Modularea procesului inflamator de către Arnica montana 6CH homeopatică: rolul variației individuale

Abstract

Au fost evaluate efectele Arnica montana 6cH asupra modulării individuale a cineticii inflamației acute la șobolani. Șobolanilor Wistar masculi adulți au fost inoculați cu 1% caragenan în talpa piciorului și au fost tratați cu Arnica montana 6cH, dexametazonă (4,0 mg/kg; control pozitiv) sau soluție hidroalcoolică 5% (control negativ), per os, fiecare 15 minute, între 30 și 180 de minute după inocularea iritantului. S-au efectuat proceduri histopatologice și imunohistochimice pentru a obține un panel de celule inflamatorii pozitive pentru CD3 (limfocite T), CD45RA (limfocite B), CD18 (beta 2 integrin), CD163 (proteina ED2), CD54 (ICAM-1) și MAC 387 (monocite și macrofage). Tratamentul statistic al datelor a inclus clasificarea a posteriori a animalelor din fiecare grup () în două subgrupuri care prezintă edem spontan precoce sau tardiv. Animalele care au prezentat edem precoce au fost mai puțin responsabile față de Arnica montana 6cH în ceea ce privește modificările hemodinamice. În schimb, șobolanii care au prezentat edem tardiv au prezentat un edem mai puțin intens (), un procent mai mic de degranulare a mastocitelor () și o creștere a diametrului vaselor limfatice (). Datele sugerează o ajustare calitativă individuală a evenimentelor vasculare inflamatorii de către Arnica montana 6cH.

1. Introducere

Una dintre cele mai discutate controverse privind eficacitatea medicamentelor homeopate este necesitatea identificării unei analogii simptomatice perfecte între pacient și patogenia medicamentului, adică necesitatea prescrierii individuale conform principiului similia. Această particularitate este una dintre cele mai dificile provocări ale cercetării științifice în acest domeniu, din cauza dificultății tehnice a demonstrării sale experimentale. Într-adevăr, puține studii experimentale despre se găsesc în literatura de specialitate . Astfel, demonstrarea experimentală a acestei particularități și înțelegerea mecanismelor sale pot fi instrumente utile pentru a rezolva controversele cronice cu privire la eficacitatea homeopatiei, adesea observate în studiile clinice . Recent, un studiu in vitro elegant a demonstrat importanța mecanismelor celulare reglatoare și adaptative în amploarea remediilor homeopatice care induc efecte citotoxice asupra celulelor canceroase .

Din 1997 până în 2008, am dezvoltat un studiu de cercetare pas cu pas despre efectele biologice ale medicamentului homeopatic Arnica montana, în special Arnica montana 6cH, folosind modele animale . Pe scurt, rezultatele obținute în aceste studii arată că Arnica montana 6cH este capabilă să moduleze procesul inflamator acut la șobolani, deoarece poate crește absorbția edemului limfatic și fluxul sanguin local, precum și să favorizeze matricea de migrare a celulelor polimorfonucleare. Toate aceste experimente sunt descrise cronologic în .

Arnica montana este o plantă aparținând familiei Compositae, care crește pe dealurile din Europa Centrală și de Est. Mai mulți compuși activi sunt identificați în frunzele, florile și rădăcinile sale, cum ar fi alcoolii, taninul, flavonoidele și lactonele sesquirterpenice, în special helenalina . Principala acțiune a helenalinei este inhibarea factorului de transcripție NFκβ, în mod similar cu steroizii corticoizi . Ingestia accidentală a plantei poate provoca vasodilatație, stază de sânge, hemoragie, edem și durere. Aceste efecte sunt principalele subiecte descrise în materia medicală Arnica montana . Din acest motiv, durerile provocate de traumatisme și absorbția edemelor sunt principalele indicații pentru utilizarea clinică și experimentală a preparatelor homeopate de Arnica montana . Recent, au fost propuse și alte utilizări ale Arnica montana puternic diluată, cum ar fi utilizarea agronomică a Arnica în potențele 3, 6 și 12cH pentru a îmbunătăți creșterea plantelor .

