPV în PR, scopul general al acestui studiu caz-control a fost de a evalua asocierea dintre CCR și infecția cu HPV în eșantioane de hispanici portoricani.

2. Metode

2.1. Metode

2.1. Declarație de etică

Acest studiu a fost aprobat de IRB al Campusului de Științe Medicale al Universității din Puerto Rico (#A7330109). Toate procedurile au fost în conformitate cu standardele etice ale IRB.

2.2. Recrutarea subiecților și achiziționarea eșantioanelor

Cazurile și controalele au fost recrutate consecutiv folosind eșantionarea de conveniență și au fost potrivite ca frecvență în funcție de sex și vârstă. Participanții la studiu cu vârsta de 21 de ani sau mai mult au fost recrutați atunci când au vizitat facilitățile Centrului Medical Puerto Rico pentru colonoscopii din cauza screening-ului de rutină, a simptomelor și/sau a trimiterilor de către gastroenterologi și chirurgi colorectali. Scopul acestui studiu a fost explicat și toți participanții la studiu și-au dat consimțământul informat înainte de includere. Toți participanții incluși în această analiză au fost hispanici. Faptul de a fi hispanic a fost definit prin moștenirea sau locul de naștere declarat de participant. Toți subiecții de control incluși în acest studiu au avut rezultate normale la colonoscopie. Indivizii cu CCR au avut un diagnostic de adenocarcinom confirmat prin histopatologie. Subiecții cu sindroame canceroase ereditare și boli inflamatorii intestinale au fost excluși.

Tesut proaspăt congelat a fost obținut de la 45 de pacienți sporadici nefamiliali cu CCR (cazuri) și 36 de indivizi fără cancer (controale). Țesuturile au fost recoltate de la pacienții cu CCR în timpul operației de rezecție tumorală. Au fost excluse tumorile anale sau perianale și eșantioanele de țesut de la indivizi care au raportat că sunt HIV-pozitivi. Localizarea tumorii a fost clasificată ca fiind proximală (de la cecum până la colonul transvers distal), distală (de la flexura splenică până la colonul sigmoid) sau rectală (ultimii 20 cm din colon). Biopsiile de țesut colorectal de control au fost obținute din colonul distal în timpul colonoscopiilor de rutină.

Utilizând chestionarul Collaborative Family Registries’ Colorectal Cancer Risk Factor Questionnaire (http://coloncfr.org/), au fost colectate date clinice și sociodemografice de la fiecare pacient, inclusiv sexul, stilul de viață, istoricul medical și istoricul familial de cancer. Caracteristicile sociodemografice și clinice analizate în cadrul studiului au fost genul (bărbat versus femeie), vârsta mediană (<61 ani versus ≥61 ani), diagnosticul de DM de tip 2 (da versus nu), istoricul familial al oricărui tip de cancer (da versus nu) și istoricul familial de CCR (da versus nu). Istoricul familial este definit ca având o rudă de gradul I, II sau III cu cancer. Caracteristicile stilului de viață care au fost analizate în acest studiu au fost consumul de alcool (vreodată față de niciodată) și statutul de fumător (vreodată față de niciodată).

2.3. Extracția ADN-ului

DNA genomic (gDNA) a fost extras din ≈100 mg de țesut cu ajutorul kitului de izolare a ADN-ului pentru celule și țesuturi (Roche Applied Science, Indianapolis, IN), urmând instrucțiunile producătorului. În scopul controlului calității, s-a utilizat amplificarea PCR a genei -actinei pentru a evalua integritatea ADNg; probele din care nu s-a putut amplifica -actina au fost excluse din studiu.

S-au luat următoarele măsuri de precauție standardizate pentru a minimiza contaminarea încrucișată de la o probă la alta: toate instrumentele și mesele de lucru au fost șterse cu DNAZap (Ambion, Foster City, CA), urmat de înălbitor 10% și ETOH 70% înainte de manipularea probelor. Pentru fiecare eșantion au fost utilizate lame noi și sterile. Prelucrarea țesuturilor și extracția nucleotidelor au fost limitate la maximum 10 probe pe zi. Aproximativ 100 mg din fiecare probă au fost codificate aleatoriu în orb și utilizate pentru analize ulterioare.

