- Summary
- Probiotyki… przypadek szczególny
- Probiotyczne działanie bakterii kwasu mlekowego
- Czym są bakterie kwasu mlekowego?
- Ewolucja nazwy…
- Co czyni bakterię probiotyczną?
- Wpływ probiotyków: jakie są dowody?
- Ustalone korzyści
- Trawienie laktozy
- Biegunka
- Wpływ na układ odpornościowy
- Potencjalne korzyści
- Wpływ hipocholesterolemiczny
- Zaparcia
- Rak okrężnicy
- Infekcje układu moczowo-płciowego
- Wrzody
- Niektóre pokarmy probiotyczne: jakie bakterie zawierają?
- Bezpieczeństwo probiotyków
- Niektóre bakterie probiotyczne i ich działanie
Summary
Probiotyki są definiowane jako „żywe mikroorganizmy, które, gdy są podawane w odpowiednich ilościach, przynoszą korzyści zdrowotne gospodarzowi.” Jedną z najbardziej znaczących grup organizmów probiotycznych są bakterie kwasu mlekowego, powszechnie stosowane w fermentowanych produktach mlecznych. Bakterie te mają długą historię bezpiecznego stosowania w żywności. Obserwuje się wzrost zainteresowania tymi gatunkami, ponieważ badania zaczynają ujawniać wiele możliwych korzyści zdrowotnych związanych z bakteriami kwasu mlekowego.
Działanie bakterii kwasu mlekowego jest specyficzne dla gatunku i szczepu, i zależy od wystarczającej liczby bakterii dostępnych w jelitach. Trudności w identyfikacji i klasyfikacji szczepów skomplikowały badania, ponieważ korzyści mogą odnosić się tylko do poszczególnych szczepów.
Niemniej jednak, bakterie kwasu mlekowego mają szereg dobrze ugruntowanych korzyści. Mogą one poprawić trawienie laktozy, odgrywają rolę w zapobieganiu i leczeniu biegunki oraz działają na układ odpornościowy, pomagając organizmowi oprzeć się i zwalczać infekcje.
Więcej pracy należy wykonać, aby potwierdzić rolę, jaką bakterie kwasu mlekowego mogą odgrywać w zapobieganiu lub spowalnianiu wzrostu raka jelita grubego, obniżaniu poziomu cholesterolu, zapobieganiu infekcjom układu moczowo-płciowego, łagodzeniu zaparć i leczeniu alergii pokarmowych.
Probiotyki… przypadek szczególny
W dążeniu do odkrycia, w jaki sposób żywność może wzmacniać zdrowie lub zapobiegać chorobom przewlekłym, badacze natknęli się na inny zakres składników w żywności oprócz składników odżywczych. Ten rosnący obszar informacji doprowadził do powstania nowej etykiety dla żywności, która ma dodatkowe korzyści: żywność funkcjonalna.
Żywność funkcjonalna zawiera znaczące poziomy biologicznie aktywnych składników, które zapewniają korzyści zdrowotne wykraczające poza podstawowe odżywianie. Inne terminy dla żywności funkcjonalnej obejmują nutraceutyki, pharmafoods, designer foods, mood foods … Niektóre przykłady żywności funkcjonalnej są:
- owies i jęczmień, które zawierają beta-glukany i mogą poprawić kontrolę cukru we krwi i zmniejszyć poziom cholesterolu we krwi.
- gotowane pomidory, które zawierają fitochemiczny likopen i mogą zmniejszać ryzyko zachorowania na raka prostaty i szyjki macicy.
- jogurt i inne przetwory mleczne, które zawierają bakterie kwasu mlekowego i mogą poprawiać funkcjonowanie układu pokarmowego. W rzeczywistości, potencjalne korzyści płynące z jogurtu i innych pokarmów zawierających żywe organizmy są tak liczne, że tworzą one specjalną podgrupę żywności funkcjonalnej: żywność probiotyczną.