Scopul prezentului studiu a fost de a verifica două ipoteze: (a) modulația putativă a evenimentelor vasculare și celulare în inflamația acută de către Arnica, concentrându-se pe rata neutrofilelor, monocitelor, limfocitelor T și B prezente în focarul inflamator și pe intensitatea expresiei moleculelor de adeziune în țesutul conjunctiv inflamat, folosind tehnici imunohistochimice și histomorfometrice; (b) interferența putativă asupra randamentelor variațiilor individuale naturale ale cineticii inflamației.

2. Material și metode

2.1. Animale

S-au folosit șobolani Wistar adulți de sex masculin, cu o greutate cuprinsă între 250 și 300 g. Șobolanii au fost menținuți în cuști convenționale de laborator din polipropilenă (5 până la 7 animale pe cușcă), cu temperatură controlată (25 ± 3°C) și ciclu de lumină (lumini aprinse de la 06:00 AM la 06:00 PM). Apa și hrana au fost oferite ad libitum. Înainte de începerea experimentului, animalele au fost cântărite la întâmplare, separate și identificate în trei grupuri de câte 20 de șobolani fiecare.

2.2. Inducerea inflamației acute

Procesul inflamator acut a fost indus prin inocularea subcutanată de caragenan kappa 1% (SIGMA) diluat în soluție salină sterilă în talpa piciorului, a cărei grosime a fost măsurată în prealabil cu un micrometru (MYTUTOYO).

După 30 și 180 de minute, s-au făcut noi măsurători, pentru a evalua evoluția edemului înainte și după tratament în funcție de timp. Astfel, primele 30 de minute au măsurat formarea spontană a edemului, iar restul de 150 de minute au măsurat efectele medicamentului, deoarece tratamentele au fost efectuate după măsurarea de 30 de minute. La 180 de minute, animalele au fost eutanasiate prin tracțiune cervicală sub anestezie profundă, iar tampoanele picioarelor au fost recoltate și fixate în formaldehidă tamponată 10% timp de 24 de ore – maxim – înainte de a fi prelucrate prin tehnici histologice convenționale, inclusiv încorporarea în parafină, hematoxilină-eozină și colorarea cu albastru de toluidină. Aceleași blocuri de parafină au fost utilizate pentru efectuarea procedurilor imunohistochimice. Pentru fiecare tălpiță, s-a realizat o singură lamelă.

2.3. Grupuri și tratamente

Care grup de șobolani a fost tratat cu o substanță specifică, conform tabelului 1. Șobolanii tratați cu Arnica montana 6cH (experimental) și soluție hidroalcoolică 5% nesuccesată (martor negativ) obținută de la același furnizor au fost identificați prin coduri, în așa fel încât toate tratamentele și măsurătorile să se facă în orb. Aceste coduri au fost create de un tehnician de laborator care nu a participat la studiu și au fost păstrate într-o foaie sigilată până la analiza statistică, când au fost dezvăluite.

Șobolanii tratați cu dexametazonă (control pozitiv) au fost făcuți în mod deschis, din cauza caracteristicilor fizice ale formulării folosite; aceasta era destul de diferită de cele homeopate și, astfel, ușor de recunoscut. Tratamentul și analiza microscopică a probelor au fost efectuate de două persoane independente, întotdeauna în orb. Doza totală de dexametazonă utilizată pentru a produce efecte antiinflamatorii a fost de 4 mg/kg, conform standardelor definite anterior . Acest protocol fracționat a fost conceput pentru a reproduce o condiție clinică homeopatică obișnuită de tratament al inflamației acute și a fost, de asemenea, utilizat în studiile anterioare efectuate de grupul nostru . Dexametazona a fost aleasă ca grup de control pozitiv, deoarece mecanismul său de acțiune imită mecanismul helenalinei, principalul principiu activ al Arnica montana .

