Probiotické účinky bakterií mléčného kvašení

Shrnutí

Probiotika jsou definována jako „živé mikroorganismy, které při podávání v přiměřeném množství přinášejí hostiteli zdravotní prospěch“. Jednou z nejvýznamnějších skupin probiotických organismů jsou bakterie mléčného kvašení, které se běžně používají ve fermentovaných mléčných výrobcích. Tyto bakterie mají dlouhou historii bezpečného používání v potravinách. V současné době se zájem o tyto druhy zvyšuje, protože výzkum začíná odhalovat mnoho možných zdravotních přínosů spojených s bakteriemi mléčného kvašení.

Působení bakterií mléčného kvašení je druhově a kmenově specifické a závisí na dostatečném množství bakterií ve střevech. Obtížnost identifikace a klasifikace kmenů komplikuje výzkum, protože prospěšné účinky se mohou týkat pouze určitých kmenů.

Bakterie mléčného kvašení mají přesto řadu prokázaných prospěšných účinků. Mohou zlepšovat trávení laktózy, hrát roli v prevenci a léčbě průjmu a působit na imunitní systém, čímž pomáhají tělu odolávat infekcím a bojovat s nimi.

Je třeba provést další práce, aby se potvrdilo, jakou roli mohou bakterie mléčného kvašení hrát v prevenci nebo zpomalení růstu rakoviny tlustého střeva, snižování hladiny cholesterolu, prevenci urogenitálních infekcí, zmírňování zácpy a léčbě potravinových alergií.

Probiotika… zvláštní případ

Vědci při snaze zjistit, jak mohou potraviny posílit zdraví nebo předcházet chronickým onemocněním, narazili kromě živin i na další řadu složek v potravinách. Tato rostoucí oblast informací vyústila v nové označení pro potraviny, které mají další přínosy: funkční potraviny.

Funkční potraviny obsahují významné množství biologicky aktivních složek, které poskytují zdravotní výhody nad rámec základní výživy. Mezi další termíny pro funkční potraviny patří nutraceutika, pharmafoods, designer foods, mood foods… Některé příklady funkčních potravin jsou:

• oves a ječmen, které obsahují beta-glukany a mohou zlepšit kontrolu hladiny cukru v krvi a snížit hladinu cholesterolu v krvi.
• vařená rajčata, která obsahují fytochemickou látku lykopen a mohou snižovat riziko rakoviny prostaty a děložního čípku.
• jogurt a další kysané mléčné výrobky, které obsahují bakterie mléčného kvašení a mohou zlepšovat funkci trávicího systému. Potenciální přínosy jogurtu a dalších potravin obsahujících živé organismy jsou ve skutečnosti tak četné, že tvoří zvláštní podskupinu funkčních potravin: probiotické potraviny.

Probiotické účinky bakterií mléčného kvašení

Dávno předtím, než se objevil termín „probiotikum“, navrhl v roce 1908 Elie Metchnikoff, nositel Nobelovy ceny za imunologii, že důvodem, proč se balkánští rolníci dožívají vysokého věku, je to, že pijí mléko zkvašené pomocí Lactobacillus bulgaricus a Streptococcus thermophilus (1). Předpokládal, že tyto bakterie potlačují „hnilobné kvašení“, což vede k lepšímu zdraví a dlouhověkosti. Jeho myšlenky vyvolaly velký zájem o roli střevní mikroflóry ve zdraví, který přetrvává dodnes.

Dnes se zkoumá mnoho potenciálních zdravotních přínosů probiotických bakterií, od zlepšení mikrobiální rovnováhy ve střevě až po posílení funkce imunitního systému.

Probiotika jsou definována jako „živé mikroorganismy, které při podávání v přiměřeném množství přinášejí hostiteli zdravotní prospěch“ (2). Jednou z nejvýznamnějších skupin probiotických organismů jsou bakterie mléčného kvašení.

Co jsou bakterie mléčného kvašení?