Probiotyczne działanie bakterii kwasu mlekowego
Na długo przed tym, jak ukuto termin „probiotyk”, Elie Metchnikoff, laureat Nagrody Nobla w dziedzinie immunologii, zasugerował w 1908 roku, że powodem, dla którego bałkańscy chłopi żyli długo, było to, że pili mleko sfermentowane z Lactobacillus bulgaricus i Streptococcus thermophilus (1). Sugerował on, że bakterie te hamują „fermentację gnilną”, co prowadzi do lepszego zdrowia i długowieczności. Jego pomysły wzbudziły wielkie zainteresowanie rolą, jaką mikroflora jelitowa odgrywa w zdrowiu, zainteresowanie, które trwa do dziś.
Dziś bada się wiele potencjalnych korzyści zdrowotnych bakterii probiotycznych, od poprawy równowagi mikrobiologicznej w jelitach po wzmocnienie funkcji układu odpornościowego.
Probiotyki definiuje się jako „żywe mikroorganizmy, które po podaniu w odpowiednich ilościach przynoszą korzyści zdrowotne gospodarzowi” (2). Jedną z najbardziej znaczących grup organizmów probiotycznych są bakterie kwasu mlekowego.
Czym są bakterie kwasu mlekowego?
Bakterie kwasu mlekowego wytwarzają kwas mlekowy jako swój główny produkt. Są one szeroko rozpowszechnione w przyrodzie – w glebie, warzywach, mięsie, mleku i ludzkim ciele. Wiele z nich stosuje się w fermentowanych produktach mlecznych. Streptococcus thermophilus (S. thermophilus) i Lactobacillus bulgaricus (L. bulgaricus) to dwie bakterie niezbędne do produkcji jogurtu. Wiele komercyjnych jogurtów w Kanadzie zawiera również Lactobacillus acidophilus (L. acidophilus) i Bifidobacterium bifidus (B. bifidus). Lactobacillus casei (L. casei) jest często spotykany w serach. Wszystkie te gatunki bakterii są akceptowane przez Kanadę jako probiotyki (3).
Te gatunki mogą być dalej klasyfikowane na podgatunki, warianty i szczepy. Trudność w identyfikacji i klasyfikacji szczepów skomplikowała badania, ponieważ korzyści mogą odnosić się tylko do poszczególnych szczepów.
Ewolucja nazwy…
Lactobacillus GG (LGG) początkowo był klasyfikowany jako L. acidophilus strain GG, nazwany tak na cześć odkrywców Gorbacha i Goldina. Następnie ewoluował do nazwy L. casei subspecies rhamnosum, lub L. rhamnosum. Ostatnio proponuje się jego przeklasyfikowanie na odrębny gatunek: L. zeae. Jest on nadal powszechnie nazywany Lactobacillus GG.
Tak więc, badania przeprowadzone, gdy LGG został sklasyfikowany jako L. acidophilus, przypisałyby wszelkie korzyści acidophilus. Nie będzie to już miało miejsca.
Co czyni bakterię probiotyczną?
Aby bakterie mogły wywierać jakikolwiek efekt probiotyczny, muszą być w stanie przetrwać zarówno kwasy żołądkowe (pH tak niskie jak 1,5), jak i kwasy żółciowe (pH tak niskie jak 2). Dotyczy to większości bakterii Lactobacillus.
Po drugie, bakterie muszą dotrzeć do jelit w wystarczającej ilości, aby wywołać efekt. Wymagana ilość zależy od szczepu i badanej korzyści zdrowotnej. Minimalny skuteczny poziom dla poszczególnych bakterii i konkretnych korzyści zdrowotnych jest aktywnie badany.
Bakterie mogą potrzebować przylegać do ściany jelita (tj. „implant”) i kolonizować się, aby wystąpił efekt. Sherwood Gorbach, jeden z odkrywców Lactobacillus GG, stwierdza: „Nasze badania prowadzone przez poprzednie 20 lat ustaliły ponad wszelką wątpliwość, że implantacja w jelicie jest krytyczną cechą, którą musi posiadać szczep, aby wpływać na środowisko jelitowe…” (4). Jednakże, inni twierdzą, że ciągły tranzyt (np. ciągłe spożywanie probiotycznej żywności) jest alternatywą dla implantacji i kolonizacji organizmu (5).
Wreszcie, bakterie muszą wykazywać korzystny wpływ na zdrowie człowieka. Niektóre przykłady badanych korzystnych skutków obejmują łagodzenie nietolerancji laktozy, zapobieganie i leczenie biegunki, utrzymywanie prawidłowej flory jelitowej, antagonizm wobec patogenów, stymulację układu odpornościowego, działanie antyrakotwórcze i obniżanie poziomu cholesterolu w surowicy.
