- Abstract
- 1. Inleiding
- 2. Methoden
- 2.1. Dosisescalatie
- 2.2. Deelnemers aan de studie
- 2.3. Outcome Measures
- 2.4. Paddenstoelgeneesmiddel
- 2.5. Immune Seizures
- 2.5.1. Complete Blood Count with Differential
- 2.5.2. Natural Killer Cell Functional Activity
- 2.6. Clinical Trial Protocol
- 3. Resultaten
- 3.1. Adverse Events
- 3.2. Immune Response
- 4. Discussie
- Ethische goedkeuring
- Conflict of Interests
- Acknowledgments
Abstract
Inleiding. Van oraal toegediende preparaten van de Trametes versicolor (Tv) paddestoel wordt verondersteld dat ze de immuunrespons verbeteren bij vrouwen met borstkanker na standaard chemotherapie en radiotherapie. Methoden. Een fase I, twee-centra, dosis escalatie studie werd gedaan om de maximaal getolereerde dosis van een Tv-preparaat te bepalen wanneer het dagelijks wordt ingenomen in verdeelde doses gedurende 6 weken na recente voltooiing van radiotherapie. Elf deelneemsters werden gerekruteerd en negen vrouwen voltooiden de studie. Elk cohort bestond uit drie deelneemsters die een van de drie doses Tv (3, 6 of 9 gram) kregen. Immuungegevens werden verzameld voor en na de bestraling, op 3 tijdstippen tijdens de behandeling en na een wasbeurt van 3 weken. Resultaten. Negen bijwerkingen werden gemeld (7 mild, 1 matig, en 1 ernstig), wat suggereert dat Tv goed werd verdragen. Immunologische resultaten toonden trends aan in (1) verhoogd aantal lymfocyten bij 6 en 9 gram/dag; (2) verhoogde natuurlijke killercel functionele activiteit bij 6 gram/dag; (3) dosis-gerelateerde toename in CD8+ T-cellen en CD19+ B-cellen, maar niet in CD4+ T-cellen of CD16+56+ NK-cellen. Conclusie. Deze bevindingen tonen aan dat tot 9 gram/dag van een Tv-preparaat veilig en verdraagbaar is bij vrouwen met borstkanker in de postprimaire behandelingssetting. Dit Tv-preparaat kan de immuunstatus verbeteren bij immuungecompromitteerde borstkankerpatiënten na standaard primaire oncologische behandeling.
1. Inleiding
Trametes versicolor (Tv), ook bekend als Coriolus versicolor en gewoonlijk Kalkoenstaart genoemd, is een paddenstoelensoort waarvan preparaten zijn gemaakt die een lange gebruikshistorie hebben in de traditionele Aziatische geneeskunde . Twee proteoglycaanfracties, polysaccharide-K (PSK) en polysaccharide-peptide (PSP), zijn vergelijkbare heetwaterextracten van Tv met gerapporteerde antikankeractiviteit . In Japan wordt PSK routinematig voorgeschreven aan kankerpatiënten, zowel tijdens als na bestraling en chemotherapie. Het is ook een gangbare praktijk onder veel natuurgeneeskundige artsen (NDs) en integratieve oncologen (MDs) in de VS om hele, gevriesdroogde Tv voor te schrijven aan borstkankerpatiënten. Er wordt verondersteld dat de immunologische activiteit van Tv het belangrijkste onderliggende mechanisme is dat verantwoordelijk is voor de antitumor effecten en de invloed ervan op de overlevingskansen. Het werkingsmechanisme van Trametes versicolor omvat verbetering van zowel aangeboren als adaptieve immuunreacties, althans gedeeltelijk via Toll-like 2 receptor agonistische activiteit. Preklinische dierstudies en voorlopige klinische gegevens ondersteunen de hypothese dat Tv derivaten gunstig kunnen zijn bij de behandeling van zowel oestrogeen receptor negatieve als positieve kankers door het verzachten van immunologische depressieve effecten van de behandeling en het verbeteren van ziektevrije overleving via verbetering van immunologische surveillance en het overwinnen van tumorantigeentolerantie.
