Studiul clinic de fază 1 al Trametes versicolor la femeile cu cancer de sân

Abstract

Introducere. S-a emis ipoteza că preparatele administrate pe cale orală din ciuperca Trametes versicolor (Tv) îmbunătățesc răspunsul imunitar la femeile cu cancer de sân după chimioterapie și radioterapie standard. Metode. S-a realizat un studiu de fază I, în două centre, cu escaladare a dozei, pentru a determina doza maximă tolerată a unui preparat de Tv atunci când este administrat zilnic în doze divizate timp de 6 săptămâni după terminarea recentă a radioterapiei. Au fost recrutate 11 participante și nouă femei au finalizat studiul. Fiecare cohortă a fost compusă din trei participante cărora li s-a administrat una dintre cele trei doze de Tv (3, 6 sau 9 grame). Datele imunitare au fost colectate înainte și după radioterapie, la 3 momente de timp în timpul tratamentului și după o spălare de 3 săptămâni. Rezultate. Au fost raportate nouă evenimente adverse (7 ușoare, 1 moderat și 1 sever), sugerând că Tv a fost bine tolerat. Rezultatele imunologice au indicat tendințe în (1) creșterea numărului de limfocite la 6 și 9 grame/zi; (2) creșterea activității funcționale a celulelor natural killer la 6 grame/zi; (3) creșteri legate de doză a celulelor T CD8+ și a celulelor B CD19+ , dar nu și a celulelor T CD4+ sau a celulelor NK CD16+56+. Concluzii. Aceste constatări arată că până la 9 grame/zi ale unui preparat de Tv este sigur și tolerabil la femeile cu cancer de sân în contextul tratamentului postprimar. Acest preparat Tv poate îmbunătăți statusul imunitar la pacientele cu cancer de sân imunocompromise după tratamentul oncologic primar standard.

1. Introducere

Trametes versicolor (Tv), cunoscută și sub numele de Coriolus versicolor și numită în mod obișnuit coada de curcan, este o specie de ciuperci din care s-au făcut preparate care au o lungă istorie de utilizare în medicina tradițională asiatică . Două fracțiuni de proteoglicani, polizaharidul-K (PSK) și polizaharidul-peptid (PSP), sunt extracte similare de apă caldă din Tv cu activitate anticancerigenă raportată . În Japonia, PSK este prescris pacienților cu cancer în mod obișnuit, atât în timpul cât și după radioterapie și chimioterapie . Este, de asemenea, o practică obișnuită în rândul multor medici naturopați (ND) și oncologi integrativi (MD) din SUA de a prescrie Tv întreg, liofilizat, pacienților cu cancer de sân . Se presupune că activitatea imunologică a Tv este principalul mecanism de bază responsabil pentru efectele sale antitumorale, precum și pentru impactul său asupra ratelor de supraviețuire . Mecanismul de acțiune al lui Trametes versicolor implică intensificarea răspunsurilor imune atât înnăscute, cât și adaptative, cel puțin în parte prin intermediul activității agoniste a receptorilor Toll-like 2 . Studiile preclinice pe animale și datele clinice preliminare susțin ipoteza că derivații de Tv pot fi benefici în tratamentul cancerelor atât cu receptori de estrogen negativi, cât și cu receptori de estrogen pozitivi, prin atenuarea efectelor imunologice depresive ale tratamentului și prin creșterea supraviețuirii fără boală prin îmbunătățirea supravegherii imunologice și depășirea toleranței la antigenul tumoral .

