Effet crochet

Version avec excès d’anticorpsModifier

Illustration des effets d’un excès d’antigène et d’anticorps bloquants sur les tests immunologiques.

Dans un test d’agglutination, le sérum d’une personne (qui contient des anticorps) est ajouté à un tube à essai, qui contient un antigène particulier. Si les anticorps s’agglutinent avec l’antigène pour former des complexes immuns, le test est interprété comme positif. Toutefois, si le nombre d’anticorps pouvant se lier à l’antigène est trop élevé, les sites antigéniques sont recouverts d’anticorps et peu ou pas d’anticorps dirigés contre l’agent pathogène sont capables de se lier à plus d’une particule antigénique. Comme les anticorps ne forment pas de pont entre les antigènes, aucune agglutination ne se produit. Comme aucune agglutination ne se produit, le test est interprété comme négatif. Dans ce cas, le résultat est un faux négatif. La plage de concentrations d’anticorps relativement élevées dans laquelle aucune réaction ne se produit est appelée la prozone.

Version avec excès d’antigènesModifier

L’effet peut également se produire en raison d’un excès d’antigènes, lorsque les anticorps de capture et de détection sont saturés par la concentration élevée de l’analyte. Dans ce cas, aucun sandwich ne peut être formé par l’anticorps de capture, l’antigène et l’anticorps de détection. Dans ce cas, l’antigène libre est en compétition avec l’antigène capturé pour la liaison de l’anticorps de détection. L’addition séquentielle de l’antigène et de l’anticorps, associée à un lavage rigoureux, peut prévenir cet effet, tout comme l’augmentation de la concentration relative de l’anticorps par rapport à l’antigène, ce qui permet de médiatiser l’effet.

Illustration simple des effets de l’excès d’antigène et de la courbe dose-réponse.

Les exemples incluent des niveaux élevés d’anticorps anti-syphilis chez les patients VIH ou des niveaux élevés d’antigène cryptococcique conduisant à des tests faux négatifs dans des échantillons non dilués. Ce phénomène est également observé dans les tests sérologiques pour la brucellose. Le test sérologique se traduit principalement par une réaction de précipitation. L’anticorps qui ne réagit pas est appelé anticorps bloquant et empêche l’anticorps précipitant de se lier aux antigènes. Ainsi, la réaction de précipitation appropriée n’a pas lieu. Cependant, lorsque le sérum est dilué, l’anticorps bloquant l’est également et sa concentration diminue suffisamment pour que la réaction de précipitation adéquate se produise.