Inzicht in hoe immunologische factoren worden beïnvloed door behandelingen bij borstkanker suggereert veelbelovende aandachtsgebieden bij het ontwikkelen van aanvullende therapieën om antitumor immuunreacties te versterken. Recente gegevens tonen aan dat bepaalde klassen van chemotherapeutische geneesmiddelen immunogene tumorceldood veroorzaken, wat leidt tot verbetering van de antigen kruispresentatie en stimulatie van de antitumor immuunrespons. Er zijn aanwijzingen dat NK-cellen een belangrijke rol spelen bij de preventie van zowel vroege als uitgezaaide borstkanker. Van sommige borstkankerpatiënten is gemeld dat zij geen NK-celactiviteit hebben tegen K562-doelwitcellen. De huidige gegevens suggereren dat borstkankerpatiënten die chirurgie, chemotherapie en radiotherapie hebben ondergaan, immunologisch deficit hebben . Andersen e.a. hebben gemeld dat stressniveaus bij borstkankerpatiënten significant lagere NK-cellysis voorspelden evenals een verminderde proliferatieve respons op perifere bloedlymfocyten. Onze vorige observatiestudie bevestigde dat lymfopenie en lage NK celactiviteit aanwezig waren gedurende de 6 weken na het beëindigen van de bestralingstherapie.
Om het potentiële voordeel van Trametes versicolor bij vrouwen met borstkanker beter te begrijpen, was een dosisescalatiestudie nodig om de veiligheid en verdraagbaarheid te evalueren. Daartoe voltooide een multidisciplinair team van de Universiteit van Minnesota en Bastyr University een fase 1-dosisescalatiestudie om de veiligheid en de maximaal getolereerde dosis van Tv te bepalen bij vrouwen bij wie borstkanker was gediagnosticeerd en die een standaardbehandeling voor borstkanker ondergingen en bereid waren deel te nemen aan een negen weken durende studie na bestralingstherapie.
2. Methoden
2.1. Dosisescalatie
Er werd gebruik gemaakt van een standaard fase 1-design met 3 proefpersonen per dosisniveau totdat de MTD (maximaal getolereerde dosis) is bereikt. Dosisescalatieschema voor elk cohort Tv was een 3 gm (de meest gebruikte dosis); 6 gm; 9 gm; 12 gm; 18 gm; 24 gm. In deze studie werd alleen gerekruteerd via het cohort van negen gram (𝑁=9).
2.2. Deelnemers aan de studie
Vrouwen tussen 21 en 75 jaar, gediagnosticeerd met stadium I, II, of III borstkanker en die een operatie en chemotherapie hadden ondergaan en klaar waren om te beginnen met bestraling, werden ingeschreven in de studie na het geven van schriftelijke toestemming. Om voor de studie in aanmerking te komen, moesten de deelnemers bereid zijn om gedurende de hele studie een consistent dieet te volgen en tijdens de bestralingstherapie en tot aan de voltooiing van de studie geen paddestoelen of andere kruidenproducten met gemelde immunomodulerende effecten in hun dieet op te nemen. Hematologische, renale en leverfuncties binnen de normale grenzen waren vereist voor deelname aan de studie. De studie werd uitgevoerd in het Cancer Center van de Universiteit van Minnesota in Minneapolis, Minnesota en Bastyr University in Ken meer, Washington. De studie werd goedgekeurd door de IRB-commissies van de Universiteit van Minnesota en Bastyr University. Tussen januari 2008 en juni 2010 voldeden elf vrouwen met borstkanker in stadium I-III aan de enge criteria voor dit onderzoek, stemden toe in deelname en werden achtereenvolgens ingeschreven uit het cohort met de laagste dosering. Drie deelneemsters in elk van de 3 gm, 6 gm en 9 gm cohorten voltooiden het onderzoek. Twee van de deelneemsters trokken zich na het tweede bezoek terug uit de studie vanwege problemen met vervoer naar de kliniek. Kenmerken van de negen vrouwen die het onderzoek voltooiden waren een leeftijdsbereik van 38 tot 68 jaar oud; zes ER-negatief en drie ER-positief; drie stadium I; twee stadium II en vier stadium III borstkankers. Eén van de vrouwen die de studie voltooide onderging geen chemotherapie voorafgaand aan de bestraling, en een schending van het toelatingsprotocol werd gemeld aan de IRB.
