Efectele probiotice ale bacteriilor acidului lactic

Rezumat

Probioticele sunt definite ca fiind „microorganisme vii care, atunci când sunt administrate în cantități adecvate, conferă un beneficiu pentru sănătatea gazdei”. Unul dintre cele mai semnificative grupuri de organisme probiotice este reprezentat de bacteriile lactice, utilizate în mod obișnuit în produsele lactate fermentate. Aceste bacterii au o istorie îndelungată de utilizare sigură în alimente. Există o recrudescență a interesului pentru aceste specii, deoarece cercetările încep să dezvăluie numeroasele beneficii posibile pentru sănătate asociate cu bacteriile lactice.

Acțiunile bacteriilor lactice sunt specifice speciei și tulpinii și depind de existența unui număr suficient de bacterii în intestine. Dificultatea identificării și clasificării tulpinilor a complicat cercetarea, deoarece beneficiile pot aparține doar anumitor tulpini.

Cu toate acestea, bacteriile lactice au o serie de beneficii bine stabilite. Ele pot îmbunătăți digestia lactozei, joacă un rol în prevenirea și tratarea diareei și acționează asupra sistemului imunitar, ajutând organismul să reziste și să lupte împotriva infecțiilor.

Este nevoie de mai multe lucrări pentru a confirma rolul pe care bacteriile lactice l-ar putea juca în prevenirea sau încetinirea creșterii cancerului de colon, în scăderea nivelului de colesterol, în prevenirea infecțiilor urogenitale, în ameliorarea constipației și în tratarea alergiilor alimentare.

Probioticele…un caz special

În încercarea de a descoperi modul în care alimentele pot îmbunătăți sănătatea sau preveni bolile cronice, cercetătorii au dat peste o altă gamă de componente din alimente, în afară de nutrienți. Acest domeniu de informații în creștere a dus la apariția unei noi etichete pentru alimentele care au beneficii suplimentare: alimente funcționale.

Alimentele funcționale conțin niveluri semnificative de componente biologic active care oferă beneficii pentru sănătate dincolo de nutriția de bază. Alți termeni pentru alimentele funcționale includ nutraceutice, alimente farmaceutice, alimente de designer, alimente cu stare de spirit…Câteva exemple de alimente funcționale sunt:

• ovăzul și orzul, care conțin beta-glucani și pot îmbunătăți controlul zahărului din sânge și pot reduce colesterolul din sânge.
• roșii gătite, care conțin licopenul fitochimic și pot reduce riscul de cancer de prostată și de col uterin.
• yogurtul și alte produse lactate cultivate, care conțin bacterii lactice și pot îmbunătăți funcția sistemului gastrointestinal. De fapt, beneficiile potențiale ale iaurtului și ale altor alimente care conțin organisme vii sunt atât de numeroase încât acestea formează un subgrup special de alimente funcționale: alimentele probiotice.

Efectele probiotice ale bacteriilor lactice

Cu mult timp înainte ca termenul „probiotic” să fie inventat, Elie Metchnikoff, imunologul laureat al premiului Nobel, a sugerat în 1908 că motivul pentru care țăranii din Balcani au trăit o viață lungă a fost acela că au băut lapte fermentat cu Lactobacillus bulgaricus și Streptococcus thermophilus (1). El a sugerat că aceste bacterii ar suprima „fermentația putrefactivă”, ceea ce ar duce la o sănătate și o longevitate mai bune. Ideile sale au generat un mare interes pentru rolul pe care microflora intestinală îl joacă în sănătate, un interes care persistă până în prezent.

Astăzi, multe beneficii potențiale pentru sănătate ale bacteriilor probiotice sunt în curs de investigare, de la îmbunătățirea echilibrului microbian din intestin până la îmbunătățirea funcției sistemului imunitar.

Probioticele sunt definite ca fiind „microorganisme vii care, atunci când sunt administrate în cantități adecvate, conferă un beneficiu pentru sănătate gazdei” (2). Unul dintre cele mai semnificative grupuri de organisme probiotice sunt bacteriile acidului lactic.