2.4. Detecția și genotiparea HPV

Detecția ADN-ului HPV uman a fost realizată prin intermediul unei strategii de nested PCR folosind PGMY09/PGMY11 ca primeri externi și GP5+/GP6+ ca primeri interni . Acești primeri amplifică o regiune consensuală HPV L1 care detectează mai mult de 25 de tipuri de HPV. Fiecare reacție a fost efectuată într-un volum total de 25 μL care conținea 200 ng de gADNg, 12,5 μL de Bullseye HS-Taq 2x Master Mix (MidSci, St. Louis, MO) și 100 nmol/L de primer PGMY09/11 grupat. S-au utilizat următoarele condiții: 15 minute la 95°C, urmate de 35 de cicluri de câte 60 de secunde la 94°C, 60°C și 72°C, cu o extensie finală de 10 minute la 72°C. Doi microlitri din prima reacție PCR au fost utilizați ca șablon pentru nested PCR. Condițiile pentru nested PCR au fost identice cu cele de la prima reacție PCR, cu excepția temperaturii de aneantizare, care a fost de 52°C. Produsele amplificate au fost electroforezate și analizate cu ajutorul unui ChemiDoc (Bio-Rad, Hercules, CA). Detectarea ADN-ului plasmidic purificat pHPVV-16 (ATCC 45113D) a fost utilizat ca martor pozitiv și apa ca martor negativ.

Genotiparea ADN-ului HPV-16 a fost efectuată cu primerii specifici de tip care vizează HPV-16 E6 . Pentru prima serie au fost utilizați primerii HPV-16E6 Pr80 (5′-CTGACTCGAG/TTTATGCACCAAAAGAGAAC-3′) și Pr625 (5′-GATCAGTTGTGTCTCTCTGGTTGC-3′), cu aceleași condiții PCR descrise mai sus, cu excepția temperaturii de recoacere, care a fost de 68°C. Condițiile pentru PCR imbricate cu primerii Pr106: 5′-GTTTCAGGACCCACACAGGAGC-3′ și Pr562: 5′-GTACTCACC CC/TGATTACAGCTGGGTTT C-3′ au fost aceleași, cu excepția temperaturii de aneantizare, care a fost de 60°C. Detecția ADN-ului plasmidic purificat pHPVV-16 (ATCC 45113D) și apa au fost utilizate ca martori pozitiv și, respectiv, negativ. Ampliconii au fost electroforezați și vizualizați conform descrierii. Zece la sută din probele testate prin nested PCR au fost validate și confirmate extern la Laboratorul Programului de Cercetare SIDA de la Ponce School of Medicine & Health Sciences (Ponce, PR) folosind kitul INNO-LiPA HPV Genotyping Extra (Fujirebio, Gent, Belgia).

2.5. Starea fizică a HPV

Starea fizică a genomului HPV-16 a fost determinată prin examinarea integrității secvenței E2 cu ajutorul unei strategii nested PCR descrise anterior . Au fost analizate toate tumorile care adăposteau ADN HPV-16 (). Analiza prin PCR nested a fost efectuată utilizând 2 seturi de primeri specifici HPV-16 care au inclus 2 primeri forward, Pr7581 (5′-CACTGCTTGCGCCAACCATTCC-3′) și Pr7677 (5′-GCC AAC GCC TTA TTA CAT ACC G-3′) și 2 amorse inverse, Pr128 (5′-GTCGCTCCTCTCTGTGGGTCCTCTG-3′) și Pr223 (5′-ACGTCGCAGTAACTGTTTTGC-3′). Ambele PCR-uri au fost efectuate în aceleași condiții descrise anterior, cu excepția temperaturii de recoacere, care a fost de 60°C. Ampliconii au fost analizați conform descrierii. ADN-ul extras din liniile de celule cervicale umane CaSki (CRL-1550) și SiHa (HTB-35) a fost utilizat ca martor pozitiv. Absența produsului PCR a fost interpretată ca întrerupere a secvenței E2 și integrare a ADN-ului viral în genomul gazdei. Prezența ampliconilor E2 indică prezența genomurilor episomale ale HPV-16.

2.6. Analiză statistică

Caracteristicile sociodemografice, clinice și de stil de viață la cazuri și controale au fost descrise folosind distribuții de frecvență pentru variabilele categorice și măsuri de sinteză pentru variabilele cantitative. S-au utilizat teste bilaterale pentru a compara grupurile de studiu: testul chi-pătrat sau testul exact al lui Fisher a fost utilizat pentru variabilele categorice și testul Student sau testul Mann-Whitney pentru a compara variabilele cantitative. Modelele de regresie logistică necondiționată au fost utilizate pentru a estima OR cu un grad de încredere de 95% al CCR în raport cu statutul HPV și cu alte variabile. Analizele statistice au fost efectuate utilizând SPSS 17.0 (SPSS Inc.) și Epi InfoTM 7 (CDC).