2.3. Outcome Measures
Het primaire doel van de studie was het evalueren van de veiligheid en verdraagbaarheid van Trametes versicolor bij vrouwen met borstkanker in de postradiotherapeutische setting. De negen deelnemers aan de dosisescalatiestudie werden gecontroleerd op ongewenste voorvallen (adverse events – AE’s) met zowel klinische als laboratoriummethoden en dosisbeperkende toxiciteitscriteria (DLT’s) gedefinieerd als elke graad 2 of hoger behandelingsgerelateerde toxiciteit zoals gescoord volgens de Common Terminology Criteria for Adverse Events V 3.0 (CTCAE) van het NCI. De vrouwen werden wekelijks gescreend op ongewenste voorvallen tijdens de toediening van het product, hetzij tijdens hun kliniekbezoek, hetzij via telefonische screening tussen de bezoeken door. Het secundaire doel was het verzamelen van voorlopige gegevens die de basisgegevens vóór en na bestralingstherapie, immunologische metingen tijdens en na de behandeling vergeleken, inclusief volledig bloedbeeld met differentieel, natural killer (NK) celactiviteit, T-regulatorcelassay, T/B/NK-celsubsetassay, fagocytische index, en cytokineniveaus. Statistische analyses, met inbegrip van onafhankelijke steekproef t-tests en eenzijdige ANOVA’s met Turkije post hoc meervoudige vergelijking, werden uitgevoerd met GraphPad Prism, versie 5.04 (GraphPad Software, Inc., La Jolla, CA). Om de power en de steekproefomvang te vergroten, werden gegevens van een observationele studie (𝑁=14) die sinds 2006 door onze centra werd uitgevoerd, gecombineerd met de huidige dosisescalatiestudie (𝑁=9). De toelatingscriteria waren identiek voor beide studies (𝑁=23).
2.4. Paddenstoelgeneesmiddel
Trametes versicolor gevriesdroogd myceliumpoeder werd verkregen van Paul Stamets bij Fungi Perfecti, Inc., Olympia, WA en werd ingekapseld door Beehive Botanicals (Hayward, WI). Elke capsule bevatte 500 mg van het product. FDA IND goedkeuring (# 75,405) werd verkregen in 2007.
2.5. Immune Seizures
2.5.1. Complete Blood Count with Differential
De klinische laboratoriumtesten (CBC, chemie, serumzwangerschapstests en urineonderzoek) werden uitgevoerd op de afdeling Laboratoriumgeneeskunde van de Universiteit van Washington voor deelnemers die werden gerekruteerd op de Bastyr University-locatie en op het University of Minnesota Fairview Diagnostic Laboratory voor deelnemers die werden gerekruteerd op de U of Minnesota-locatie.
2.5.2. Natural Killer Cell Functional Activity
De gemeten subset van immuuncellen omvatte NK cel activiteit, T regulerende cel assay, T/B/NK cel subset assay, fagocytische index, en cytokine niveaus. Immunologische testen werden uitgevoerd in het laboratorium van Bastyr University voor proefpersonen die op beide locaties werden gerekruteerd. Bloed verzameld bij het University of Minnesota General Clinical Research Center (GCRC) werd ’s nachts verzonden naar Bastyr University. De kwaliteit van het getransporteerde bloed van de Universiteit van Minnesota naar Bastyr werd beoordeeld aan de hand van de volgende criteria. Voor specimens ouder dan 48 uur bij aankomst in het Bastyr laboratorium, werden de lymfocyten geïsoleerd, en de levensvatbaarheid van de cellen werd bepaald door trypan blauw kleuring. Als de levensvatbaarheid groter was dan 80%, werd de test uitgevoerd. Als de levensvatbaarheid minder dan 80% was, werden de specimens afgekeurd. Perifere bloed mononucleaire cellen (PBMC’s) werden geïsoleerd door Ficoll-Hypaque gradiënt (dichtheid = 1,070 g/mL), tweemaal gewassen in PBS, en onderhouden in RPMI 1640, 10% FBS met 2 mM L-Gln en penicilline-streptomycine (1000 U/mL; 1 mg/mL). De NK-celactiviteit van deze PBMC-monsters, gemeten aan de hand van het vermogen om K562 tumordoelcellen