Bakterie mléčného kvašení produkují jako svůj hlavní produkt kyselinu mléčnou. Jsou rozšířené v přírodě – v půdě, zelenině, mase, mléce i v lidském těle. Mnohé se používají ve fermentovaných mléčných výrobcích. Streptococcus thermophilus (S. thermophilus) a Lactobacillus bulgaricus (L. bulgaricus) jsou dvě bakterie potřebné k výrobě jogurtu. Mnoho komerčních jogurtů v Kanadě obsahuje také Lactobacillus acidophilus (L. acidophilus) a Bifidobacterium bifidus (B. bifidus). Lactobacillus casei (L. casei) se často vyskytuje v sýrech. Všechny tyto druhy bakterií jsou v Kanadě uznávány jako probiotické (3).

Tyto druhy lze dále dělit na poddruhy, varianty a kmeny. Obtížnost identifikace a klasifikace kmenů komplikuje výzkum, protože přínosy se mohou týkat pouze určitých kmenů.

Vývoj názvu…

Lactobacillus GG (LGG) byl původně klasifikován jako L. acidophilus kmen GG, pojmenovaný podle objevitelů Gorbacha a Goldina. Postupně se vyvinul do názvu L. casei subspecies rhamnosum nebo L. rhamnosum. V nedávné době bylo navrženo, aby byl překlasifikován na jedinečný druh: L. zeae. Stále se běžně nazývá Lactobacillus GG.

Výzkumy prováděné v době, kdy byl LGG klasifikován jako L. acidophilus, by tedy veškeré přínosy připisovaly acidofilům. Dnes už by tomu tak nebylo.

Co dělá bakterii probiotickou?

Aby bakterie mohly mít nějaký probiotický účinek, musí být schopny přežít jak žaludeční kyseliny (pH až 1,5), tak žlučové kyseliny (pH až 2). To platí pro většinu laktobacilů.

Druhé, bakterie se musí dostat do střev v dostatečném množství, aby měly účinek. Potřebné množství závisí na kmeni a zkoumaném zdravotním přínosu. Minimální účinné množství pro jednotlivé bakterie a konkrétní zdravotní přínosy je aktivně zkoumáno.

Bakterie mohou potřebovat přilnout ke stěně střeva (tj. „implantovat se“) a kolonizovat, aby došlo k účinku. Sherwood Gorbach, jeden z objevitelů Lactobacillus GG, uvádí: „Náš výzkum v předchozích 20 letech nade vší pochybnost prokázal, že implantace ve střevě je kritickou vlastností, kterou musí kmen mít, aby mohl ovlivnit střevní prostředí…“. (4). Jiní však tvrdí, že kontinuální tranzit (např. neustálá konzumace probiotické potravy) je alternativou k implantaci a kolonizaci organismu (5).

Nakonec musí bakterie vykazovat nějaké příznivé účinky na lidské zdraví. Některé příklady zkoumaných příznivých účinků zahrnují zmírnění intolerance laktózy, prevenci a léčbu průjmu, udržování normální střevní flóry, antagonismus proti patogenům, stimulaci imunitního systému, antikarcinogenní aktivitu a snížení hladiny cholesterolu v séru.

Účinky probiotik: jaké jsou důkazy?

Zjištěné přínosy

Trávení laktózy

Je známo, že přítomnost bakterií mléčného kvašení, konkrétně L bulgaricus a S thermophilus v jogurtu, zlepšuje trávení laktózy (6). Zdá se, že buněčné stěny bakterií musí být neporušené (jako je tomu v případě živých bakterií), aby se tento účinek projevil (7). Některé možné mechanismy zlepšeného trávení laktózy zahrnují:

• Laktázová aktivita bakterií skutečně vykonává práci při trávení laktózy ve výrobku, jakmile se dostane do střeva (8).
• Pomalejší tranzitní čas jogurtu může umožnit více času pro zbytkovou střevní laktázu a jogurtové bakterie na trávení laktózy (9).
• Něco v jogurtu může inhibovat fermentaci laktózy, a tím zmírnit příznaky (9).

Sladké acidofilní mléko (mléko s L. acidophilus, které se nenechalo zkvasit) zřejmě nezmírňuje příznaky maldigesce laktózy. Ačkoli některé práce ukazují malý účinek, většina prací neprokazuje žádný účinek (10).