Wpływ probiotyków: jakie są dowody?
Ustalone korzyści
Trawienie laktozy
Powszechnie wiadomo, że obecność bakterii kwasu mlekowego, a konkretnie L bulgaricus i S thermophilus w jogurcie, poprawia trawienie laktozy (6). Wydaje się, że ściany komórkowe bakterii muszą być nienaruszone (tak jak w przypadku, gdy bakterie są żywe), aby efekt ten mógł wystąpić (7). Niektóre możliwe mechanizmy ulepszonego trawienia laktozy obejmują:
- Aktywność laktazy bakterii faktycznie wykonuje pracę polegającą na trawieniu laktozy w produkcie, gdy dotrze on do jelita (8).
- Wolniejszy czas tranzytu jogurtu może zapewnić więcej czasu pozostałej laktazie jelitowej i bakteriom jogurtowym na strawienie laktozy (9).
- Coś w jogurcie może hamować fermentację laktozy i w ten sposób zmniejszać objawy (9).
Słodkie mleko acidophilus (mleko z L. acidophilus, które nie zostało dopuszczone do fermentacji) nie wydaje się łagodzić objawów niestrawności laktozy. Chociaż niektóre prace wykazują niewielki efekt, większość prac nie wykazuje żadnego efektu (10).
Biegunka
Bakterie kwasu mlekowego mogą być przydatne w zapobieganiu i skracaniu czasu trwania kilku rodzajów biegunki (11).
W wielu dobrze zaprojektowanych badaniach zauważono, że fermentowane produkty mleczne skutecznie zapobiegają lub leczą biegunkę u niemowląt (12). Efekty odnotowano w przypadku L. casei i B. bifidum.
Kilka małych badań wykazało, że bakterie kwasu mlekowego mogą zmniejszyć częstość występowania biegunki związanej z antybiotykami (13). Sugeruje to rolę bakterii kwasu mlekowego u pacjentów z immunosupresją, którzy rutynowo stosują antybiotyki (14).
Kilka badań dotyczących biegunki podróżnych wykazało skuteczność bakterii kwasu mlekowego w zmniejszaniu częstości występowania biegunki (15, 16).
Bakterie kwasu mlekowego mogą prawdopodobnie zmniejszyć biegunkę na kilka sposobów:
- Bakterie kwasu mlekowego konkurują z patogenami o składniki odżywcze i przestrzeń w jelitach (13).
- Bioprodukty przemiany materii mogą mieć bezpośrednie działanie przeciwko patogenom. Na przykład, praca in vitro pokazuje, że L. casei, L. acidophilus i L. bulgaricus mogą wytwarzać środki przeciwbakteryjne, takie jak acidofilina i bulgarican, które mogą hamować wzrost patogenów (13).
- Bakterie kwasu mlekowego mogą być skuteczne przeciwko biegunce ze względu na wpływ na układ odpornościowy.
Wpływ na układ odpornościowy
Bakterie kwasu mlekowego wzmacniają działanie układu odpornościowego na poziomie jelitowym i ogólnoustrojowym. Wykazano, że u ludzi bakterie kwasu mlekowego zwiększają:
- limfocytów B lub komórek B, które rozpoznają ciała obce (17),
- aktywności fagocytarnej, pomagającej w niszczeniu ciał obcych (18),
- komórek wydzielających IgA-, IgG- i IgM oraz poziomu IgA w surowicy, co zwiększyłoby aktywność przeciwciał (19), oraz
- poziomu interferonuγ, który pomaga białym krwinkom zwalczać choroby (20).
Innym sposobem, w jaki działają mechanizmy obronne organizmu, jest bariera zapewniana przez warstwy śluzu w jelicie. Błona śluzowa stanowi fizyczną barierę, zwykle zapobiegającą przechodzeniu obcych substancji przez jelito. Ponadto, w błonie śluzowej jelita znajduje się wiele różnych komórek odpornościowych. Pozwala to na interakcję jelita z układem odpornościowym. Bakterie kwasu mlekowego mogą stymulować aktywność immunologiczną w błonie śluzowej jelit (21).