te doden, werd in drievoud beoordeeld bij een effector-tot-doel (E : T)-verhouding van 50 : 1, 25 : 1, en 12,5 : 1 volgens gepubliceerde methoden. Doelwitcellen werden gelabeld met 3,3′-dioctadecyloxacarbocyanine perchloraat (DiOC18) en gedurende vier uur gecultiveerd met PBMC-effectorcellen. Een controlemonster met uitsluitend K562-cellen werd bijgevoegd om spontane doelceldood te bepalen. Na incubatie werd propidiumjodide toegevoegd om dode cellen op te sporen. Het percentage gedode doelcellen werd bepaald door het percentage spontane lyses af te trekken van het percentage specifieke lysis (PSL) van de respectieve E : T-verhouding. Om de gestandaardiseerde NK-celactiviteit weer te geven, werden lytische eenheden berekend door een eerder gepubliceerd en gevalideerd softwareprogramma met gebruikmaking van de volgende parameters: doel per well = 10.000; LU per no. cel = 107; curve maximum = 48; percent lyses = 20 . LU20-waarden, gedefinieerd als de E : De LU20-waarden, gedefinieerd als de E : T-verhouding waarbij 20% van de celsterfte optreedt, werden geëxtrapoleerd uit de dosis/respons-curven van PSL tegenover de log E : T-ratio voor elk onderzocht bloedmonster. Immunofenotypering PBMC Subsets
PBMC-suspensies (5×105 cellen) werden in 3 buisjes gedaan, gewassen in PBS, gesponnen, supernatanten als gepipetteerd en celpellets geresuspendeerd in 100 μL PBS. PBMC’s in buis 1 werden gekleurd met CD3-PC5, CD4-PE, en CD8-FITC; buis 2: CD3-PC5, CD16-FITC, en CD56-PE; buis 3: CD14-PC5. De buisjes werden kort gedraaid, afgedekt en gedurende 15 minuten in ijs geïncubeerd, waarna de cellen tweemaal in koud PBS werden gewassen, geresuspendeerd tot 0,5 ml in PBS en het percentage PBMC-subgroepen bepaald door flowcytometrische analyse met een Beckman Coulter FC500 en CXP-software.
2.6. Clinical Trial Protocol
De duur van de studie was negen weken en begon na voltooiing van de bestralingstherapie. Het omvatte zes weken gebruik van het product, gevolgd door een spoeling van drie weken waarin het product niet werd gebruikt (afbeelding 1). De patiënten werden gescreend en kwamen in aanmerking voor het onderzoek na voltooiing van de chemotherapie en vóór het begin van de bestralingstherapie. De studie vereiste zes bezoeken aan de klinische onderzoekscentra. Het eerste studiebezoek vond plaats voor het begin van de bestralingstherapie, waarbij de uitgangswaarden van de labresultaten werden bepaald. In de eerste week na beëindiging van de bestraling, brachten de deelnemers hun tweede bezoek, waarbij de labresultaten werden bepaald en de negen weken durende studie werd gestart. Zes weken Tv-product werd verstrekt aan de deelnemer, die terugkeerde naar het onderzoekscentrum voor bezoek drie, vier en vijf, met een tussenpoos van twee weken voor laboratoriumonderzoek en beoordeling van de verdraagbaarheid van het product en bijwerkingen. Het laatste (zesde) bezoek vond plaats na negen weken, na drie weken productvrij te zijn geweest, voor een laatste laboratoriumtest en beoordeling van eventuele langdurige ongewenste voorvallen.
Phase I dosisescalatiestudieprotocol.
Het dosisescalatieprotocol omvatte cohorten van minimaal drie deelnemers die gedurende zes weken dagelijks Tv in verdeelde doses oraal innamen. Het eerste dosiscohort nam 3 gram/dag in twee verdeelde doses; het tweede cohort nam 6 gram/dag in twee verdeelde doses; het derde cohort nam 9 gram/dag in drie verdeelde doses. Drie gram per dag is de meest gebruikte dosis in de natuurgeneeskundige praktijk en in Japan wordt zelfs een dosis van 9 gram gebruikt. Het doel van de studie was om de maximaal getolereerde dosis (MTD) te bepalen die de veiligheid en verdraagbaarheid aantoonde (tabel 1).