Průjem

Bakterie mléčného kvašení mohou být užitečné při prevenci a zkrácení trvání několika typů průjmu (11).

Řada dobře navržených studií zaznamenala, že fermentované mléčné výrobky účinně zabraňují nebo léčí dětský průjem (12). Účinky byly zaznamenány u L. casei a B. bifidum.

Několik malých studií ukazuje, že bakterie mléčného kvašení mohou snížit výskyt průjmu způsobeného antibiotiky (13). To naznačuje roli bakterií mléčného kvašení u imunosuprimovaných pacientů, kteří rutinně užívají antibiotika (14).

Několik studií cestovního průjmu prokázalo účinnost bakterií mléčného kvašení při snižování výskytu průjmu (15, 16).

Bakterie mléčného kvašení mohou pravděpodobně snížit průjem několika způsoby:

• Bakterie mléčného kvašení soutěží s patogeny o živiny a prostor ve střevech (13).
• Vedlejší produkty metabolismu mohou mít přímý účinek proti patogenům. Například práce in vitro ukazují, že L. casei, L. acidophilus a L. bulgaricus mohou produkovat antimikrobiální látky, jako je acidofilin a bulgarican, které mohou inhibovat růst patogenů (13).
• Bakterie mléčného kvašení mohou být účinné proti průjmu díky účinkům na imunitní systém.

Vliv na imunitní systém

Bakterie mléčného kvašení posilují funkci imunitního systému na střevní i systémové úrovni. U lidí bylo prokázáno, že bakterie mléčného kvašení zvyšují:

• B-lymfocytů neboli B-buněk, které rozpoznávají cizorodé látky (17),
• fagocytární aktivity, která pomáhá ničit cizorodé látky (18),
• buněk vylučujících IgA, IgG a IgM a sérových hladin IgA, což by zvýšilo aktivitu protilátek (19), a
• hladinγ-interferonu, který pomáhá bílým krvinkám bojovat s nemocemi (20).

Dalším způsobem, jak funguje obranyschopnost organismu, je bariéra, kterou zajišťují slizové vrstvy střeva. Sliznice představuje fyzickou bariéru, která obvykle brání průchodu cizorodých látek střevem. Stejně tak se ve střevní sliznici nachází velké množství imunitních buněk. To umožňuje interakci střeva s imunitním systémem. Bakterie mléčného kvašení mohou stimulovat imunitní aktivitu ve střevní sliznici (21).

Při stavech, jako je alergie nebo syndrom automatického kvašení (abnormální střevní kvašení, jehož výsledkem je zvýšená hladina etanolu v krvi), se může zvýšit propustnost tenkého střeva, což umožňuje průchod nestrávených molekul bílkovin (22). Bylo prokázáno, že Lactobacillus GG zvrátí propustnost střeva (23).

Probiotické bakterie mohou hrát roli při léčbě potravinové alergie. To bylo prokázáno v experimentu s kojenci, o kterých bylo známo, že mají exémy způsobené alergií na kravské mléko (24). Kojenci v experimentální skupině dostávali hydrolyzovanou syrovátkovou výživu obohacenou o LGG, zatímco kojenci v kontrolní skupině dostávali pouze syrovátkovou výživu. Stav kůže kojenců, kteří dostávali LGG, se ve srovnání s kontrolní skupinou výrazně zlepšil. Kromě toho se u experimentální skupiny zlepšila hladina faktorů spojených se zánětem střeva.

Potenciální přínosy

Hypocholesterolemické účinky

Některé kmeny L. acidophilus mohou v přítomnosti žluči vychytávat cholesterol (25). Jiný výzkum in vitro ukazuje, že cholesterol se může srážet s volnými žlučovými solemi v přítomnostiL. acidophilus, zejména v kyselém prostředí (26). Byla tedy vyslovena hypotéza, že jeden nebo oba tyto účinky se projeví in vivo a pomohou snížit sérový cholesterol u lidí.