Ce sunt bacteriile acidului lactic?

Bacteriile acidului lactic produc acid lactic ca produs principal. Ele sunt răspândite în natură – în sol, legume, carne, lapte și în corpul uman. Multe dintre ele sunt folosite în produsele lactate fermentate. Streptococcus thermophilus (S. thermophilus) și Lactobacillus bulgaricus (L. bulgaricus) sunt cele două bacterii necesare pentru fabricarea iaurtului. Multe iaurturi comerciale din Canada conțin, de asemenea, Lactobacillus acidophilus (L. acidophilus) și Bifidobacterium bifidus (B. bifidus). Lactobacillus casei (L. casei) se găsește frecvent în brânzeturi. Toate aceste specii de bacterii sunt acceptate de Canada ca fiind probiotice (3).

Aceste specii pot fi clasificate în continuare în subspecii, variante și tulpini. Dificultatea identificării și clasificării tulpinilor a complicat cercetările, deoarece beneficiile pot aparține doar anumitor tulpini.

Evoluția unui nume…

Lactobacillus GG (LGG) a fost inițial clasificată ca L. acidophilus tulpina GG, denumită după descoperitorii Gorbach și Goldin. A evoluat până la a fi numit L. casei subspecie rhamnosum, sau L. rhamnosum. Mai recent, s-a propus ca aceasta să fie reclasificată ca specie unică: L. zeae. Este în continuare numit în mod obișnuit Lactobacillus GG.

Din acest motiv, cercetările efectuate atunci când LGG a fost clasificat ca L. acidophilus ar fi atribuit orice beneficii lui acidophilus. Acest lucru nu ar mai fi cazul.

Ce face ca o bacterie să fie probiotică?

Pentru ca bacteriile să exercite vreun efect probiotic, ele trebuie să fie capabile să supraviețuiască atât acizilor din stomac (cu un pH de până la 1,5), cât și acizilor biliari (cu un pH de până la 2). Acest lucru este valabil pentru majoritatea lactobacililor.

În al doilea rând, bacteriile trebuie să ajungă în intestine în cantități suficiente pentru a avea un efect. Cantitatea necesară depinde de tulpină și de beneficiul pentru sănătate care este studiat. Nivelul minim eficient pentru bacterii individuale și beneficii specifice pentru sănătate este în mod activ în curs de cercetare.

Bacteriile pot avea nevoie să adere la peretele intestinului (adică să se „implanteze”) și să se colonizeze pentru ca să existe un efect. Sherwood Gorbach, unul dintre descoperitorii Lactobacillus GG, afirmă: „Cercetările noastre din ultimii 20 de ani au stabilit fără îndoială că implantarea în intestin este caracteristica critică pe care o tulpină trebuie să o posede pentru a influența mediul intestinal…”. (4). Cu toate acestea, alții susțin că tranzitul continuu (de exemplu, consumul continuu al unui aliment probiotic) este o alternativă la implantarea și colonizarea organismului (5).

În cele din urmă, bacteria trebuie să prezinte unele efecte benefice asupra sănătății umane. Unele exemple de efecte benefice aflate în curs de investigare includ ameliorarea intoleranței la lactoză, prevenirea și tratamentul diareei, menținerea unei flore intestinale normale, antagonismul împotriva agenților patogeni, stimularea sistemului imunitar, activitatea anticancerigenă și reducerea nivelului de colesterol seric.

Efectele probioticelor: care sunt dovezile?

Beneficii stabilite

Digestia lactozei

Este bine cunoscut faptul că prezența bacteriilor lactice, în special L bulgaricus și S thermophilus în iaurt, îmbunătățește digestia lactozei (6). Se pare că pereții celulari ai bacteriilor trebuie să fie intacți (așa cum se întâmplă atunci când bacteriile sunt vii) pentru ca efectul să se producă (7). Printre mecanismele posibile pentru îmbunătățirea digestiei lactozei se numără:

• Activitatea lactazei din bacterii face de fapt munca de digestie a lactozei din produs odată ce ajunge în intestin (8).
• Timp de tranzit mai lent al iaurtului poate permite mai mult timp pentru ca lactaza intestinală reziduală și bacteriile din iaurt să digere lactoza (9).
• Ceva din iaurt poate inhiba fermentarea lactozei și astfel să reducă simptomele (9).