Înțelegerea modului în care factorii imunologici sunt influențați de tratamentele în cazul cancerului de sân sugerează domenii promițătoare pentru dezvoltarea unor terapii adjuvante care să consolideze răspunsurile imunitare antitumorale. Date recente demonstrează că anumite clase de medicamente chimioterapeutice determină moartea celulelor tumorale imunogene, ceea ce duce la îmbunătățirea prezentării încrucișate a antigenului și stimularea răspunsului imunitar antitumoral. Dovezile sugerează că celulele NK joacă un rol important în prevenirea atât a cancerului de sân precoce, cât și a celui metastatic . S-a raportat că unele paciente cu cancer de sân nu au o activitate a celulelor NK împotriva celulelor țintă K562 . Datele actuale sugerează că pacientele cu cancer de sân care au finalizat intervenția chirurgicală, chimioterapia și radioterapia prezintă un deficit imunologic . Andersen și colab. au raportat că nivelurile de stres la pacienții cu cancer de sân au prezis în mod semnificativ o liză mai scăzută a celulelor NK, precum și un răspuns proliferativ scăzut la limfocitele din sângele periferic . Studiul nostru anterior de observație efectuat a confirmat că limfopenia și activitatea scăzută a celulelor NK au fost prezente pe parcursul celor 6 săptămâni după terminarea radioterapiei .

Pentru a înțelege mai bine beneficiul potențial al Trametes versicolor la femeile cu cancer de sân, a fost necesar un studiu de escaladare a dozelor pentru a evalua siguranța și tolerabilitatea. În acest scop, o echipă multidisciplinară de la Universitatea din Minnesota și de la Universitatea Bastyr a finalizat un studiu de escaladare a dozei de fază 1 pentru a determina siguranța și doza maximă tolerată de Tv la femeile diagnosticate cu cancer de sân care au urmat un tratament standard pentru cancer de sân și care au fost dispuse să participe la un studiu de nouă săptămâni după radioterapie.

2. Metode

2.1. Escaladarea dozei studiului

A fost utilizat un design standard de fază 1, cu 3 subiecți pe nivel de doză până la atingerea MTD (doza maximă tolerată). Programul de escaladare a dozei pentru fiecare cohortă de Tv a fost de 3 gm (cea mai frecvent utilizată doză); 6 gm; 9 gm; 12 gm; 18 gm; 24 gm. Acest studiu a recrutat doar prin cohorta de nouă grame (𝑁=9).

2.2. Participante la studiu

Femeile cu vârste cuprinse între 21 și 75 de ani, diagnosticate cu cancer de sân în stadiul I, II sau III și care au fost supuse unei intervenții chirurgicale și chimioterapiei și erau pregătite să înceapă radioterapia, au fost înrolate în studiu după ce și-au dat consimțământul scris. Eligibilitatea a inclus, de asemenea, disponibilitatea de a avea o dietă consistentă pe toată durata studiului și de a evita sursele alimentare de ciuperci și alte produse pe bază de plante cu efecte imuno-modulatoare raportate în timpul radioterapiei și până la finalizarea studiului. Funcțiile hematologice, renale și hepatice de bază în limite normale au fost necesare înainte de înscrierea în studiu. Studiul a fost efectuat la Centrul de Cancer de la Universitatea din Minnesota din Minneapolis, Minnesota și la Universitatea Bastyr din Ken more, Washington. Studiul a fost aprobat de comitetele IRB de la Universitatea din Minnesota și de la Universitatea Bastyr. Între ianuarie 2008 și iunie 2010, unsprezece femei cu cancer de sân în stadiul I-III au îndeplinit criteriile restrânse pentru acest studiu, au consimțit să participe și au fost înrolate secvențial din cohorta cu doza cea mai mică. Trei participante din fiecare dintre cohortele de 3 gm, 6 gm și 9 gm au finalizat studiul. Două dintre participante s-au retras din studiu după a doua vizită din cauza dificultăților de transport la clinică. Caracteristicile celor nouă femei care au finalizat studiul au inclus un interval de vârstă cuprins între 38 și 68 de ani; șase ER negative și trei ER pozitive; trei cancere de sân în stadiul I; două în stadiul II și patru în stadiul III. Una dintre femeile care au finalizat studiul nu a fost supusă chimioterapiei înainte de radioterapie, iar o încălcare a protocolului de eligibilitate a fost raportată la IRB.