Různé studie s fermentovanými mléčnými výrobky neprokázaly buď žádný účinek, nebo snížení hladiny cholesterolu. Závěrem lze říci, že zatím neexistují dobré důkazy, které by potvrzovaly účinek fermentovaných mléčných výrobků na snižování cholesterolu.

Zácpa

Mléčné výrobky fermentované některými kmeny L. acidophilus a bifidobakterií zkracují dobu střevního tranzitu. Tento účinek může být užitečný pro osoby trpící zácpou, např. starší osoby (27). K potvrzení této skutečnosti je třeba provést dobře kontrolovanou studii na lidech.

Rakovina tlustého střeva

Některé bakterie mléčného kvašení mohou pomáhat předcházet vzniku rakoviny tlustého střeva. Bylo také prokázáno, že bakterie mléčného kvašení zpomalují růst experimentální rakoviny, i když výsledky nejsou dlouhodobé.

Zdá se, že bakterie mléčného kvašení mohou snižovat hladinu enzymů tlustého střeva, které přeměňují prokarcinogeny na karcinogeny. Konkrétně mohou bakterie mléčného kvašení snížit hladiny enzymů β-glukuronidázy, nitroreduktázy a azoreduktázy (28). Bakterie mléčného kvašení se mohou také podílet na přímé redukci prokarcinogenů, například tím, že vychytávají dusitany a snižují hladiny sekundárních žlučových solí (28). Ve většině zpráv se tyto účinky projevují pouze po dobu, kdy jsou bakterie konzumovány (28).

Změny enzymové aktivity u lidí byly pozorovány u L. acidophilus a B. bifidum (29) a LGG (30). Studie na zvířatech ukazují méně nádorů u zvířat vystavených působení karcinogenu v přítomnosti LGG ve srovnání se zvířaty vystavenými působení karcinogenu bez prospěchu LGG (31). U lidí epidemiologické zprávy ukazují, že populace konzumující fermentované mléčné výrobky má snížené riziko rakoviny tlustého střeva (32). Zatím však není jasný vztah mezi příjmem bakterií mléčného kvašení a prevencí rakoviny.

Urogenitální infekce

Bakterie mléčného kvašení mohou snižovat kandidové vaginální infekce. to je zatím spekulativní, nicméně by to byl výzkum, který by stál za to. Jedna malá studie ukázala, že u žen s opakující se vaginální kandidózou, které jedly denně 8 uncí jogurtu obsahujícího L acidophilus, se vaginální kandidóza vyskytovala méně často než v kontrolním období, kdy nejedly žádný jogurt (33). Jednalo se o zkříženou studii, která začala s 21 ženami. Osm z těch, které začaly v léčebné skupině, odmítlo přejít do kontrolní fáze, protože se u nich vyskytlo mnohem méně infekcí. studii tak dokončilo pouze 13 žen.

Vředy

Bakterie mléčného kvašení se ukazují jako slibné proti žaludečním vředům. Práce se specifickým kmenem L. acidophilus prokázala, že L. acidophilus účinně soutěží (in vitro ) s Heliobacter pylori o místa přichycení, čímž omezuje počet H. pylori, které se mohou přichytit na buněčnou stěnu (34). Infekce H. pylori je rizikovým faktorem pro vznik žaludečních vředů. Malá studie na pacientech s vředy ukázala, že Bifidobacteria bifidum podpořila hojení žaludečních vředů u 50 % pacientů a eradikaci H. pylori ze sliznic u 30 % pacientů (35).

Některé probiotické potraviny: jaké bakterie obsahují?

Jogurt vždy obsahuje L. bulgaricus a S. pylori. thermophilus a může obsahovat L. acidophilus a bifidobakterie.

Acidofilní mléko obsahuje Lactobacillus acidophilus.

Kefír obsahuje řadu bakterií mléčného kvašení, včetně Lactococcus lactis, Lactococcus cremoris, Lactobacillus kefir, Lactobacillus casei, Lactobacillus acidophilus a druhů Leuconostoc. Obsahuje také kvasinky.