Laptele dulce acidofil (lapte cu L. acidophilus care nu a fost lăsat să fermenteze) nu pare să amelioreze simptomele maldigestiei lactozei. Deși unele lucrări arată un efect mic, majoritatea lucrărilor nu arată niciun efect (10).

Diarreea

Bacteriile acidului lactic pot fi utile în prevenirea și scurtarea duratei mai multor tipuri de diaree (11).

O serie de studii bine concepute au observat că produsele lactate fermentate previn sau tratează eficient diareea infantilă (12). Efectele au fost observate cu L. casei și B. bifidum.

Câteva studii mici arată că bacteriile lactice pot reduce incidența diareei legate de antibiotice (13). Acest lucru sugerează un rol pentru bacteriile lactice la pacienții imunodeprimați care utilizează în mod obișnuit antibiotice (14).

Câteva studii privind diareea călătorului au demonstrat eficacitatea bacteriilor lactice în scăderea incidenței diareei (15, 16).

Bacteriile acidului lactic pot reduce probabil diareea în mai multe moduri:

• Bacteriile acidului lactic concurează cu agenții patogeni pentru nutrienți și spațiu în intestine (13).
• Produsele secundare ale metabolismului pot avea un efect direct împotriva agenților patogeni. De exemplu, lucrările in vitro arată că L. casei, L. acidophilus și L. bulgaricus pot produce agenți antimicrobieni, cum ar fi acidofilina și bulgaricanul, care pot inhiba creșterea agenților patogeni (13).
• Bacteriile acidului lactic pot fi eficiente împotriva diareei datorită efectelor asupra sistemului imunitar.

Efecte asupra sistemului imunitar

Bacteriile acidului lactic îmbunătățesc funcția sistemului imunitar la nivel intestinal și sistemic. La om, s-a demonstrat că bacteriile acidului lactic cresc:

• Limfocitele B sau celulele B, care recunosc materiile străine (17),
• activitatea fagocitară, ajutând la distrugerea materiilor străine (18),
• Celulele secretoare de IgA, IgG și IgM și nivelul seric al IgA, care ar crește activitatea anticorpilor (19), și
• Nivelurile de interferonγ, care ajută globulele albe să lupte împotriva bolilor (20).

Un alt mod în care funcționează apărarea organismului este reprezentat de bariera oferită de straturile de mucus ale intestinului. Mucoasa asigură o barieră fizică, împiedicând, de obicei, trecerea substanțelor străine prin intestin. De asemenea, în mucoasa intestinală se găsește o mare varietate de celule imunitare. Acest lucru permite intestinului să interacționeze cu sistemul imunitar. Bacteriile lactice pot stimula activitatea imunitară în mucoasa intestinală (21).

În afecțiuni precum alergia sau sindromul de auto-bucurie (fermentație intestinală anormală care duce la creșterea nivelului de etanol din sânge), permeabilitatea intestinului subțire poate crește, permițând moleculelor de proteine nedigerate să treacă (22). S-a demonstrat că Lactobacillus GG inversează permeabilitatea intestinală (23).

Bacteriile probiotice ar putea juca un rol în tratarea alergiilor alimentare. Acest lucru a fost demonstrat într-un experiment cu sugari despre care se știa că au excema din cauza unei alergii la laptele de vacă (24). Sugarii din grupul experimental au primit o formulă de zer hidrolizat îmbogățită cu LGG, în timp ce cei din grupul de control au primit doar o formulă de zer. Starea pielii sugarilor cărora li s-a administrat LGG s-a îmbunătățit semnificativ în comparație cu cea a grupului de control. În plus, grupul experimental a avut niveluri îmbunătățite ale factorilor asociați cu inflamația intestinului.