3. Rezultate

3.1. Caracteristici sociodemografice, stil de viață și istoric clinic ale participanților la studiu

Caracteristicile demografice și clinice ale populației de studiu (; 45 de cazuri de CCR și 36 de controale) sunt prezentate în tabelul 1. Vârsta medie a cazurilor de CCR a fost de 61,1 ani (variind de la 38 la 86 de ani; 24 au fost bărbați). În grupul de control, vârsta medie a fost de 60,9 ani (variind de la 42 la 85 de ani; 15 au fost bărbați). În comparație cu martorii, cazurile de CCR au fost mai susceptibile de a raporta un istoric familial de CCR (OR 0,29; 95% 0,10-0,80). În ceea ce privește vârstele membrilor familiei cu CCR, așa cum au fost indicate de către subiect, vârsta mediană a diagnosticului de CCR la rudele cazurilor și ale controalelor a fost de 60 de ani. Nu s-au constatat asocieri semnificative din punct de vedere statistic atunci când s-au comparat cazurile și controalele cu rude diagnosticate cu CCR la ≥60 de ani față de <60 de ani. Nu au fost găsite alte asocieri semnificative.

3.2. Detectarea ADN HPV

O diferență semnificativă în ceea ce privește prevalența infecției cu HPV a fost observată atunci când s-a comparat țesuturile tumorilor colorectale și mucoasa normală de la controale. ADN-ul HPV a fost detectat în 19 din cele 45 (42,2%) de probe de CCR și în 1 din cele 36 (2,8%) de probe de control studiate (figura 1). Infecția cu HPV a fost asociată pozitiv cu CCR (OR 25,58; 95% CI 3,22 la 203,49), (Tabelul 2), (Tabelul 2). Asocierea dintre statutul HPV-pozitiv și CCR a fost observată în toate regiunile anatomice ale colonului.

3.3. Caracteristici sociodemografice, stil de viață și caracteristici clinico-patologice ale cazurilor HPV-pozitive

Vârsta medie a cazurilor de CCR HPV-pozitive a fost de 60,3 ani (variind de la 45 la 86; 9 au fost bărbați). Nu s-au găsit asocieri semnificative între statutul HPV-pozitiv și următoarele: sex, vârstă, consum de tutun sau alcool, antecedente de diabet, antecedente familiale de orice tip de cancer sau antecedente familiale de CCR (tabelul 3). Nu au fost observate asocieri semnificative între statutul HPV și diferențierea histologică, stadiul sau localizarea tumorii (tabelul 4).

3.4. Genotiparea HPV-16 și evaluarea stării fizice virale

HPV-16 a fost detectat în 12 din cele 19 probe de CCR HPV-pozitive (63,2%); restul de 7 (36,8%) au corespuns altor genotipuri HPV (nonttipate). HPV-16 nu a fost detectat în proba de control HPV-pozitivă. Distribuția tumorilor HPV-16 pozitive în ceea ce privește localizarea tumorii a fost următoarea: 33,3% (4 din 12) dintre probe au fost găsite în colonul proximal (cecum, colonul ascendent și colonul transvers), 50,0% (6 din 12) au fost găsite în colonul distal (flexura splenică, colonul descendent și colonul sigmoid), iar 16,7% (2 din 12) au fost detectate în rect. În cazul tumorilor non-HPV-16, 2 din 7 (28,6%) au fost localizate în colonul distal și din 5 din 7 (71,43%) au fost găsite în rect. Starea fizică a ADN-ului HPV-16 în țesuturile CRC a fost determinată prin detectarea HPV-16 E2. Ampliconul corespunzător E2 intact nu a fost detectat în niciunul dintre cazurile HPV-16 pozitive, ceea ce indică faptul că genomul HPV-16 a fost integrat.

4. Discuții și concluzii

HPV a fost detectat în tumorile colorectale . Cu toate acestea, rolul HPV în carcinogeneza colorectală nu a fost elucidat și subiectul rămâne controversat. În investigația actuală, raportăm o evaluare riguroasă a infecțiilor cu HPV în țesuturile colorectale (cazuri de CCR și controale de mucoasă normală) de la o populație hispanică bine caracterizată, raportată ca având o incidență ridicată a tumorilor maligne asociate cu HPV și o rată ridicată a mortalității prin CCR . Au fost evaluate, de asemenea, genotiparea HPV-16 și starea fizică a genomului HPV-16.