Je důležité si uvědomit, že k dosažení prospěšnosti probiotik je zapotřebí minimálního počtu bakterií. Ačkoli minimální dávky dosud nebyly stanoveny, výzkumné dávky se obvykle pohybují kolem 1 miliardy buněk. Ne všechny fermentované výrobky obsahují dostatek aktivních mikroorganismů. Čím čerstvější výrobek, tím více organismů bude aktivních.

Bezpečnost probiotik

Bakterie mléčného kvašení tradičně používané ve fermentovaných mléčných výrobcích mají dlouhou historii bezpečného používání. S rostoucím zájmem o používání nových kmenů však bude důležité testování bezpečnosti.

Lactobacillus GG prošel rozsáhlým testováním bezpečnosti a účinnosti jeho použití. V roce 1992 byl schválen Poradním výborem pro nové potraviny ve Velké Británii a v roce 1996 japonskými úřady pro funkční potraviny (36).

V Kanadě jsou probiotika při přidávání do potravin považována za složku potravin a jsou regulována organizací Health Canada podle zákona o potravinách a léčivech. Kanadská agentura pro kontrolu potravin (CFIA) je odpovědná za prosazování zákona o potravinách a léčivech, zatímco výrobci jsou odpovědní za bezpečnost potravin, které vyrábějí a prodávají. Health Canada vypracovala metodický dokument, který popisuje, jakým způsobem lze uvádět zdravotní tvrzení o probiotikách (37).

Některé probiotické bakterie a jejich účinky
Bakterie	Probiotické účinky	Vlastnosti	Použití
Lactobacillus acidophilus . (6 hlavních druhů)	může bojovat proti střevním infekcím zkracuje střevní tranzitní čas může předcházet rakovině tlustého střeva může být hypocholesterolemický Jediný kmen L. acidophilus pravděpodobně nedosáhne všech předpokládaných přínosů.	Dobře přežívá tranzit trávicím traktem. (Schopnost přežívat se u jednotlivých kmenů liší.) Adherence prokázána in vitro, ale zatím nebyla prokázána in vivo. Roste pomalu ve fermentovaných výrobcích; nepřežívá dobře ve fermentovaných výrobcích.	Používá se v acidofilním mléce a v kefíru; může se používat v jogurtu.
Lactobacillus GG	zabraňuje růstu patogenů zpomaluje rozvoj nádorů zabraňuje cestovatelskému průjmu, průjmy spojené s antibiotiky a průjmy kojenců	vytváří a kolonizuje střevní trakt. Kolonizace však není trvalá. Výzkumy ukazují, že probiotické bakterie by se měly konzumovat několikrát týdně, aby se jejich účinek na střevní flóru udržel.	V Evropě jsou k dispozici některé nové fermentované mléčné výrobky s použitím LGG. Minimální množství nutná pro kolonizaci jsou: 108 buněk v mléce, 109 buněk ve fermentovaném mléce nebo enterických tabletách, 1010 buněk v želatinových kapslích.
Lactobacillus casei	změňuje aktivitu střevní mikroflóry snižuje výskyt a trvání průjmu může zvýšit hladinu imunoglobulinů, γ-interferonu a fagocytární aktivity snižuje aktivitu enzymů souvisejících s rizikem rakoviny tlustého střeva	Některé kmeny přežívají střevní tranzit. Nedochází ke kolonizaci.	Používá se v kefíru a mnoha sýrech, včetně parmezánu a čedaru; používá se také v některých nových výrobcích podobných jogurtu.
Bifidobakterie (29 kmenů)	změňuje složení střevní flóry, pravděpodobně omezením růstu patogenů snižuje výskyt a trvání průjmu zkracuje dobu střevního tranzitu může snižovat výskyt rakoviny tlustého střeva zvyšuje produkci sekrečních imunoglobulinů	Některé kmeny bifidobakterií dobře přežívají střevní tranzit, ale není jasné, zda se implantují. Produkují kyselinu mléčnou i octovou.	Mohou být použity v jogurtu.