Arnica montana 6cH din comerț a fost preparată în soluție hidroalcoolică de 5% de către o farmacie certificată de Agenția Națională braziliană de reglementare pentru vigilență sanitară (ANVISA), Farmácia Sensitiva, São Paulo. Tehnicile utilizate la preparare au fost în conformitate cu Farmacopeea Homeopatică Braziliană, ediția a 2-a, 1997.

2.4. Analiza datelor

După prima reprezentare grafică a intensității edemului obținută în timpul perioadei de pretratament (de la zero la 30 de minute), datele au fost clasificate în ordine crescătoare cu ajutorul unui soft Excel 2003, astfel încât să fie posibilă împărțirea, pentru fiecare grup, a celor 10 șobolani (50%) care au prezentat spontan o intensitate mai mică a edemului și a celor 10 șobolani (50%) care au prezentat o intensitate mai mare a edemului. Astfel, s-au format două subgrupuri de 10 animale pentru fiecare grup experimental, caracterizând două subpopulații diferite de șobolani în funcție de modelul cinetic inflamator (tabelul 2). Întregul design experimental este explicat într-o organigramă (figura 7).

Din moment ce curba clasică a edemului indus de caragenan se întinde până la 6 ore după inoculare, alegerea ambelor momente (30 și 180 de minute) s-a bazat pe platoul său cunoscut . În plus, studiile anterioare privind efectele Arnica 6cH asupra edemului indus de caragenan nu mai arată efecte după această perioadă . Cinetica evaluării procesului inflamator după injectarea de caragenan este un model experimental clasic dezvoltat în anii ’70 . Astfel, este un criteriu de încredere care trebuie utilizat în acest caz.

După reprezentarea grafică a datelor (figurile 1(a) și 1(b)), ambele modele cinetice au devenit ușor de identificat: (a) animalele care au prezentat un edem mai puțin intens în primele 30 de minute de pretratament au avut vârful între 30 și 180 de minute (numit edem tardiv) și (b) cele care au prezentat un edem mai intens în primele 30 de minute au scăzut după această perioadă (numit edem timpuriu).

(a)

(b)

(c)

(d)

.
(a)
(b)
(c)
(d)

Figura 1

Oedem (mm) în diferite grupuri și subgrupuri. (a) Evoluția edemului în funcție de timp în subgrupul cu edem timpuriu; (b) evoluția edemului în funcție de timp în subgrupul cu edem tardiv; (c) intensitatea edemului la sfârșitul experimentului în subgrupul cu edem timpuriu; (d) intensitatea edemului la sfârșitul experimentului în subgrupul cu edem tardiv. ; ANOVA, Tuckey-Krammer, în raport cu martorul. Valorile reprezintă media ± deviația standard.

Toate rezultatele au fost comparate între cele șase subgrupuri. Această selecție a posteriori a fost făcută pentru a verifica rolul idiosincrasiei individuale în efectul Arnica, conform principiului similia, deoarece viteza de remitere a edemului este unul dintre cele mai cunoscute simptome ale Arnica montana descrise în materia medicală .

2.5. Analiză imunohistochimică

Toate lamelele au fost spălate cu soluție de alcool eter 1 : 1 timp de cinci minute, apoi au fost uscate cu o foaie de hârtie moale și tratate cu poli-L-lizină 1 : 10 (SIGMA). Apoi, felii de țesut de 5 microni încorporate în parafină au fost transferate pe suprafața lor folosind o baie histologică la 40°C. Apoi, feliile au fost deparafinate prin două băi în xilol absolut timp de 2 minute și două băi în alcool absolut timp de 3 minute. Lamele au fost, apoi, spălate în apă curentă de la robinet.