W stanach takich jak alergia lub zespół autobrowaru (nieprawidłowa fermentacja jelitowa powodująca zwiększony poziom etanolu we krwi), przepuszczalność jelita cienkiego może się zwiększyć, umożliwiając przedostanie się niestrawionych cząsteczek białka (22). Wykazano, że Lactobacillus GG odwraca przepuszczalność jelit (23).
Bakterie probiotyczne mogą odgrywać rolę w leczeniu alergii pokarmowej. Wykazano to w eksperymencie z udziałem niemowląt, o których wiedziano, że mają egzemę z powodu alergii na mleko krowie (24). Niemowlęta w grupie eksperymentalnej otrzymywały hydrolizowaną formułę serwatkową wzbogaconą o LGG, podczas gdy te w grupie kontrolnej otrzymywały tylko formułę serwatkową. Stan skóry niemowląt otrzymujących LGG uległ znacznej poprawie w porównaniu z grupą kontrolną. Ponadto, grupa eksperymentalna miała poprawione poziomy czynników związanych z zapaleniem jelit.
Potencjalne korzyści
Wpływ hipocholesterolemiczny
Niektóre szczepy L. acidophilus mogą pobierać cholesterol w obecności żółci (25). Inne badania in vitro wykazują, że cholesterol może wytrącać się z wolnymi solami żółci w obecności L. acidophilus, szczególnie w środowisku kwaśnym (26). Tak więc postawiono hipotezę, że jedno lub oba te działania będą miały miejsce in vivo i pomogą obniżyć poziom cholesterolu w surowicy krwi u ludzi. Podsumowując, nie ma jeszcze dobrych dowodów na potwierdzenie obniżającego cholesterol działania fermentowanych produktów mlecznych.
Zaparcia
Produkty mleczne fermentowane z udziałem niektórych szczepów L. acidophilus i bifidobakterii skracają czas tranzytu jelitowego. Efekt ten może być przydatny u osób z zaparciami, np. u osób starszych (27). Aby to potwierdzić, potrzebne są dobrze kontrolowane badania na ludziach.
Rak okrężnicy
Kilka bakterii kwasu mlekowego może pomóc w zapobieganiu inicjacji raka okrężnicy. Wykazano również, że bakterie kwasu mlekowego spowalniają wzrost eksperymentalnych nowotworów, chociaż wyniki nie są długoterminowe.
Wydaje się, że bakterie kwasu mlekowego mogą zmniejszać poziom enzymów okrężnicy, które przekształcają prokarcynogeny w karcynogeny. W szczególności, bakterie kwasu mlekowego mogą obniżać poziom enzymów β-glukuronidazy, nitroreduktazy i azoreduktazy (28). Bakterie kwasu mlekowego mogą być również zaangażowane w bezpośrednią redukcję prokarcynogenów, na przykład poprzez pobieranie azotynów i redukcję poziomu wtórnych soli żółciowych (28). W większości doniesień efekty te występują tylko w okresie, w którym bakterie są spożywane (28).
Zmiany aktywności enzymatycznej u ludzi zaobserwowano w przypadku L. acidophilus i B. bifidum (29) oraz LGG (30). Badania na zwierzętach wykazują mniej guzów u zwierząt narażonych na działanie czynnika rakotwórczego, w obecności LGG, w porównaniu do zwierząt narażonych na działanie czynnika rakotwórczego bez korzyści płynących z LGG (31). U ludzi, raporty epidemiologiczne pokazują, że populacje spożywające fermentowane produkty mleczne mają zmniejszone ryzyko zachorowania na raka jelita grubego (32). Jednak nie ma jeszcze wyraźnego związku między spożyciem bakterii kwasu mlekowego a zapobieganiem nowotworom.
Infekcje układu moczowo-płciowego
Bakterie kwasu mlekowego mogą zmniejszać kandydozę pochwy.Są to wciąż spekulacje, jednak byłyby to badania warte kontynuacji. Jedno małe badanie wykazało, że kobiety z nawracającą kandydozą pochwy, które jadły 8 uncji dziennie jogurtu zawierającego L acidophilus miały mniej wystąpień kandydozy pochwy niż w okresie kontrolnym, w którym nie jadły jogurtu (33). Było to badanie typu cross-over, które rozpoczęło się od 21 kobiet. Osiem z tych, którzy zaczęli w grupie leczenia odmówił przekroczenia do fazy kontrolnej, ponieważ doświadczyli tak wiele mniej infekcji.Tak więc tylko 13 kobiet zakończyło badanie.