2.3. Măsurători ale rezultatelor

Obiectivul primar al studiului a fost de a evalua siguranța și tolerabilitatea lui Trametes versicolor la femeile cu cancer de sân în contextul postradioterapiei. Cele nouă participante la studiul de escaladare a dozei au fost monitorizate pentru evenimente adverse (AE) utilizând atât metode clinice, cât și de laborator și criterii de toxicitate care limitează doza (DLT) definite ca orice toxicitate de gradul 2 sau mai mare legată de tratament, așa cum a fost punctată utilizând Criteriile comune de terminologie pentru evenimente adverse V 3.0 (CTCAE) ale NCI (Common Terminology Criteria for Adverse Events V 3.0). Femeile au fost examinate săptămânal pentru evenimente adverse în timpul administrării produsului, fie la vizita lor clinică, fie prin screening telefonic între vizite. Obiectivul secundar a fost de a colecta date preliminare care au comparat datele de bază înainte și după terapia de radioterapie, măsurile imunologice în timpul tratamentului și după tratament, inclusiv numărătoarea completă a sângelui cu diferențial, activitatea celulelor natural killer (NK), testul celulelor reglatoare T, testul subsetului de celule T/B/NK, indicele fagocitar și nivelurile de citokine. Analiza statistică, inclusiv testele t cu eșantioane independente și ANOVA cu o singură cale cu comparație multiplă post-hoc Turkey, au fost efectuate utilizând GraphPad Prism, versiunea 5.04 (GraphPad Software, Inc., La Jolla, CA). Pentru a crește puterea și dimensiunea eșantionului, datele dintr-un studiu observațional (𝑁=14) efectuat de centrele noastre din 2006 au fost combinate cu studiul actual de escaladare a dozei (𝑁=9). Criteriile de eligibilitate au fost identice pentru ambele studii (𝑁=23).

2.4. Produs medicamentos din ciuperci

Pudra micelială liofilizată de Trametes versicolor a fost obținută de la Paul Stamets de la Fungi Perfecti, Inc., Olympia, WA și a fost încapsulată de Beehive Botanicals (Hayward, WI). Fiecare capsulă conținea 500 mg de produs. Aprobarea FDA IND (nr. 75,405) a fost obținută în 2007.

2.5. Convulsiile imune

2.5.1. Hemoleucograma completă cu diferențial

Testele clinice de laborator (hemogramă, chimie, teste serice de sarcină și sumar de urină) au fost efectuate la Departamentul de Medicină de Laborator al Universității din Washington pentru participanții recrutați la sediul Universității Bastyr și la Laboratorul de Diagnostic Fairview al Universității din Minnesota pentru participanții recrutați la sediul U din Minnesota.

2.5.2. Activitatea funcțională a celulelor Natural Killer

Subsetul de celule imune măsurat a inclus activitatea celulelor NK, testul celulelor reglatoare T, testul subsetului de celule T/B/NK, indicele fagocitar și nivelurile de citokine. Testele imunologice au fost efectuate în laboratorul Universității Bastyr pentru subiecții recrutați din ambele locații. Sângele recoltat la University of Minnesota General Clinical Research Center (GCRC) a fost expediat peste noapte la Bastyr University. Calitatea sângelui transportat de la Universitatea din Minnesota la Bastyr a fost evaluată după următoarele criterii. Pentru probele mai vechi de 48 de ore în momentul în care au ajuns la laboratorul Bastyr, limfocitele au fost izolate, iar viabilitatea celulară a fost determinată prin colorare cu albastru trypan. În cazul în care viabilitatea a fost mai mare de 80%, s-a efectuat testul. În cazul în care viabilitatea a fost mai mică de 80%, probele au fost respinse. Celulele mononucleare din sângele periferic (PBMC) au fost izolate prin gradient Ficoll-Hypaque (densitate = 1,070 g/mL), spălate de două ori în PBS și menținute în RPMI 1640, 10% FBS cu 2 mM L-Gln și penicilină-streptomicină (1000 U/mL; 1 mg/mL). Activitatea celulelor NK din aceste probe de PBMC, măsurată prin capacitatea de a distruge celulele țintă ale tumorii K562, a fost evaluată în triplu exemplar la un raport efector-țintă (E : T) de 50 : 1, 25 : 1 și 12,5 : 1, conform metodelor publicate . Celulele țintă au fost marcate cu perclorat de 3,3′-dioctadecyloxacarbocyanine perchlorate (DiOC18) și au fost cultivate împreună cu celule efectoare PBMC timp de patru ore. Pentru a determina moartea spontană a celulelor-țintă, a fost inclusă o probă de control numai cu celule K562. După incubare, s-a adăugat iodură de propidiu pentru a detecta celulele moarte. Procentul de celule țintă ucise a fost determinat prin scăderea procentului de liză spontană din procentul de liză specifică (PSL) a respectivelor E : T. Pentru a reprezenta activitatea standardizată a celulelor NK, unitățile litice au fost calculate cu ajutorul unui program software publicat și validat anterior, utilizând următorii parametri: țintă pe puț = 10 000; LU pe nr. de celule = 107; maximul curbei = 48; procent de liză = 20 . Valorile LU20, definite ca fiind valorile E : Raportul T la care se produce 20% din moartea celulelor țintă, au fost extrapolate din curbele doză-răspuns ale PSL în funcție de log E : T pentru fiecare probă de sânge analizată .