|
|||||||||||||||||||||
3. Resultaten
3.1. Adverse Events
Uit de resultaten van deze dosisescalatiestudie bleek dat tot 9 gram Tv-preparaat per dag gedurende zes weken goed werd verdragen bij vrouwen met borstkanker in de setting van de nabestralingsbehandeling. Er waren negen ongewenste voorvallen; zeven mild, één matig en slechts één graad 3 ongewenst voorval, een angstaanval bij één deelneemster die waarschijnlijk geen verband hield met de studiemedicatie (Tabel 2). Andere gemelde milde bijwerkingen waren voorbijgaande hartverbranding, hartkloppingen, constipatie, pijn op de borst, koorts, bestralingsdermatitis en verkoudheid/griepsymptomen. Alle drie doses werden goed verdragen en de deelnemers hadden geen moeite met het driemaal daags doorslikken van maximaal 9 capsules. Opmerkelijk is dat er geen misselijkheid of maagklachten werden gemeld; twee bijwerkingen werden gemeld in eerdere klinische studies van andere Tv-extracten.
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3.2. Immune Response
Het rode bloedcel compartiment werd niet beïnvloed door zowel Radiation Therapy (RT) als Tv toediening. Absoluut aantal rode bloedcellen, hemoglobine en hematocriet waren normaal bij het eerste bezoek, de dag voor het begin van de RT, en bleven binnen de normale grenzen gedurende de rest van het onderzoek. Absolute aantallen witte bloedcellen en neutrofielen waren over het algemeen binnen de normale grenzen voor alle vrouwen zowel voor als na RT en gedurende de weken na RT terwijl zij Tv innamen (gegevens niet weergegeven). Het absolute aantal lymfocyten vertoonde echter een ander patroon dan de andere CBC subgroepen. Aangezien de toelatingscriteria identiek waren in de studies die sinds 2006 door onze centra werden uitgevoerd, combineerden wij, om de power te vergroten, de gegevens van onze observationele studie (𝑁=14) die aantoonde dat RT immuundeficiënties veroorzaakte bij vrouwen met stadium I-III borstkanker met onze huidige dosisescalatiestudie (𝑁=9). Voor het gecombineerde aantal van 23 vrouwen in beide studies met stadium I-III borstkanker na borstchirurgie en chemotherapie die vervolgens radiotherapie kregen, lagen de lymfocyten vóór RT binnen de normale grenzen maar daalden tot abnormaal lage niveaus na RT. Het gemiddelde aantal lymfocyten voor alle 23 proefpersonen vóór RT was 1,027±0,298 en daalde met 20% na RT tot 0,681±0,254, een verschil dat statistisch significant was . In de dosisescalatiestudie resulteerden de twee hogere orale doses (6 en 9 g) van Tv in een eerder herstel van het lymfocytenaantal (figuur 2). Het aantal lymfocyten herstelde zich geleidelijk voor de observatiegroep, maar het gemiddelde aantal lymfocyten bleef onder dat voor de 6 en 9 gm Tv-cohorten op 6 weken na RT. Vanwege het kleine aantal voor elk dosiscohort (𝑁=3) werd statistische significantie alleen gevonden tussen de observationele en 9 g-groepen op het tijdstip 2 weken na de bestraling. Bestralingstherapie verlaagde statistisch significant het absolute aantal lymfocyten bij vrouwen met stadium I-III borstkanker die chirurgie en chemotherapie hebben ondergaan (zie figuur 2).
De functionele activiteit van de natural killer cell was drastisch verminderd van voor tot na de therapie bij alle 23 borstkankerpatiënten die de eerste twee bezoeken aflegden van ofwel het observationele onderzoek (𝑁=14) ofwel het dosisescalatieonderzoek (𝑁=9). Figuur 3 laat zien dat de gemiddelde NK-celactiviteit 19,941±18,959 was vóór RT en daalde tot 9,872±13,454 na RT (𝑁=23). Deze afname was statistisch significant (𝑡(44)=2,077, 𝑃=0,043). Een trend in de richting van een verhoogde NK-celactiviteit werd waargenomen in het cohort met 6 g Tv-doses.