Wrzody
Bakterie kwasu mlekowego wykazują pewne obietnice przeciwko wrzodom żołądka. Praca ze specyficznym szczepem L. acidophilus wykazała, że L. acidophilus skutecznie konkuruje (in vitro) z Heliobacter pylori o miejsca przyczepienia, ograniczając liczbę H. pylori, które mogą przyczepić się do ściany komórkowej (34). Zakażenie H. pylori jest czynnikiem ryzyka wystąpienia wrzodów żołądka. Małe badanie pacjentów z wrzodami wykazało, że Bifidobacteria bifidum promowała gojenie wrzodów żołądka u 50% pacjentów i eradykację H. pylori z błony śluzowej u 30% pacjentów (35).
Niektóre pokarmy probiotyczne: jakie bakterie zawierają?
Jogurt zawsze zawiera L. bulgaricus i S. thermophilus, a także może zawierać L. acidophilus i bifidobakterie.
Mleko acidofilne zawiera Lactobacillus acidophilus.
Kefir zawiera liczne bakterie kwasu mlekowego, w tym Lactococcus lactis, Lactococcus cremoris, Lactobacillus kefir, Lactobacillus casei, Lactobacillus acidophilus i gatunki Leuconostoc. Zawiera również drożdże.
Ważne jest, aby pamiętać, że korzyści z probiotyków wymagają minimalnej liczby bakterii, aby osiągnąć korzyści. Chociaż minimalne poziomy nie zostały jeszcze ustalone, dawki badawcze są zazwyczaj rzędu 1 miliarda komórek. Nie wszystkie produkty fermentowane będą zawierały wystarczającą ilość aktywnych mikroorganizmów. Im świeższy produkt, tym więcej organizmów będzie aktywnych.
Bezpieczeństwo probiotyków
Bakterie kwasu mlekowego tradycyjnie stosowane w fermentowanych produktach mlecznych mają długą historię bezpiecznego stosowania. Jednak wraz ze wzrostem zainteresowania stosowaniem nowych szczepów, badania bezpieczeństwa staną się ważne.
Lactobacillus GG przeszedł szeroko zakrojone badania pod kątem bezpieczeństwa i skuteczności jego stosowania. Został on zatwierdzony w 1992 roku przez brytyjski Komitet Doradczy ds. Nowej Żywności oraz w 1996 roku przez japońskie władze ds. żywności funkcjonalnej (36).
W Kanadzie probiotyki są uważane za składnik żywności po dodaniu do żywności i są regulowane przez Health Canada na mocy ustawy o żywności i lekach. Kanadyjska Agencja Kontroli Żywności (CFIA) jest odpowiedzialna za egzekwowanie ustawy o żywności i lekach, natomiast producenci są odpowiedzialni za bezpieczeństwo żywności, którą produkują i sprzedają. Health Canada opracowała wytyczne określające, w jaki sposób mogą być stosowane oświadczenia zdrowotne dotyczące probiotyków (37).
Niektóre bakterie probiotyczne i ich działanie |
|||
| Bakterie | Skutki działania probiotyków | Właściwości | Użycie |
|
Lactobacillus acidophilus . (6 głównych gatunków) |
Pojedynczy szczep L. acidophilus prawdopodobnie nie przyniesie wszystkich domniemanych korzyści. |
Dobrze znosi tranzyt żołądkowo-jelitowy. (Zdolność do przeżycia różni się w zależności od szczepu.) Przyjmowanie wykazane in vitro, ale jeszcze nie wykazane in vivo. Wzrasta powoli w produktach fermentowanych; nie przeżywa dobrze w produktach fermentowanych. |
Używany w mleku acidofilnym i w kefirze; może być stosowany w jogurcie. |
| Lactobacillus GG |
|
Implantuje i kolonizuje przewód jelitowy. Kolonizacja ta nie jest jednak trwała. Badania pokazują, że bakterie probiotyczne powinny być spożywane kilka razy w tygodniu, aby utrzymać ich wpływ na florę jelitową. |
Niektóre nowe fermentowane produkty mleczne z wykorzystaniem LGG są dostępne w Europie. Minimalne poziomy niezbędne do kolonizacji to:
|
| Lactobacillus casei |
|
Niektóre szczepy przeżywają tranzyt jelitowy. Nie kolonizuje. |
Używany w kefirze i wielu serach, w tym parmezanie i cheddarze; stosowany również w niektórych nowych produktach podobnych do jogurtów. |
|
Bifidobacteria (29 szczepów) |
|
Niektóre szczepy Bifidobacteria dobrze przeżywają pasaż jelitowy, ale nie jest jasne, czy implantują. Produkują zarówno kwas mlekowy, jak i kwas octowy. |