2.5.3. Imunofenotipare a subseturilor de PBMC

Suspensiile de PBMC (5×105 celule) au fost puse în 3 tuburi, spălate în PBS, centrifugate, supranatantele ca piratate și pelete de celule resuspendate în 100 μL PBS. PBMC din tubul 1 au fost colorate cu CD3-PC5, CD4-PE și CD8-FITC; tubul 2: CD3-PC5, CD16-FITC și CD56-PE; tubul 3: CD14-PC5. Tuburile au fost vortexate scurt, acoperite și incubate la gheață timp de 15 minute, după care celulele au fost spălate în PBS rece de două ori, resuspendate la 0,5 ml în PBS și procentul de subseturi PBMC determinat prin analiză citometrică în flux folosind un Beckman Coulter FC500 și software-ul CXP.

2.6. Protocolul studiului clinic

Durata studiului a fost de nouă săptămâni și a început după terminarea radioterapiei. Acesta a inclus șase săptămâni de utilizare a produsului, urmate de o perioadă de spălare de trei săptămâni fără utilizarea produsului (figura 1). Pacienții au fost selectați și stabiliți eligibili pentru studiu după finalizarea chimioterapiei și înainte de inițierea radioterapiei. Studiul a necesitat șase vizite la centrele de cercetare clinică. Prima vizită de studiu a avut loc înainte de inițierea radioterapiei, la care au fost prelevate analizele de referință. În prima săptămână de la terminarea radioterapiei, participanții au avut a doua vizită la care au fost prelevate analizele de laborator și a fost inițiat studiul de nouă săptămâni. Șase săptămâni de produs Tv au fost furnizate participantului, care a revenit la centrul de cercetare pentru a treia, a patra și a cincea vizită, la interval de două săptămâni, pentru prelevarea analizelor de laborator și evaluarea tolerabilității produsului și a evenimentelor adverse. Vizita finală (a șasea) a avut loc la nouă săptămâni, după trei săptămâni de întrerupere a produsului, pentru o ultimă prelevare de laborator și evaluarea oricăror evenimente adverse prelungite.

Protocolul de escaladare a dozei a implicat cohorte de minimum trei participanți care au ingerat pe cale orală Tv în doze divizate zilnic, timp de șase săptămâni. Prima cohortă a luat 3 grame/zi în două doze divizate; a doua cohortă a luat 6 grame/zi în două doze divizate; a treia cohortă a luat 9 grame/zi în trei doze divizate. Trei grame pe zi este cea mai frecvent utilizată doză în practica medicală naturistă, iar în Japonia se utilizează până la 9 grame. Scopul studiului a fost de a determina doza maximă tolerată (MTD) care a demonstrat siguranță și tolerabilitate (tabelul 1).