Bestralingstherapie leidde tot een statistisch significante afname van de NK-celfunctie, weergegeven door de LU, die wordt berekend door de doses 107 te delen door de LU20. De LU20 is het aantal effectorcellen (NK) dat nodig is om 20% specifieke lyses op de doelcellen (K562) te bereiken. Hoe kleiner de LU20, hoe effectiever de NK-cellen dus zijn. De interpretatie van dit resultaat kan moeilijk zijn geweest als gevolg van verschillende reacties van individuen op paddenstoelensuppletie. De trend van tijdelijke toename in NK-celactiviteit werd waargenomen in de 6 g doseringsgroep (zie Figuur 3).
We hebben ook de effecten van radiotherapie en Tv-toediening op T-, B-, en NK-celpopulaties gemeten bij de negen patiënten die de fase I dosisescalatiestudie voltooiden. Uit de WBC en flowcytometrie immunofenotypering gegevens, werd de absolute waarde (mm3) berekend. Radiotherapie had een niet-significant effect op CD4+ en CD8+ T cel, CD19+ B cel, en CD16+/56+ NK cel populaties. Omdat immunofenotypering niet werd uitgevoerd in de observationele studie, waren de aantallen samengestelde (pre- en post-bestraling) scores van degenen die deelnamen aan de dosis-escalatiestudie (𝑁=9). Het aantal CD8+ T cellen was niet statistisch verschillend voor en na de radiotherapie (figuur 4). Echter, toenames in CD8 + T-cellen en CD19 + B-cellen werden waargenomen in het perifere bloed voor Tv-suppletie groepen. De CD8+ T-celtellingen gedurende de 9 weken dosis escalatie studie waren verhoogd in het 9 gm Tv dosis cohort vergeleken met zowel de 3 g of 6 g groep. One-way ANOVA werd gebruikt om het algemene verschil tussen de doseringsgroepen over de behandelingsperiode (2-4-6 weken) te analyseren. Hieruit bleek een statistisch significante toename van de CD8+ cytotoxische T-cellen voor de 9 g-groep in vergelijking met zowel de 3 g- als de 6 g-groep (𝐹(2,6)=42,04, 𝑃=0,0003). Het verschil tussen de 3 g- en de 6 g-groep was niet significant (zie figuur 4).
Volgens de samengestelde scores van acht deelnemers aan de dosisescalatie veranderde het aantal B-cellen niet significant door de radiotherapie (figuur 5). Tv toediening was echter geassocieerd met een toename van CD19+ B cellen. One-way ANOVA werd gebruikt om het totale verschil tussen de doseringsgroepen over de behandelingsperiode (2-4-6 weken) te analyseren. Hieruit bleek een statistisch significante toename van CD19+ B-cellen voor de 6 g doseringsgroep vergeleken met de 3 g groep . Het verschil tussen de 3 g- en de 9 g-groep en ook tussen de 6 g- en de 9 g-groep was niet significant (zie figuur 5).
Met betrekking tot CD16+56+ NK-celtellingen werden geen significante veranderingen waargenomen als gevolg van hetzij radiotherapie of Tv-toediening (figuur 6). Aangezien de NK-celactiviteit zowel was verminderd door RT als verhoogd in het 6 gram Tv dosis cohort (Figuur 3), maar de NK-celpopulaties niet significant bleken te zijn beïnvloed door deze behandelingen, suggereren de gegevens dat de verhoging van de NK-celactiviteit niet het gevolg is van behandeling-geïnduceerde veranderingen in het aantal NK-cellen. De NK-celpopulatie werd noch door radiotherapie noch door orale doses Tv beïnvloed (zie figuur 6).