Mogą być stosowane w jogurtach. |
1. Metchnikoff E. 1908. The Prolongation of Life, 1. wydanie. G.P. Putnam’s Sons, NY.
2. Hill C. et al. 2014. Dokument konsensusu ekspertów: The International Scientific Association for Probiotics and Prebiotics consensus statement on the scope and approproiate use of the term probiotic. Nature Reviews Gastroenterology & Hepatology 11:506-514. doi:10.1038/nrgastro.2014.66
3. Health Canada. 2009. Zaakceptowane oświadczenia dotyczące charakteru mikroorganizmów probiotycznych w żywności. http://www.hc-sc.gc.ca/fn-an/label-etiquet/claims-reclam/probiotics_claims-allegations_probiotiques-eng.php
4. Gorbach S.L. 1996. The Discovery of Lactobacillus GG. Nutrition Today Vol. 31(6) (suppl.):2S-4S.
5. Saloff-Coste C.J. 1997. Lactobacillus acidophilus. Danone World Newsletter No. 13.
6. Martini M.C., D. Kukielka, D. Savaiano. 1991. Lactose digestion from yogurt: influence of a meal and additional lactose. Am. J. Clin. Nutr. 53:1253-8.
7. Kuhn C., A. Titze, C.A. Lorenz. 1996. Are viable microorganisms essential for the enhancement of intestinal hydrolysis of lactose by the β-galactosidase of fermented milk products? IDF Nutrition Newsletter 5:38.
8. Martini M.C., G.L. Bollweg, M.D. Levitt, et al. 1987. Lactose digestion by yogurt β-galactosidase: influence of pH and microbial cell integrity. Am. J. Clin. Nutr. 45:432-436.
9. Schaafsma G. 1993. Lactose intolerance and consumption of cultured dairy products – a review. IDF Nutrition Newsletter 2:15-16. 9. Onwulata C.I., D.R. Rao, P. Vankineni. 1989.
10. Względna skuteczność jogurtu, słodkie mleko acidophilus, hydrolizowane mleko laktozowe i komercyjne tabletki laktazy w łagodzeniu maldigestion laktozy. Am. J. Clin. Nutr. 49:1233-1237.
11. Sanders M.E. 1994. Bakterie kwasu mlekowego jako promotorów ludzkiego zdrowia. W Żywność funkcjonalna, red. I. Goldberg. London: Chapman & Hall. 294-322.
12. Saloff-Coste C.J. 1995. Biegunka i mleka fermentowane. Danone World Newsletter No. 8.
13. Salminen S., M. Deighton. 1992. Bakterie kwasu mlekowego w jelitach w stanach prawidłowych i zaburzonych. Dig. Dis. 10:227-38.
14. Aronsson B., P. Barany, C.E. Nord, et al. 1987. Clostridium difficile-associated diarrhea in uremic patients. Eur. J. Clin. Microbiol. 6:352-356.
15. Black F.T., P.L. Andersen, J. Orskov, et al. 1989. Prophylactic efficacy of lactobacilli on traveller’s diarrhea. Travel. Med. 7:333-335.
16. Oksanen P.J., S. Salminen, M. Saxelin, et al. 1990. Prevention of traveller’s diarrhea by Lactobacillus GG. Ann. Med. 22:53-56.
17. De Simone C., R. Vesely, B. Bianchi Salvadori, et al. 1993. The role of probiotics in modulation of the immune system in man and in animals. Int. J. Immunother. IX:23-28.