Pentru procedurile de imunohistochimie, o primă etapă pentru recuperarea antigenului a fost realizată prin tratarea termică a probelor. Lamele au fost introduse în interiorul unei băi tampon de citrat (SIGMA), pH = 6,0, conținând 0,5% tween 20 (DAKO), și au fost încălzite într-o oală electrică la 80°C (PANASONIC) timp de 20 de minute. După aceea, lamelele au fost spălate în PBS, pH = 7,2 (SIGMA), timp de 6 minute și uscate cu o hârtie absorbantă moale, iar proba de țesut a fost delimitată cu ajutorul unui creion adecvat (Pap-pen, AbCam).

Activitatea peroxidazei endogene a fost blocată prin incubarea țesuturilor într-o soluție de H2O2 3% diluată în metanol (ISOFAR), timp de 15 minute la temperatura camerei. Apoi, acestea au fost spălate în PBS (SIGMA) timp de 6 minute și tratate cu 2,5% ser normal de cal (VECTOR) timp de 20 de minute la 25°C, pentru blocarea situsurilor nespecifice de legare a proteinelor. Imediat după această etapă, țesuturile au fost tratate cu anticorpul primar (a se vedea diluțiile și specificațiile din tabelul 3) și au fost lăsate în repaus peste noapte la 4°C într-o cameră umedă. Toate diluțiile anticorpilor primari au fost realizate în 1% albumină serică bovină (BSA).

În ziua următoare, tăieturile au fost spălate în PBS (sigma) timp de 6 minute și tratate cu anticorpul secundar conjugat cu polimer-peroxidază (IMPRESS UNIVERSAL, VECTOR), la 25°C timp de 30 de minute. După o nouă spălare în PBS (6 minute), acestea au fost expuse la DAB (DAKO) timp de 3 secunde, spălate încă o dată în apă de la robinet, colorate cu hematoxilină Harris (01 minut) și montate.

2.6. Histomorfometrie

Pentru evaluarea procentului de degranulare a mastocitelor, au fost numărate două sute de celule pe lamă colorate prin metoda albastru de toluidină, folosind câmpuri contigue, diferențiindu-se cele degranulate de cele nedegranulate. Pentru evaluarea diametrului vaselor limfatice, cinci câmpuri alese la întâmplare au fost evaluate folosind un obiectiv de 200 x. Au fost realizate fotomicrografii ale fiecărui câmp (CANNON), iar procentul de suprafață a vaselor limfatice pe câmp a fost determinat cu ajutorul unui sistem digital de analiză a imaginilor (Image Tool 3.0). Diametrul vaselor limfatice poate fi considerat un bun parametru pentru a evalua absorbția edemului limfatic, în conformitate cu observațiile anterioare . Deoarece protocolul se referea la evenimente acute, ipoteza limfangiogenezei nu a fost luată în considerare.

Pentru markerii anti-CD45RA, CD3, CD18, CD163 și MAC 387, au fost observate zece câmpuri microscopice alese la întâmplare pentru fiecare lamelă, folosind obiectivul de imersie (magnitudine 1000 x). Acestea au inclus aproape toate țesuturile conjunctive vasculare subcutanate ale plăcuței, iar numărul de celule pozitive pe câmp a fost înregistrat. În cazul Anti-MAC 387, au fost luate în considerare doar celulele mononucleare pozitive. Lamele colorate cu hematoxilină-eozină au fost utilizate pentru a număra numărul de celule PMN pe câmp. În acest caz, recunoașterea celulelor s-a făcut numai pe criterii morfologice. Expresia CD163 este proporțională cu maturizarea macrofagelor, din acest motiv, aceste rezultate au fost exprimate ca raport între CD163/MAC 387 celule mononucleare pozitive pe câmp.