1. Metchnikoff E. 1908. Prodloužení života. 1. vydání. G.P. Putnam’s Sons, NY.

2. Hill C. et al. 2014. Odborný konsenzuální dokument: International Scientific Association for Probiotics and Prebiotics consensus statement on the scope and approproiate use of the term probiotic. Nature Reviews Gastroenterology & Hepatology 11:506-514. doi:10.1038/nrgastro.2014.66

3. Health Canada (Zdraví v Kanadě). 2009. Přijatá tvrzení o povaze probiotických mikroorganismů v potravinách. http://www.hc-sc.gc.ca/fn-an/label-etiquet/claims-reclam/probiotics_claims-allegations_probiotiques-eng.php

4. Gorbach S.L. 1996. Objev Lactobacillus GG. Nutrition Today Vol. 31(6) (suppl.):2S-4S.

5. Saloff-Coste C.J. 1997. Lactobacillus acidophilus. Danone World Newsletter No. 13.

6. Martini M.C., D. Kukielka, D. Savaiano. 1991. Trávení laktózy z jogurtu: vliv jídla a další laktózy. Am. J. Clin. Nutr. 53:1253-8.

7. Kuhn C., A. Titze, C.A. Lorenz. 1996. Jsou životaschopné mikroorganismy nezbytné pro zvýšení střevní hydrolýzy laktózy β-galaktosidázou fermentovaných mléčných výrobků? IDF Nutrition Newsletter 5:38.

8. Martini M.C., G.L. Bollweg, M.D. Levitt, et al. 1987. Trávení laktózy jogurtovou β-galaktosidázou: vliv pH a integrity mikrobiálních buněk. Am. J. Clin. Nutr. 45:432-436.

9. Schaafsma G. 1993. Intolerance laktózy a konzumace kultivovaných mléčných výrobků – přehled. IDF Nutrition Newsletter 2:15-16. 9. Onwulata C.I., D.R. Rao, P. Vankineni. 10. Srov. např. 1989.

10. Relativní účinnost jogurtu, sladkého acidofilního mléka, mléka s hydrolyzovanou laktózou a komerční tablety laktázy při zmírnění maldigesce laktózy. Am. J. Clin. Nutr. 49:1233-1237.

11. Sanders M.E. 1994. Bakterie mléčného kvašení jako podporovatelé lidského zdraví. In Functional Foods, ed. I. Goldberg. London: Chapman & Hall. 294-322.

12. Saloff-Coste C.J. 1995. Průjem a fermentovaná mléka. Danone World Newsletter No. 8.

13. Salminen S., M. Deighton. 1992. Bakterie mléčného kvašení ve střevě v normálním a narušeném stavu. Dig. Dis. 10:227-38.

14. Aronsson B., P. Barany, C.E. Nord a kol. 1987. Clostridium difficile asociovaný průjem u pacientů s uremií. Eur. J. Clin. Microbiol. 6:352-356.

15. Black F.T., P.L. Andersen, J. Orskov a kol. 1989. Profylaktická účinnost laktobacilů na cestovatelský průjem. Travel. Med. 7:333-335.

16. Oksanen P.J., S. Salminen, M. Saxelin, et al. 1990. Prevence cestovatelského průjmu pomocí Lactobacillus GG. Ann. Med. 22:53-56.

17. De Simone C., R. Vesely, B. Bianchi Salvadori, et al. 1993. Úloha probiotik v modulaci imunitního systému u člověka a u zvířat. Int. J. Immunother. IX:23-28.

18. Schiffrin E.J., F. Rochat, H. Link-Amster a kol. 1995. Imunomodulace lidských krvinek po požití bakterií mléčného kvašení. J. of Dairy Science 78:491-497.

19. Kaila M., E. Isolauri, E. Soppi a kol. 1992. Enhancement of the circulating antibody secreting cell response on human diarrhea by a human lactobacillus strain. Pediatr. Res. 32:141-144.

20. Halpern G.M., K.G. Vruwink, J. Van de Water a kol. 1991. Vliv dlouhodobé konzumace jogurtu u mladých dospělých. Int. J. Immunother. VII:205-210.