18. Schiffrin E.J., F. Rochat, H. Link-Amster, et al. 1995. Immunomodulation of human blood cells following the ingestion of lactic acid bacteria. J. of Dairy Science 78:491-497.
19. Kaila M., E. Isolauri, E. Soppi, et al. 1992. Enhancement of the circulating antibody secreting cell response on human diarrhea by a human lactobacillus strain. Pediatr. Res. 32:141-144.
20. Halpern G.M., K.G. Vruwink, J. Van de Water, et al. 1991. Influence of long-term yoghurt consumption in young adults. Int. J. Immunother. VII:205-210.
21. Perdigón G., M. Medici, M.E. Bibas Bonet de Jorat, et al. 1993. Immunomodulating effects of lactic acid bacteria on mucosal and tumoral immunity. Int. J. Immunother. IX:29-52.
22. Joneja J.M., E.A. Ayre, K. Paterson. 1997. Abnormal gut fermentation: the „auto-brewery” syndrome. J. Can. Diet. Assoc. 58(2):97-99.
23. Isolauri E., H. Majamaa, T. Arvola, et al. 1993. Lactobacillus casei szczep GG odwraca zwiększoną przepuszczalność jelitową wywołaną przez mleko krowie u ssących szczurów. Gastroenterology 105:643-1650.
24. Majamaa, H., E. Isolauri. 1997. Probiotyki: A novel approach in the management of food allergy. J. Allergy and Clin. Immunol. Feb:179-185.
25. Buck L.M., S.E. Gilliland. 1994. Comparison of freshly isolated strains of Lactobacillus acidophilus of human intestinal origin for ability to assimilate cholesterol during growth. Journal of Dairy Science 77:2925-2933.
26. Klaver F.A.M., R. van der Meer. 1993.The assumed assimilation of cholesterol by lactobacilli and Bifidobacterium bifidum is due to their bile salt-deconjugating activity. Appl. Environ. Microbiol. 59:1120-1124.
27. Hitchins A.D., F.E. McDonough. 1989. Prophylactic and therapeutic aspects of fermented milk. Am. J. of Clin. Nutr. 49:675-684.
28. Fernandes C.F., K.M. Shahani. 1990. Anticarcinogenic i immunologiczne właściwości dietetycznych lactobacilli. Journal of Food Protection 53:704-710.
29. Marteau P., P. Pochart, B. Flourié, et al. 1990. Effect of chronic ingestion of a fermented dairy product containing Lactobacillus acidophilus and Bifidobacterium bifidum on metabolic activities of the colonic flora in humans. Am. J. Clin. Nutr. 52:685-688.
30. Goldin B.R., S.L. Gorbach. 1984. Wpływ mleka i karmienia lactobacillus na ludzkiej aktywności enzymów bakterii jelitowych. Am. J. Clin. Nutr. 39:756-61.
31. Goldin B. 1996. Metaboliczna aktywność mikroflory jelitowej i jej rola w raku jelita grubego. Nutrition Today 31(6)(suppl):24S-27S.
32. Kampman E., R.A. Goldbohm, P.A. van den Brandt, et al. 1994. Fermentowane produkty mleczne, wapń i rak jelita grubego w holenderskim badaniu kohortowym. Cancer Research 54:3186-3190.
33. Hilton E., H.D. Isenberg, P. Alperstein, et al. 1992. Ingestion of yogurt containing Lactobacillus acidophilus as prophylaxis for candidal vaginitis. Ann. Int. Medicine. 116:353-57.
34. Brassart D., A. Donnet-Hughes, J.-R. Neeser, et al. 1995. Szczepy bakterii mleczarskich o właściwościach probiotycznych: kryteria wyboru. IDF Nutrition Newsletter 4:29-32.
35. Salminen S., R. Tanaka. 1995. Annual review on cultured milks and probiotics. IDF Nutrition Newsletter 4:47-50.
36. Seppo J., D.C. Donohue. 1996. Ocena bezpieczeństwa szczepu Lactobacillus GG (ATCC 53103). Nutrition Today 31(6)(suppl.):12S-15S.
37. Health Canada. 2009. The Use of Probiotic Microorganisms in Food. http://www.hc-sc.gc.ca/fn-an/legislation/guide-ld/probiotics_guidance-orientation_probiotiques-eng.php