Pentru Anti-CD54, intensitatea pozitivității pe suprafața celulelor endoteliale a fost evaluată printr-un sistem de punctaj, variind de la 1 la 4. Cinci câmpuri alese la întâmplare au fost evaluate pe lamă, cu ajutorul obiectivului de imersie (magnitudine 1000 x), iar punctajele au fost realizate de doi observatori independenți, în orb, pentru a evita interpretarea subiectivă în analiză. Scorul final pentru fiecare diapozitiv a fost egal cu suma scorurilor parțiale. Criteriile de notare a scorurilor sunt reprezentate în tabelul 4.

Score Descriere Photomicrografie (obiectiv 10 x) 1 Marcare slabă și discontinuă a membranei, magnitudine 1000 x. 2 Marcare membranară regulată dar discontinuă, magnitudine 1000 x. 3 Marcare membranară puternică dar discontinuă, magnitudine 1000 x. 4 Marcare membranară puternică și continuă, magnitudine 1000 x.

Tabelul 4

Criterii de atribuire a scorului pentru diferite modele de marcare a celulelor endoteliale.

2.7. Analiza statistică

Testul Bartlett a fost utilizat în primul rând pentru a determina distribuția gaussiană a majorității punctelor de date. Apoi, s-a efectuat ANOVA/Tuckey-Krammer sau Kruskall-Wallis/Dunn, în funcție de rezultatele Bartlett. Evaluarea degranulării mastocitelor, în schimb, a fost evaluată prin test. Valorile de au fost considerate semnificative. Toate analizele statistice au fost efectuate cu ajutorul software-ului INSTAT 3.

În ceea ce privește edemul, s-a efectuat, de asemenea, o analiză statistică intragrup suplimentară, iar compararea intensității edemului între subgrupuri la 30 de minute (edem spontan) a evidențiat diferențe semnificative (Tuckey-Krammer, ), validând designul experimental propus.

2.8. Criterii bioetice

Protocolul a fost aprobat de Comitetul de Bioetică al Universidade Paulista (protocolul 011/07), în conformitate cu legea nr. 11.977/05 a statului São Paulo (Codul de protecție a animalelor din statul São Paulo, Brazilia). Această procedură este în conformitate cu Convenția europeană pentru protecția animalelor vertebrate utilizate în scopuri experimentale și în alte scopuri științifice și cu apendicele acesteia.

3. Rezultate

Aspectul histopatologic al tălpilor inflamate a evidențiat cadrul clasic al unei inflamații acute timpurii tipice: edem și infiltrat celular corespunzător la 2/3 din celulele PMN și 1/3 din celulele mononucleare. Cu toate acestea, având în vedere tratamentul statistic intragrup, a putut fi identificată existența unor modele diferite de evoluție a procesului inflamator în funcție de timp (tabelele 5 și 6). Astfel, a existat necesitatea de a sistematiza și clasifica aceste modele înainte de a analiza efectele Arnica montana 6cH.

Potrivit acestui fapt, un efect antiedematos semnificativ al Arnica montana 6cH a putut fi observat (ANOVA, ) doar în subgrupul de șobolani care au prezentat vârful de edem între 30 și 180 de minute după injectarea caragenanului în tălpicul piciorului (numit subgrupul târziu) (Figura 1) (Figura 1). De asemenea, analiza histomorfometrică a lamelelor colorate cu albastru de toluidină a arătat că subgrupul tardiv a prezentat, de asemenea, o degranulare mai puțin intensă a mastocitelor (, ) și un diametru mediu mai mare al vaselor limfatice (Kruskal-Wallis, ). În schimb, în subgrupul timpuriu (vârful edemului înainte de 30 de minute), a fost observată doar o creștere discretă, dar semnificativă a degranulării mastocitelor (, ), precum și creșterea scorurilor de exprimare a CD54 de către celulele endoteliale (Kruskal-Wallis, ) (tabelele 5 și 6, figurile 2 și 5).

(a)

(b)

(a)
(b)

.