A fost detectată o prevalență ridicată a infecției cu HPV (42,2%) în țesuturile tumorale analizate. Doar 1 din cele 36 (2,8%) de probe de control a fost pozitiv pentru un tip non-HPV-16. Prevalența infecțiilor cu HPV în tumorile colorectale descoperite în cohorta noastră este comparabilă cu procentele raportate anterior în studii din diferite țări care au utilizat diferite abordări experimentale . Analiza imunohistochimică a probelor de țesut fixate în formalină și încorporate în parafină (FFPE) de la persoane din SUA (; 30 de controale, 30 de adenoame și 43 de CCR) a detectat ADN HPV în 27% și, respectiv, 69% din adenoame și CCR . Analizele PCR specifice tipului de HPV ale ADN-ului din probele FFPE de la indivizi chinezi au detectat HPV în 29% din adenoame () și în 53% din CCR ( . Utilizând aceeași strategie nested PCR utilizată în acest studiu în combinație cu PCR in situ, un alt studiu a detectat ADN HPV în 51% din probele de CCR () și nu în probele de control () de la indivizi din SUA . Alte studii care au utilizat aceeași strategie nested PCR cu eșantioane de CCR de la persoane din Argentina au detectat HPV în 44% din eșantioanele de CCR () . Cu toate acestea, Pérez et al. (2005) au raportat că HPV era prezent în 33% din țesuturile colorectale non-neoplastice studiate ( . În schimb, mai multe studii nu au reușit să detecteze HPV și au sugerat că infecția cu HPV nu este un factor de risc pentru CCR .

HPV-16 este cel mai frecvent tip cu risc ridicat în America . HPV-16 a fost, de asemenea, raportat ca fiind foarte răspândit în tumorile maligne asociate cu HPV în RP, cum ar fi cancerul de cap și gât și cancerul de col uterin . În studiul nostru, HPV-16 a fost cel mai răspândit tip de HPV de risc înalt detectat; HPV-16 a fost prezent în 63,2% din probele de CCR HPV-pozitive (12 din 19), ceea ce este comparabil cu unele rapoarte anterioare în care HPV-16 a fost cel mai răspândit tip de HPV de risc înalt detectat. În mod similar, analiza probelor de CCR HPV-pozitiv utilizând o metodă de genotipare a HPV-16 bazată pe PCR a constatat că acesta a fost cel mai frecvent detectat tip viral, fiind prezent în 41 din cele 60 de cazuri (68,3 %) . Genotiparea HPV-16 cu ajutorul acelorași perechi de primer utilizate în acest studiu a detectat HPV-16 în 36% din probele de CCR () . Utilizând tehnici de genotipare a HPV-16 care nu se bazează pe PCR, HPV-16 a fost găsit în 16-94% din probele de CCR HPV-pozitive .

Discrepanțele din literatura de specialitate care raportează detectarea HPV și HPV-16 în tumorile colorectale pot fi atribuite diferențelor metodologice, inclusiv designul studiului, tipul de eșantion de țesut, dimensiunea eșantionului, colectarea eșantionului și diferențele în ceea ce privește sensibilitatea tehnicii de detectare sau genotipare a HPV utilizate. S-au utilizat probe de țesut congelate deoarece ADN-ul extras este de o calitate superioară în comparație cu ADN-ul din FFPE, care este degradat . Procedura de fixare degradează ADN-ul în fragmente <200 bp, ceea ce duce la scăderea randamentului PCR și la incapacitatea de a amplifica ținte lungi . Prin urmare, ADN-ul extras din FFPE nu este optim pentru strategia nested PCR utilizată în analizele noastre. Combinația de amorse PGMY/GP+ amplifică HPV L1 (450 bp). S-a constatat că această combinație de primer s-a dovedit a fi mai sensibilă la tipuri decât seturile de primer MY/GP+, detectând o gamă mai largă de tipuri de HPV . Diferențe suplimentare în detectarea HPV în CCR au fost asociate cu variații regionale în ceea ce privește prevalența infecției cu HPV, care sunt influențate de originea rasială/etnică și geografică a subiectului . De exemplu, HPV-18 este cel mai frecvent detectat în cazurile de CCR din Asia și Europa .