3. Rezultate

3.1. Reacții adverse

Constatările din acest studiu de escaladare a dozei au arătat că până la 9 grame/zi de preparat Tv a fost bine tolerat la femeile cu cancer de sân timp de șase săptămâni în cadrul tratamentului postradiație. Au existat nouă evenimente adverse; șapte ușoare, unul moderat și doar un singur eveniment advers de gradul 3, care a fost un atac de anxietate la o participantă, care probabil nu a avut legătură cu medicația studiată (tabelul 2). Alte evenimente adverse ușoare raportate au inclus arsuri cardiace tranzitorii, palpitații cardiace, constipație, dureri toracice, febră, dermatită de iradiere și simptome de răceală/gripală. Toate cele trei doze au fost bine tolerate, iar participanții nu au întâmpinat dificultăți în înghițirea a până la 9 capsule de trei ori pe zi. De remarcat este faptul că nu au fost raportate nici greață, nici tulburări gastrointestinale; cele două efecte secundare au fost raportate în studiile clinice anterioare ale altor extracte de Tv.

3.2. Răspuns imunitar

Compartimentul globulelor roșii nu a fost afectat atât de radioterapie (RT), cât și de administrarea de Tv. Numărul absolut de globule roșii, hemoglobina și hematocritul au fost normale la prima vizită, care a fost în ziua dinaintea începerii RT, și au continuat să se încadreze în limitele normale pe tot parcursul restului studiului. Numărul absolut de globule albe și numărul de neutrofile au fost, în general, în limitele normale pentru toate femeile, atât înainte și după RT, cât și în timpul săptămânilor de după RT, în timp ce acestea luau Tv (datele nu sunt prezentate). Cu toate acestea, numărul absolut de limfocite a dezvăluit un model diferit față de celelalte subseturi CBC. Deoarece criteriile de eligibilitate au fost identice în studiile efectuate de centrele noastre începând cu 2006, pentru a crește puterea, am combinat datele din studiul nostru observațional (𝑁=14) care a arătat că RT a produs defecte imunitare la femeile cu cancer de sân în stadiul I-III cu studiul nostru actual de escaladare a dozei (𝑁=9). Pentru numărul combinat de 23 de femei din ambele studii cu statut de cancer de sân în stadiul I-III după o intervenție chirurgicală la sân și chimioterapie care au primit apoi radioterapie, limfocitele au fost în limite normale înainte de RT, dar au scăzut la niveluri anormal de scăzute după RT. Numărul mediu de limfocite pentru toți cei 23 de subiecți înainte de RT a fost de 1,027±0,298 și a scăzut cu 20% după RT la 0,681±0,254, o diferență care a fost semnificativă din punct de vedere statistic . În studiul de escaladare a dozei, cele două doze orale mai mari (6 și 9 g) de Tv au dus la o recuperare mai rapidă a numărului de limfocite (figura 2). Numărul de limfocite s-a recuperat treptat pentru grupul de observare, dar numărul mediu de limfocite a rămas sub cel al cohortelor de 6 și 9 gm de Tv la 6 săptămâni după RT. Din cauza numărului mic pentru fiecare cohortă de doze (𝑁=3), s-a constatat o semnificație statistică doar între grupurile observațional și 9 g Tv la momentul 2 săptămâni postradioterapie. Radioterapia a scăzut semnificativ din punct de vedere statistic numărul absolut de limfocite la femeile cu cancer de sân în stadiul I-III care au finalizat intervenția chirurgicală și chimioterapia (a se vedea figura 2).

Activitatea funcțională a celulelor ucigașe naturale a fost redusă dramatic față de perioada pre- la post-TR pentru toate cele 23 de paciente cu cancer de sân care au efectuat primele două vizite fie ale studiului observațional (𝑁=14), fie ale studiului de escaladare a dozei (𝑁=9). Figura 3 arată că activitatea medie a celulelor NK a fost de 19,941±18,959 înainte de RT și a scăzut la 9,872±13,454 după RT (𝑁=23). Această scădere a fost semnificativă din punct de vedere statistic (𝑡(44)=2,077, 𝑃=0,043). O tendință de creștere a activității celulelor NK a fost observată în cohorta cu doza de 6 g Tv.

Radioterapia a scăzut semnificativ din punct de vedere statistic funcția celulelor NK reprezentată de LU, care se calculează prin 107 doze împărțite la LU20. LU20 reprezintă numărul de celule efectoare (NK) necesare pentru a obține 20% liză specifică pe celulele țintă (K562). Prin urmare, cu cât LU20 este mai mic, cu atât celulele NK sunt mai eficiente. Interpretarea acestui rezultat ar fi putut fi dificilă din cauza răspunsurilor diferențiate ale indivizilor la suplimentarea cu ciuperci. Tendința de creștere temporară a activității celulelor NK a fost observată în grupul cu doza de 6 g (a se vedea figura 3).