4. Discussie
De bevindingen van deze studie bevestigen de veiligheid van orale toediening van een Trametes versicolor (Tv)-preparaat in doses van 3, 6 en 9 gram, zonder ernstige bijwerkingen van deze therapie bij vrouwen na bestralingstherapie voor de behandeling van borstkanker. De huidige studie bevestigt ons eerdere verslag dat standaard radiotherapie van de borstkas voor borstkanker geen invloed heeft op het rode bloedcel compartiment of neutrofielen, maar wel specifieke immuundeficiënties induceert waaronder lymfopenie en gedeprimeerde NK cel functionele activiteit. NK celtherapieën zijn wereldwijd in opkomst als veelbelovende antikankerbehandelingen, gebruik makend van de snelle cytolytische werking van NK-effectoren en hun potentieel brede toepasbaarheid tegen een brede waaier van maligniteiten. Onze nieuwe bevinding is dat het verlies van NK celactiviteit onafhankelijk lijkt te zijn van het aantal NK cellen. Hier tonen we aan dat Tv de NK celactiviteit per NK cel vermindert. Hogere orale doses van Tv bij 6 en 9 gram/dag werden geassocieerd met een sneller herstel van lymfocyten en NK cel activiteit, evenals verhoogde aantallen CD8+T cellen en CD19+ B cellen. Er was geen duidelijk effect van Tv op het aantal CD 16+/56+ NK-cellen, alleen op hun functionele activiteit. Hoewel er een tendens is dat hogere Tv-doses een meer uitgesproken immunologische activiteit hebben, was deze fase I dosisescalatiestudie niet ontworpen om dosisafhankelijke veranderingen in immuunmerkers te evalueren. Voorlopige gegevens met deze kleine steekproeven van 3 borstkankerpatiënten per dosiscohortgroep die dosis-gerelateerde tendensen vertonen, leiden tot de testbare hypothese dat 6 gram Tv kan leiden tot een sneller immuunherstel na radiotherapie. De resultaten van deze fase I-studie rechtvaardigen en staan als platform waarop fase II gerandomiseerde gecontroleerde dosis-respons studies kunnen doorgaan.
Hoewel deze studie de veiligheid van Trametes versicolor aantoonde tot een dagelijkse dosis van 9 gram, was de dosis-escalatiestudie ontworpen om de maximaal getolereerde dosis (MDT) te beoordelen; daarom heeft deze studie de veiligheid en verdraagbaarheid bij de hoogste dosis niet bepaald. De rekrutering van vrouwen in een cohort van 12 gram en hoger werd niet bereikt vanwege meerdere beperkende factoren. Ten eerste moesten vrouwen aan zeer strenge criteria voldoen om voor de studie in aanmerking te komen en moesten zij in het kader van hun behandelingsprotocol chirurgie, chemotherapie en bestraling ondergaan. Momenteel krijgen veel vrouwen met borstkankerdiagnose geen drievoudige therapie. Veel vrouwen krijgen borstkanker in stadium 1 en ondergaan lumpectomie en bestraling, en als hun oncotype-score laag is, krijgen ze geen chemotherapie. Bovendien werden veel vrouwen gerekruteerd voor andere onderzoeksstudies en werden ze overstelpt met verzoeken om zich voor aanvullende studies in te schrijven. Het belangrijkste is dat we ontdekten dat vrouwen na het voltooien van een langdurig behandelingsregime van chemotherapie en bestraling terughoudend waren om deel te nemen aan een negen weken durend onderzoek dat zes extra bezoeken aan de universiteit vereiste.
De fase I-gegevens suggereren dat Tv een veilige immunotherapie is voor borstkankerpatiënten die radiotherapie-gerelateerde immuundefecten kan corrigeren. Gebaseerd op onze bevindingen kan Tv paddestoeltherapie oraal toegediend in de postradiotherapeutische setting het aantal lymfocyten en de NK-celtumoricidale activiteit verhogen. Terugval na de behandeling van primaire borstkanker kan in verband worden gebracht met defecten in het aangeboren en het adaptieve immuunsysteem. Onderzoek door ons centrum blijft erop wijzen dat Trametes versicolor een nieuwe immuuntherapie vertegenwoordigt met belangrijke toepassingen in de behandeling van kanker.
Ethische goedkeuring
Alle uitgevoerde experimenten voldoen aan de huidige wetten van de VS.
Conflict of Interests
De auteurs verklaren dat zij geen belangenconflict hebben.
Acknowledgments
Dit werk werd ondersteund door financiering door de National Institutes of Health/National Center for Complementary and Alternative Medicine (U19 AT 1998) en de Gateway for Cancer Research Grant no. G-04-002. De auteurs danken ook de redactionele steun van Rebekah Pratt van de afdeling gezinsgeneeskunde aan de U van MN en Daniel Strenge voor zijn bijdrage.