HPV a fost detectat în țesuturile de CCR în mai multe probe tumorale obținute în tot colonul. HPV a fost detectat în 21,05% din tumorile proximale, 42,11% din tumorile distale și 36,84% din tumorile din rect. Distribuția anatomică largă a infecțiilor cu HPV în țesutul tumoral al CCR implică faptul că infecția cu HPV în CCR nu este rezultatul unei transmisii virale retrograde din zona anogenitală. Având în vedere aceste rezultate, nu putem exclude posibilitatea răspândirii hematologice, așa cum au sugerat Bodaghi et al. . Există dovezi ale infecțiilor cu HPV la sugari și la studenții universitari de sex feminin care nu au avut niciodată relații sexuale cu penetrare, ceea ce susține că poate exista transmiterea HPV pe alte căi nonsexuale . Deși HPV este o boală cu transmitere sexuală, nu am colectat informații despre comportamentul sexual, ceea ce ne-ar fi permis să evaluăm dacă există vreo asociere între CCR și comportamentul sexual.

Integrarea virusului în genomul gazdei este un pas critic în carcinogeneza cervicală. Integrarea HPV în genomul gazdei a fost raportată în aproximativ 90% din carcinoamele cervicale. Aceste cazuri prezintă expresia oncogenelor virale E6 și E7 . Starea fizică a HPV poate fi detectată prin absența unui produs PCR, deoarece cadrul de lectură deschis E2 este întrerupt atunci când HPV se integrează în genomul gazdei . Limitările potențiale ale utilizării acestei metode ar putea include următoarele: testul poate detecta ADN viral integrat doar în absența ADN-ului HPV episomal, nu poate discrimina între formele episomale pure și formele mixte, iar posibilitatea integrării virale fără pierderea fragmentului de genă E2 nu este luată în considerare. Cu toate acestea, în studiul nostru, toate cazurile HPV-16 pozitive testate au prezentat integrare, ceea ce înlătură prezența genomului episomal. Procentul ridicat de integrare a genomului HPV-16 în genomul gazdei susține posibilitatea ca HPV să aibă un rol în carcinogeneza colorectală. Rezultatele noastre, deși încurajatoare, trebuie să fie interpretate cu prudență. În ciuda prevalenței ridicate a infecției în tumorile colorectale cu un tip de HPV cu risc ridicat (HPV-16) și a dovezilor de integrare a genomului viral, studiile viitoare trebuie să evalueze dacă infecțiile cu HPV sunt active și dacă oncoproteinele E6 și E7 sunt exprimate pentru a contribui și/sau a avea un rol cauzal în carcinogeneza colorectală.

Studiul nostru are o dimensiune relativ mică a eșantionului, ceea ce poate fi o limitare pentru analizele stratificate și restrânse. Acestea ar putea duce la unele estimări imprecise (după cum reiese din intervalele de încredere largi de 95%). Cu toate acestea, magnitudinea rapoartelor de probabilitate observate pentru asocierea dintre HPV și CCR este foarte mare și este puțin probabil să rezulte dintr-o eroare statistică de tip I. Datele generate în acest studiu, în combinație cu rapoartele din literatura de specialitate, nu sunt încă suficiente pentru a concluziona că HPV este un agent cauzal al CCR conform criteriilor de cauzalitate de la Bradford Hill . Cinci din cele 9 criterii postulate sunt îndeplinite. (1) Forța: în acest studiu și în literatura de specialitate au fost raportate asocieri puternice și semnificative din punct de vedere statistic . (2) Consecvență: HPV a fost detectat în CCR în alte studii care au utilizat aceeași metodologie . (3) Plauzibilitate: HPV se integrează în genomul gazdei și exprimă proteine oncogene cunoscute pentru a promova carcinogeneza . (4) Analogie: HPV-urile cu risc ridicat, cum ar fi HPV-16, au un rol cauzal în alte tipuri de cancer, cum ar fi cancerul de col uterin . (5) Temporalitate: HPV a fost detectat, de asemenea, în adenoame, leziuni precursoare ale CCR . Sunt necesare studii longitudinale suplimentare care să evalueze rolul HPV în timpul carcinogenezei colorectale pentru a susține pe deplin criteriul consecvenței și cel al temporalității. În concluzie, acest studiu raportează o prevalență ridicată a infecției cu HPV, o prevalență ridicată a HPV-16 (un tip cu risc ridicat) și integrarea genomului HPV-16 în țesutul tumorii colorectale de la hispanici din Caraibe. Sunt justificate analize suplimentare pentru a stabili o asociere cauzală între HPV și CCR.

Conflict de interese

Autorii au declarat că nu există niciun conflict de interese.

Recunoștințe

Acest proiect a fost susținut de RCMI Grant G12MD007600 și Grant U54MD007587 de la NIMHD. Un sprijin suplimentar a fost oferit de Granturile R21CA167220 și U54CA096297 de la NCI. Autorii ar dori să mulțumească Dr. Ana Patricia Ortiz pentru lectura critică a acestei lucrări.