Am măsurat, de asemenea, efectele radioterapiei și ale administrării de Tv asupra populațiilor de celule T, B și NK la cei nouă pacienți care au finalizat studiul de escaladare a dozelor din faza I. Din datele de imunofenotipare WBC și de citometrie în flux, a fost calculată valoarea absolută (mm3). Radioterapia a avut un efect nesemnificativ asupra populațiilor de celule T CD4+ și CD8+, de celule B CD19+ și de celule NK CD16+/56+. Deoarece imunofenotiparea nu a fost efectuată în studiul observațional, numărul de scoruri compozite (pre- și postradiație) a fost al celor care au participat la studiul de escaladare a dozei (𝑁=9). Numărul de celule T CD8+ nu a fost diferit din punct de vedere statistic înainte și după radioterapie (Figura 4). Cu toate acestea, au fost observate creșteri ale numărului de celule T CD8+ și de celule B CD19+ în sângele periferic pentru grupurile cu suplimentarea cu Tv. Numărul de celule T CD8+ pe parcursul studiului de escaladare a dozei de 9 săptămâni a fost îmbunătățit în cohorta cu doza de 9 gm de Tv în comparație atât cu grupul de 3 g, cât și cu cel de 6 g. A fost utilizată ANOVA cu o singură cale pentru a analiza diferența globală dintre grupurile de doze pe parcursul perioadei de tratament (2-4-6 săptămâni). Aceasta a arătat creșterea semnificativă din punct de vedere statistic a celulelor T citotoxice CD8+ pentru grupul de 9 g în comparație atât cu grupul de 3 g, cât și cu cel de 6 g (𝐹(2,6)=42,04, 𝑃=0,0003). Diferența dintre grupurile de 3 g și 6 g nu a fost semnificativă (a se vedea figura 4).

Conform scorurilor compozite ale celor opt participanți la escaladarea dozei, radioterapia nu a modificat semnificativ numărul de celule B (figura 5). Cu toate acestea, administrarea de Tv a fost asociată cu o creștere a numărului de celule B CD19+. A fost utilizată ANOVA cu o singură cale pentru a analiza diferența globală dintre grupurile de doze pe parcursul perioadei de tratament (2-4-6 săptămâni). Aceasta a arătat creșterea semnificativă din punct de vedere statistic a numărului de celule B CD19+ pentru grupul cu doza de 6 g în comparație cu grupul de 3 g . Diferența dintre grupurile de 3 g și 9 g și, de asemenea, dintre grupurile de 6 g și 9 g nu a fost semnificativă (a se vedea figura 5).

În ceea ce privește numărul de celule NK CD16+56+, nu au fost observate modificări semnificative datorate nici radioterapiei, nici administrării de Tv (Figura 6). Deoarece activitatea celulelor NK a fost atât diminuată de RT, cât și crescută în cohorta cu doza de 6 grame de Tv (Figura 3), dar populațiile de celule NK nu au părut a fi influențate semnificativ de aceste tratamente, datele sugerează că intensificarea activității celulelor NK nu se datorează modificărilor induse de tratament în ceea ce privește numărul de celule NK. Populația de celule NK nu a fost afectată nici de radioterapie, nici de dozele orale de Tv (a se vedea figura 6).