Beneficii potențiale

Efecte hipocolesterolemice

Câteva tulpini de L. acidophilus pot absorbi colesterolul în prezența bilei (25). Alte cercetări in vitro arată că colesterolul poate precipita cu sărurile biliare libere în prezența L. acidophilus, în special într-un mediu acid (26). Astfel, s-a emis ipoteza că una sau ambele acțiuni ar avea loc in vivo și ar contribui la scăderea colesterolului seric la om.

Diverse studii cu produse lactate fermentate au arătat fie că nu au avut niciun efect, fie o reducere a nivelului de colesterol. În concluzie, nu există încă dovezi bune pentru a confirma un efect de scădere a colesterolului al produselor lactate fermentate.

Constipație

Produsele lactate fermentate cu unele tulpini de L. acidophilus și bifidobacterii scurtează timpul de tranzit intestinal. Acest efect poate fi util pentru cei care suferă de constipație, cum ar fi persoanele în vârstă (27). Este necesar un studiu bine controlat la om pentru a confirma acest lucru.

Cancer de colon

Câteva bacterii lactice pot ajuta la prevenirea inițierii cancerului de colon. S-a demonstrat, de asemenea, că bacteriile lactice încetinesc creșterea cancerelor experimentale, deși rezultatele nu sunt pe termen lung.

Se pare că bacteriile lactice pot reduce nivelul enzimelor de colon care transformă procarcinogenii în agenți cancerigeni. Mai exact, bacteriile lactice pot reduce nivelurile enzimelor β-glucuronidază, nitroreductază și azoreductază (28). Bacteriile lactice pot fi, de asemenea, implicate în reducerea directă a procarcinogenilor, de exemplu, prin absorbția nitriților și prin reducerea nivelurilor de săruri biliare secundare (28). În majoritatea rapoartelor, aceste efecte apar doar în perioada de timp în care bacteriile sunt consumate (28).

S-au observat modificări ale activității enzimatice la om cu L. acidophilus și B. bifidum (29), precum și cu LGG (30). Studiile pe animale arată mai puține tumori la cei expuși la un carcinogen, în prezența LGG, în comparație cu animalele expuse la carcinogen fără a beneficia de LGG (31). La om, rapoartele epidemiologice arată că populațiile care consumă produse lactate fermentate prezintă un risc mai mic de cancer de colon (32). Cu toate acestea, nu există încă o relație clară între consumul de bacterii lactice și prevenirea cancerului.

Infecții urogenitale

Bacteriile lactice pot reduce infecțiile vaginale candidoase. acest lucru este încă speculativ, însă ar fi o cercetare care ar merita să fie urmărită. Un mic studiu a arătat că femeile cu candidoză vaginală recurentă care au consumat zilnic 8 oz. de iaurt care conținea L acidophilus au avut mai puține apariții de candidoză vaginală decât în timpul perioadei de control în care nu au consumat nici un iaurt (33). Acesta a fost un studiu încrucișat care a început cu 21 de femei. Opt dintre cele care au început în grupul de tratament au refuzat să treacă la faza de control, deoarece au avut mult mai puține infecții. astfel, doar 13 femei au finalizat studiul.

Ulcer

Bacteriile acidului lactic se arată promițătoare împotriva ulcerului gastric. Lucrările cu o tulpină specifică de L. acidophilus au demonstrat că L. acidophilus concurează eficient (in vitro ) împotriva Heliobacter pylori pentru locurile de atașare, limitând numărul de H. pylori care se pot atașa la peretele celular (34). Infecția cu H. pylori este un factor de risc pentru ulcerul gastric. Un mic studiu efectuat pe pacienți cu ulcere a arătat că Bifidobacteria bifidum a favorizat vindecarea ulcerelor gastrice la 50% dintre pacienți și eradicarea H. pylori din mucoase la 30% dintre pacienți (35).

Câteva alimente probiotice: ce bacterii conțin?

Yogurtul conține întotdeauna L. bulgaricus și S. bulgaricus. thermophilus, și poate conține L. acidophilus și bifidobacterii.

Laptele acidophilus conține Lactobacillus acidophilus.