Nicio diferență între grupuri și subgrupuri nu a fost observată în ceea ce privește migrația celulară, având în vedere celulele PMN și toți markerii utilizați în analiza imunohistochimică, inclusiv raportul dintre celulele CD 163+/MAC 387+ (tabelele 5 și 6, figurile 3, 4 și 5).

(a)

(b)

(a)
(b)

Figura 3

Histograma reprezentând numărul de celule MAC387 pozitive pe câmp, raportul CD163/MAC387 și numărul de celule polimorfonucleare pe câmp. (a) Subgrupul care a dezvoltat edem mai devreme; (b) subgrupul care a dezvoltat edem mai târziu. ANOVA, fără semnificație.

Figura 4

Histograma reprezentând numărul de celule CD3 și CD45R pozitive pe câmp. (a) Subgrupul care a dezvoltat edem mai devreme; (b) subgrupul care a dezvoltat edem mai târziu. ANOVA, fără semnificație.

(a)

(b)

(a)
(b)

Cu toate datele luate împreună, este posibil să se ilustreze concluzia principală printr-un grafic de dispersie a intensității edemului, în care pot fi observate diferitele tendințe între grupuri și subgrupuri, după tratamentul cu Arnica montana 6cH (Figura 6). Rețineți că animalele tratate cu Arnica și care prezintă edem tardiv (subgrupul tardiv) sunt deplasate la linia de bază în raport cu celelalte grupuri.

(a)

(b)

(a)
(b)

.

4. Discuție

Printre medicamentele homeopate care prezintă un interes deosebit în controlul inflamației , Arnica montana este unul dintre cele mai studiate . Cu toate acestea, în literatura științifică recentă despre homeopatie, există multe studii care caută să demonstreze eficacitatea efectului său, dar puține lucrări sunt dedicate înțelegerii modificărilor fiziopatologice din țesuturi după expunerea animalelor la aceste medicamente . Din acest punct de vedere a fost construită lucrarea de față; printr-un studiu detaliat al țesutului conjunctiv inflamat, având în vedere subseturile de celule care migrează către acesta, comportamentul vaselor și dinamica în funcție de timp a acestui proces sub acțiunea Arnica montana 6cH. Interesant este faptul că unele efecte observate sunt în concordanță cu rezultatele observate anterior, cum ar fi surparea vaselor limfatice și reducerea consecutivă a edemului .

Primele rezultate obținute aici indică un fapt interesant: analiza individuală a fiecărui subgrup arată importanța temporalității în efectul Arnica montana 6cH; animalele care au prezentat spontan un vârf târziu de edem (după 30 de minute de la injectarea iritantului) au fost mai sensibile la Arnica decât animalele care au prezentat un vârf timpuriu de edem (înainte de 30 de minute). În acest caz, edemul a fost chiar mai puțin intens decât în cazul grupurilor de control și al grupurilor tratate cu dexametazonă, iar acest fapt a fost concomitent cu reducerea semnificativă a degranulării mastocitelor și cu creșterea diametrului vaselor limfatice. Ambele fenomene ar putea contribui la reducerea edemului macroscopic și diferă de modelul dexametazonei, în care zona vaselor limfatice se reduce pasiv odată cu reducerea edemului, așa cum se arată în figura 2. Acest efect coroborează rezultatele observate anterior la .

Carrageenanul este o polizaharidă obținută din alga Chondrus crispus care are capacitatea de a induce o inflamație locală, fără efecte sistemice . Este cunoscut în mod clasic faptul că prostaglandinele sunt generate în timpul formării edemului după injectarea subcutanată de carrageenan de către neutrofilele migrate . Observarea efectului antiedematos al Arnica montana 6cH exclusiv la animalele care au prezentat tiparul tardiv al inflamației acute indică spre participarea unor mediatori chimici diferiți în căile de control, așa cum s-a demonstrat anterior la . În acest sens, histamina și prostaglandina, mediatori al căror vârf de acțiune are loc spre 15-30 de minute, modulează probabil acest proces în subgrupul de edem tardiv, în locul mediatorilor cu o acțiune foarte precoce, cum ar fi bradikinina, al cărei vârf este la aproximativ 10 minute după eliberare .