21. Perdigón G., M. Medici, M.E. Bibas Bonet de Jorat, et al. 1993. Imunomodulační účinky bakterií mléčného kvašení na slizniční a nádorovou imunitu. Int. J. Immunother. IX:29-52.

22. Joneja J.M., E.A. Ayre, K. Paterson. 1997. Abnormální střevní fermentace: syndrom „automatického pivovaru“. J. Can. Diet. Assoc. 58(2):97-99.

23. Isolauri E., H. Majamaa, T. Arvola a kol. 1993. Lactobacillus casei kmen GG zvrátí zvýšenou střevní permeabilitu vyvolanou kravským mlékem u kojících potkanů. Gastroenterology 105:643-1650.

24. Majamaa, H., E. Isolauri. 1997. Probiotika: A new approach in the management of food allergy [Nový přístup v léčbě potravinové alergie]. J. Allergy and Clin. Immunol. Feb:179-185.

25. Buck L.M., S.E. Gilliland. 1994. Porovnání čerstvě izolovaných kmenů Lactobacillus acidophilus lidského střevního původu z hlediska schopnosti asimilovat cholesterol během růstu. Journal of Dairy Science 77:2925-2933.

26. Klaver F.A.M., R. van der Meer. 1993.předpokládaná asimilace cholesterolu laktobacily a Bifidobacterium bifidum je způsobena jejich dekonjugační aktivitou žlučových solí. Appl. environ. Microbiol. 59:1120-1124.

27. Hitchins A.D., F.E. McDonough. 1989. Profylaktické a terapeutické aspekty fermentovaného mléka. Am. J. of Clin. Nutr. 49:675-684.

28. Fernandes C.F., K.M. Shahani. 1990. Antikarcinogenní a imunologické vlastnosti dietních laktobacilů. Journal of Food Protection 53:704-710.

29. Marteau P., P. Pochart, B. Flourié a kol. 1990. Effect of chronic ingestion of a fermented dairy product containing Lactobacillus acidophilus and Bifidobacterium bifidum on metabolic activities of the colon flora in humans [Vliv chronického příjmu fermentovaného mléčného výrobku obsahujícího Lactobacillus acidophilus a Bifidobacterium bifidum na metabolické aktivity střevní flóry u lidí]. Am. J. Clin. Nutr. 52:685-688.

30. Goldin B.R., S.L. Gorbach. 1984. The effect of milk and lactobacillus feeding on human intestinal bacterial enzyme activity [Vliv podávání mléka a laktobacilů na aktivitu střevních bakterií u člověka]. Am. J. Clin. Nutr. 39:756-61.

31. Goldin B. 1996. Metabolická aktivita střevní mikroflóry a její role při vzniku rakoviny tlustého střeva. Nutrition Today 31(6)(suppl):24S-27S.

32. Kampman E., R.A. Goldbohm, P.A. van den Brandt a kol. 1994. Fermentované mléčné výrobky, vápník a kolorektální karcinom v nizozemské kohortové studii. Cancer Research 54:3186-3190.

33. Hilton E., H.D. Isenberg, P. Alperstein, et al. 1992. Požívání jogurtu obsahujícího Lactobacillus acidophilus jako profylaxe kandidové vaginitidy. Ann. Int. Medicine. 116:353-57.

34. Brassart D., A. Donnet-Hughes, J.-R. Neeser, et al. 1995. Kmeny mléčných bakterií s probiotickými vlastnostmi: kritéria výběru. IDF Nutrition Newsletter 4:29-32.

35. Salminen S., R. Tanaka. 1995. Annual review on cultured milks and probiotics [Roční přehled o kultivovaných mlékách a probiotikách]. IDF Nutrition Newsletter 4:47-50.

36. Seppo J., D.C. Donohue. 1996. Hodnocení bezpečnosti kmene Lactobacillus GG (ATCC 53103). Nutrition Today 31(6)(suppl.):12S-15S.

37. Health Canada. 2009. Použití probiotických mikroorganismů v potravinách. http://www.hc-sc.gc.ca/fn-an/legislation/guide-ld/probiotics_guidance-orientation_probiotiques-eng.php