Haakeffect

Uitvoering met overmaat antilichamenEdit

Illustratie van de effecten van overmaat antigeen en blokkerende antilichamen op immunoassays.

Bij een agglutinatietest wordt het serum van een persoon (dat antilichamen bevat) toegevoegd aan een reageerbuis die een bepaald antigeen bevat. Als de antilichamen agglutineren met het antigeen en zo immuuncomplexen vormen, wordt de test als positief geïnterpreteerd. Indien er echter te veel antilichamen aanwezig zijn die zich aan het antigeen kunnen binden, worden de antigene plaatsen met antilichamen bedekt en kunnen weinig of geen op het pathogeen gerichte antilichamen meer dan één antigeendeeltje binden. Aangezien de antilichamen geen brug slaan tussen de antigenen, treedt er geen agglutinatie op. Omdat er geen agglutinatie optreedt, wordt de test als negatief geïnterpreteerd. In dit geval is het resultaat vals negatief. Het bereik van relatief hoge antilichaamconcentraties waarbinnen geen reactie optreedt, wordt de prozone genoemd.

Versie met overmaat antigenenEdit

Het effect kan ook optreden door overmaat aan antigenen, wanneer zowel de vang- als de detectieantilichamen verzadigd raken door de hoge analytconcentratie. In dit geval kan geen sandwich worden gevormd door het vangende antilichaam, het antigeen en het detectieantilichaam. In dit geval concurreert het vrije antigeen met het gevangen antigeen voor binding aan het detectieantilichaam. Opeenvolgende toevoeging van antigeen en antilichaam, gekoppeld aan streng wassen, kan dit effect voorkomen, evenals het verhogen van de relatieve concentratie van antilichaam ten opzichte van antigeen, waardoor het effect wordt gemedieerd.

Eenvoudige illustratie van de effecten van een teveel aan antigeen en de doserings-responscurve.

Voorbeelden zijn hoge niveaus van syfilisantilichamen bij HIV-patiënten of hoge niveaus van cryptokokkenantigeen die leiden tot vals-negatieve tests in onverdunde monsters. Dit verschijnsel doet zich ook voor bij serologische tests op brucellose. De serologische test wordt vooral gezien in de precipitatiereactie. Het antilichaam dat niet reageert, staat bekend als het blokkerende antilichaam en verhindert dat het precipiterende antilichaam zich aan de antigenen bindt. De juiste precipitatiereactie vindt dus niet plaats. Wanneer het serum echter wordt verdund, wordt ook het blokkerende antilichaam verdund en daalt zijn concentratie voldoende om de juiste precipitatiereactie te doen plaatsvinden.