Hook-effekt

Version med overskydende antistofferRediger

Illustration af virkningerne af overskydende antigen og blokerende antistoffer på immunoassays.

I en agglutinationstest tilsættes en persons serum (som indeholder antistoffer) til et reagensglas, som indeholder et bestemt antigen. Hvis antistofferne agglutinerer med antigenet og danner immunkomplekser, tolkes testen som positiv. Hvis der imidlertid er for mange antistoffer til stede, som kan binde sig til antigenet, er de antigeniske steder belagt med antistoffer, og kun få eller ingen antistoffer rettet mod patogenet er i stand til at binde mere end én antigenisk partikel. Da antistofferne ikke danner bro mellem antigenerne, sker der ingen agglutination. Da der ikke forekommer agglutination, fortolkes testen som negativ. I dette tilfælde er resultatet et falsk negativt resultat. Det område med relativt høje antistofkoncentrationer, inden for hvilket der ikke forekommer nogen reaktion, kaldes prozonen.

Version med overskud af antigenerRediger

Effekten kan også opstå på grund af overskud af antigener, når både indfangnings- og detektionsantistofferne bliver mættet af den høje koncentration af analysanden. I dette tilfælde kan der ikke dannes en sandwich af det indfangende antistof, antigenet og detektionsantistoffet. I dette tilfælde konkurrerer det frie antigen med det indfangede antigen om at binde detektionsantistoffet. Sekventiel tilsætning af antigen og antistof, kombineret med stringent vask, kan forhindre denne effekt, ligesom en forøgelse af den relative koncentration af antistof i forhold til antigenet kan mindske denne effekt.

Simpel illustration af virkningerne af overskydende antigen og doseringsresponskurve.

Eksempler omfatter høje niveauer af syfilisantistoffer hos HIV-patienter eller høje niveauer af kryptokok-antigen, der fører til falsk negative test i ufortyndede prøver. Dette fænomen ses også i serologiske test for brucellose. Den serologiske test ses hovedsagelig ved udfældningsreaktionen. Det antistof, der ikke reagerer, er kendt som det blokerende antistof og forhindrer det udfældningsantistof i at binde sig til antigenerne. Dermed finder den korrekte udfældningsreaktion ikke sted. Når serummet fortyndes, fortyndes det blokerende antistof imidlertid også, og dets koncentration falder tilstrækkeligt meget til, at den korrekte udfældningsreaktion kan finde sted.