Kefirul conține numeroase bacterii lactice, inclusiv Lactococcus lactis, Lactococcus cremoris, Lactobacillus kefir, Lactobacillus casei, Lactobacillus acidophilus și specii de Leuconostoc. De asemenea, conține drojdii.

Este important de reținut că beneficiile probiotice necesită un număr minim de bacterii pentru a obține beneficii. Deși nivelurile minime nu sunt încă stabilite, dozele de cercetare sunt de obicei de ordinul a 1 miliard de celule. Nu toate produsele fermentate vor conține suficiente microorganisme active. Cu cât produsul este mai proaspăt, cu atât mai multe organisme vor fi active.

Siguranța probioticelor

Bacteriile acidului lactic utilizate în mod tradițional în produsele lactate fermentate au o istorie îndelungată de utilizare sigură. Cu toate acestea, pe măsură ce crește interesul pentru utilizarea de noi tulpini, testele de siguranță vor deveni importante.

Lactobacillus GG a fost supus unor teste extinse pentru siguranța și eficacitatea utilizării sale. A fost aprobat în 1992 de către Comitetul consultativ pentru alimente noi din Regatul Unit și în 1996 de către autoritățile japoneze pentru alimente funcționale (36).

În Canada, probioticele sunt considerate un ingredient alimentar atunci când sunt adăugate în alimente și sunt reglementate de către Health Canada în temeiul Legii privind alimentele și medicamentele. Agenția canadiană de inspecție alimentară (CFIA) este responsabilă de aplicarea Legii privind alimentele și medicamentele, în timp ce producătorii sunt responsabili pentru siguranța alimentelor pe care le produc și le vând. Health Canada a elaborat un document de orientare care descrie modul în care pot fi făcute mențiunile de sănătate referitoare la probiotice (37).

Câteva bacterii probiotice și ce fac
Bacterii	Efecte probiotice	Proprietăți	Utilizare
Lactobacillus acidophilus . (6 specii majore)	poate combate infecțiile intestinale reduce timpul de tranzit intestinal poate preveni cancerul de colon poate fi hipocolesterolemiant O singură tulpină de L. acidophilus nu va realiza, probabil, toate presupusele beneficii.	Supraviețuiește bine tranzitului gastrointestinal. (Capacitatea de a supraviețui variază de la o tulpină la alta.) Adherență demonstrată in vitro, dar nu a fost încă demonstrată in vivo. Crește lent în produsele fermentate; nu supraviețuiește bine în produsele fermentate.	Utilizat în laptele acidofil și în kefir; poate fi utilizat în iaurt.
Lactobacillus GG	previne creșterea agenților patogeni întârzie dezvoltarea tumorilor previne diareea călătorului, diareea asociată cu antibiotice și diareea sugarului	Implantează și colonizează tractul intestinal. Cu toate acestea, colonizarea nu este permanentă. Cercetările arată că bacteriile probiotice trebuie consumate de câteva ori pe săptămână pentru a-și menține efectul asupra florei intestinale.	În Europa sunt disponibile unele produse lactate fermentate noi care utilizează LGG. Nivelurile minime necesare pentru colonizare sunt: 108 celule în lapte, 109 celule în lapte fermentat sau tablete enterice, 1010 celule în capsule de gelatină.
Lactobacillus casei	altereză activitatea microflorei intestinale reduce incidența și durata diareei poate crește nivelul de imunoglobuline, γ-interferon și activitatea fagocitară diminuează activitatea enzimelor legate de riscul de cancer de colon	Câteva tulpini supraviețuiesc tranzitului intestinal. Nu colonizează.	Utilizate în kefir și în multe brânzeturi, inclusiv parmezan și cheddar; de asemenea, utilizate în unele produse noi asemănătoare iaurtului.
Bifidobacterii (29 tulpini)	alteră compoziția florei intestinale, posibil prin restricționarea creșterii agenților patogeni reduce incidența și durata diareei reduce timpul de tranzit intestinal poate reduce cancerul de colon crește producția de imunoglobuline secretorii	Câteva tulpini de Bifidobacterii supraviețuiesc bine tranzitului intestinal, dar nu este clar dacă se implantează. Produc atât acid lactic, cât și acid acetic.	Pot fi folosite în iaurt.