Modelurile experimentale concepute special pentru a demonstra importanța variației individuale în efectul medicamentului homeopat au fost deja descrise înainte , dar niciodată într-un protocol de inflamație. Individualitatea înseamnă specificitate în medicina homeopatică; în Rocha 2008 , doar șobolanii hiperactivi în mod natural au fost responsabili la tratamentul cu Rhus toxicodendron 200cH, în ceea ce privește comportamentul lor într-un dispozitiv în câmp deschis. Pe de altă parte, Soares 2007 a observat că numai șobolanii hipoactivi au fost responsabili față de Bryonia alba 200cH. Aceste studii complementare arată rezultate compatibile cu materia medicală respectivă. Comparația sistematică a celor două studii și a altora se observă în .

În ceea ce privește migrația celulară a subtipurilor de PMN și a subtipurilor de leucocite mononucleare, nu s-a observat nicio diferență între grupuri și subgrupuri, iar raportul CD163+/MAC387+ nu a relevat nicio modificare în dinamica maturării macrofagelor în focarul inflamator. CD 163 este o glicoproteină transmembranară de tip I, de 175 kD, cunoscută și sub numele de proteina ED2. Prezența sa a fost descrisă la suprafața macrofagelor mature, dar și într-o manieră mai puțin intensă în monocitele imature și în alte celule mononucleare la om. Expresia ED 2 este asociată cu metabolismul fierului și crește în fazele tardive ale inflamației, deoarece celulele pozitive au un rol modulator, eliberând IL autocrine10 . Prezența limfocitelor T și B în focarul inflamator ar putea fi legată de o anumită acțiune modulatoare , care a fost sugerată în studii anterioare despre Arnica montana 6cH , dar care nu a fost confirmată în cazul de față.

Expresia moleculelor de adeziune CD 54 (ICAM-1) a fost mai mare la animalele tratate cu Arnica montana 6cH care prezentau un model timpuriu de inflamație și a fost asociată cu un procent mai mare de mastocite degranulate în țesutul inflamat, dar nu și cu o migrație mai mare a leucocitelor. Deși nu s-a putut face nicio explicație mecanicistă în această etapă a studiului, se pare că rezultatele globale sunt împărțite în două modele principale: cele de reglare a dinamicii vasculare, evidente în subgrupul de edem tardiv, și cele de reglare a evenimentelor celulare, evidente în subgrupul de edem timpuriu, sugerând o ajustare calitativă dependentă de individ a evenimentelor inflamatorii vasculare și celulare de către Arnica montana 6cH, așa cum se vede în figura 6. Aceste modele diferite de variabilitate, care oscilează în funcție de starea anterioară a sistemului biologic testat, au fost descrise experimental în alte contexte experimentale cu diferite preparate homeopate .

În concluzie, cele două ipoteze propuse ar putea fi evidențiate: (a) nu există o modulare selectivă a migrației subseturilor de leucocite prin tratamentul cu Arnica montana 6cH, ci doar reglementări vasculare, în ceea ce privește absorbția limfatică, expresia CD54 și degranularea histaminei și (b) există o interferență clară a variației cinetice individuale în evenimentele vasculare după tratamentul cu Arnica montana 6cH.

Conflict de interese

Nu există niciun conflict de interese legat de această lucrare.

Recunoștințe

Autorii mulțumesc Programului CAPES-PROSUP și FAPESP Proc. nr. 2007/59661-5 pentru sprijinul financiar; Marcia Gutierrez de la Farmacia Sensitiva pentru furnizarea de medicamente; Fernanda Ferrari, Paulo Ailton Valdovato și Lika Osugui pentru sprijinul tehnic.