4. Discuție

Constatările acestui studiu stabilesc siguranța administrării orale a unui preparat de Trametes versicolor (Tv) în doze de 3, 6 și 9 grame, fără evenimente adverse grave ale acestei terapii la femeile care urmează radioterapie pentru tratamentul cancerului de sân. Studiul actual confirmă raportul nostru anterior conform căruia radioterapia toracică standard pentru cancerul de sân nu afectează compartimentul globulelor roșii sau neutrofilele, dar induce deficiențe imunitare specifice, inclusiv limfopenie și activitate funcțională scăzută a celulelor NK . Terapiile cu celule NK sunt în curs de apariție la nivel mondial ca tratamente anticancerigene promițătoare, exploatând acțiunea citolitică rapidă a efectorilor NK și aplicabilitatea lor potențial largă împotriva unei game largi de tumori maligne . Noua noastră descoperire este că pierderea activității celulelor NK pare să fie independentă de numărul de celule NK. Aici, arătăm că RT reduce activitatea celulelor NK per celulă NK. Dozele orale mai mari de Tv, de 6 și 9 grame/zi, au fost asociate cu o recuperare mai rapidă a limfocitelor și a activității celulelor NK, precum și cu o creștere a numărului de celule CD8+T și de celule B CD19+. Nu a existat niciun efect evident al Tv asupra numărului de celule NK CD 16+/56+, ci doar asupra activității lor funcționale. Deși există o tendință ca dozele mai mari de Tv să aibă o activitate imunologică mai pronunțată, acest studiu de fază I de escaladare a dozelor nu a fost conceput pentru a evalua modificările dependente de doză ale markerilor imunitari. Datele preliminare cu aceste eșantioane mici de 3 pacienți cu cancer de sân per grup de cohortă de doze care arată tendințe legate de doză conduc la ipoteza testabilă că 6 grame de Tv pot duce la o recuperare imunitară mai rapidă după radioterapie. Rezultatele acestui studiu de fază I justifică și reprezintă platforma pe baza căreia se pot desfășura studiile de fază II, randomizate și controlate în funcție de doză.

Deși acest studiu a arătat siguranța Trametes versicolor la o doză zilnică de 9 grame, studiul de escaladare a dozei a fost conceput pentru a evalua doza maximă tolerată (MDT); prin urmare, acest studiu nu a determinat siguranța și tolerabilitatea la cea mai mare doză. Recrutarea femeilor într-o cohortă de 12 grame și mai mult nu a fost realizată din cauza mai multor factori limitativi. În primul rând, femeile trebuiau să îndeplinească criterii de eligibilitate foarte stricte pentru a se înscrie în studiu și să fie supuse unei intervenții chirurgicale, chimioterapiei și radioterapiei în protocolul lor de tratament. În prezent, multe femei cu un diagnostic de cancer de sân nu beneficiază de un regim de triplă terapie. Multe femei sunt diagnosticate cu cancer de sân în stadiul 1 și sunt supuse unei lumpectomii și radioterapii, iar dacă scorul lor oncologic este scăzut, nu primesc chimioterapie. În plus, multe femei au fost recrutate în alte studii de cercetare și au fost saturate de cereri de înscriere în studii suplimentare. Cel mai important, am constatat că femeile, după ce au finalizat un regim de tratament îndelungat de chimioterapie și radioterapie, au fost reticente în a participa la un studiu de nouă săptămâni care a necesitat șase vizite suplimentare la universitate.

Datele din faza I sugerează că Tv este o imunoterapie sigură pentru pacientele cu cancer de sân care poate corecta defectele imunitare legate de radioterapie. Pe baza constatărilor noastre, terapia cu ciuperci Tv administrată pe cale orală în contextul postradioterapiei poate spori numărul de limfocite și activitatea tumoricidă a celulelor NK. Recidiva după tratamentul primar al cancerului de sân poate fi legată de defecte ale sistemului imunitar înnăscut și adaptativ. Cercetările efectuate de centrul nostru continuă să indice faptul că Trametes versicolor reprezintă o nouă terapie imunitară cu aplicații semnificative în tratamentul cancerului.

Aprobare etică

Toate experimentele efectuate respectă legile în vigoare în SUA.

Conflict de interese

Autorii declară că nu au conflicte de interese.

Recunoștințe

Acestă lucrare a fost susținută prin finanțare de către National Institutes of Health/National Center for Complementary and Alternative Medicine (U19 AT 1998) și Gateway for Cancer Research Grant nr. G-04-002. Autorii mulțumesc, de asemenea, sprijinului de editare al lui Rebekah Pratt de la departamentul de medicină de familie de la U of MN și lui Daniel Strenge pentru contribuția sa.

.