1. Metchnikoff E. 1908. Prelungirea vieții, ediția I. G.P. Putnam’s Sons, NY.

2. Hill C. et al. 2014. Document de consens al experților: Declarația de consens a Asociației Științifice Internaționale pentru Probiotice și Prebiotice privind domeniul de aplicare și utilizarea adecvată a termenului probiotic. Nature Reviews Gastroenterology & Hepatology 11:506-514. doi:10.1038/nrgastro.2014.66

3. Health Canada. 2009. Afirmații acceptate cu privire la natura microorganismelor probiotice din alimente. http://www.hc-sc.gc.ca/fn-an/label-etiquet/claims-reclam/probiotics_claims-allegations_probiotiques-eng.php

4. Gorbach S.L. 1996. Descoperirea Lactobacillus GG. Nutrition Today Vol. 31(6) (suppl.):2S-4S.

5. Saloff-Coste C.J. 1997. Lactobacillus acidophilus. Danone World Newsletter No. 13.

6. Martini M.C., D. Kukielka, D. Savaiano. 1991. Digestia lactozei din iaurt: influența unei mese și a lactozei suplimentare. Am. J. Clin. Nutr. 53:1253-8.

7. Kuhn C., A. Titze, C.A. Lorenz. 1996. Sunt microorganismele viabile esențiale pentru intensificarea hidrolizei intestinale a lactozei de către β-galactosidaza produselor lactate fermentate? IDF Nutrition Newsletter 5:38.

8. Martini M.C., G.L. Bollweg, M.D. Levitt, et al. 1987. Digestia lactozei de către iaurtul β-galactosidază: influența pH-ului și a integrității celulelor microbiene. Am. J. Clin. Nutr. 45:432-436.

9. Schaafsma G. 1993. Intoleranța la lactoză și consumul de produse lactate cultivate – o analiză. IDF Nutrition Newsletter 2:15-16. 9. Onwulata C.I., D.R. Rao, P. Vankineni. 1989.

10. Eficiența relativă a iaurtului, a laptelui dulce acidofil, a laptelui hidrolizat cu lactoză și a unei tablete comerciale de lactază în ameliorarea maldigestiei lactozei. Am. J. Clin. Nutr. 49:1233-1237.

11. Sanders M.E. 1994. Bacteriile lactice ca promotori ai sănătății umane. În Functional Foods, ed. I. Goldberg. Londra: Chapman & Hall. 294-322.

12. Saloff-Coste C.J. 1995. Diareea și laptele fermentat. Danone World Newsletter nr. 8.

13. Salminen S., M. Deighton. 1992. Bacteriile acidului lactic din intestin în stări normale și dezordonate. Dig. Dis. 10:227-38.

14. Aronsson B., P. Barany, C.E. Nord, et al. 1987. Diareea asociată cu Clostridium difficile la pacienții uremici. Eur. J. Clin. Microbiol. 6:352-356.

15. Black F.T., P.L. Andersen, J. Orskov, et al. 1989. Eficacitatea profilactică a lactobacililor asupra diareei călătorului. Travel. Med. 7:333-335.

16. Oksanen P.J., S. Salminen, M. Saxelin, et al. 1990. Prevenirea diareei călătorului prin Lactobacillus GG. Ann. Med. 22:53-56.

17. De Simone C., R. Vesely, B. Bianchi Salvadori, et al. 1993. Rolul probioticelor în modularea sistemului imunitar la om și la animale. Int. J. Immunother. IX:23-28.

18. Schiffrin E.J., F. Rochat, H. Link-Amster, et al. 1995. Imunomodularea celulelor sanguine umane în urma ingestiei de bacterii lactice. J. of Dairy Science 78:491-497.

19. Kaila M., E. Isolauri, E. Soppi, et al. 1992. Intensificarea răspunsului celulelor secretoare de anticorpi circulanți la diareea umană de către o tulpină de lactobacillus uman. Pediatr. Res. 32:141-144.

20. Halpern G.M., K.G. Vruwink, J. Van de Water, et al. 1991. Influența consumului de iaurt pe termen lung la adulții tineri. Int. J. Immunother. VII:205-210.

21. Perdigón G., M. Medici, M.E. Bibas Bonet de Jorat, et al. 1993. Efectele imunomodulatoare ale bacteriilor lactice asupra imunității mucoase și tumorale. Int. J. Immunother. IX:29-52.

22. Joneja J.M., E.A. Ayre, K. Paterson. 1997. Fermentația intestinală anormală: sindromul „auto-brewery”. J. Can. Diet. Assoc. 58(2):97-99.

23. Isolauri E., H. Majamaa, T. Arvola, et al. 1993. Lactobacillus casei tulpina GG inversează permeabilitatea intestinală crescută indusă de laptele de vacă la șobolanii care alăptează. Gastroenterology 105:643-1650.

24. Majamaa, H., E. Isolauri. 1997. Probiotice: O abordare nouă în managementul alergiilor alimentare. J. Allergy and Clin. Immunol. Feb:179-185.

25. Buck L.M., S.E. Gilliland. 1994. Compararea tulpinilor proaspăt izolate de Lactobacillus acidophilus de origine intestinală umană pentru capacitatea de a asimila colesterolul în timpul creșterii. Journal of Dairy Science 77:2925-2933.

26. Klaver F.A.M., R. van der Meer. 1993.Asimilarea presupusă a colesterolului de către lactobacili și Bifidobacterium bifidum se datorează activității lor de deconjugare a sărurilor biliare. Appl. Environ. Microbiol. 59:1120-1124.

27. Hitchins A.D., F.E. McDonough. 1989. Aspecte profilactice și terapeutice ale laptelui fermentat. Am. J. of Clin. Nutr. 49:675-684.

28. Fernandes C.F., K.M. Shahani. 1990. Proprietăți anticancerigene și imunologice ale lactobacililor dietetici. Journal of Food Protection 53:704-710.

29. Marteau P., P. Pochart, B. Flourié, et al. 1990. Efectul ingestiei cronice a unui produs lactat fermentat care conține Lactobacillus acidophilus și Bifidobacterium bifidum asupra activităților metabolice ale florei colonice la om. Am. J. Clin. Nutr. 52:685-688.

30. Goldin B.R., S.L. Gorbach. 1984. Efectul hrănirii cu lapte și lactobacili asupra activității enzimelor bacteriene intestinale umane. Am. J. Clin. Nutr. 39:756-61.

31. Goldin B. 1996. Activitatea metabolică a microflorei intestinale și rolul ei în cancerul de colon. Nutrition Today 31(6)(suppl)(suppl):24S-27S.

32. Kampman E., R.A. Goldbohm, P.A. van den Brandt, et al. 1994. Produse lactate fermentate, calciu și cancer colorectal în studiul de cohortă din Olanda. Cancer Research 54:3186-3190.

33. Hilton E., H.D. Isenberg, P. Alperstein, et al. 1992. Ingestia de iaurt care conține Lactobacillus acidophilus ca profilaxie pentru vaginita candidoasă. Ann. Int. Medicine. 116:353-57.

34. Brassart D., A. Donnet-Hughes, J.-R. Neeser, et al. 1995. Tulpini bacteriene lactate cu proprietăți probiotice: criterii de selecție. IDF Nutrition Newsletter 4:29-32.

35. Salminen S., R. Tanaka. 1995. Revistă anuală privind laptele cultivat și probioticele. IDF Nutrition Newsletter 4:47-50.

36. Seppo J., D.C. Donohue. 1996. Evaluarea siguranței tulpinii Lactobacillus GG (ATCC 53103). Nutrition Today 31(6)(suppl.):12S-15S.

37. Health Canada. 2009. The Use of Probiotic Microorganisms in Food (Utilizarea microorganismelor probiotice în alimente). http://www.hc-sc.gc.ca/fn-an/legislation/guide-ld/probiotics_guidance-orientation_probiotiques-eng.php